摘要： 【目的】比較雙峰駝（Camelus bactrianus） 正常睪丸及隱睪中性激素受體分布差異，探究雙峰駝隱睪病理學(xué)變化與性激素受體的相關(guān)性，為雙峰駝睪丸病理研究提供形態(tài)學(xué)參考?！痉椒ā坎捎贸Ｒ?guī)組織切片染色及特殊染色法觀察隱睪病理學(xué)組織形態(tài)以及糖原和蛋白的分布變化；應(yīng)用免疫組織化學(xué)法及免疫熒光技術(shù)定位雄激素受體（androgen receptor，AR）、雌激素受體α （estrogen receptor alpha，ERα）、雌激素受體β （estrogenreceptor beta，ERβ）、促黃體生成素受體（luteinizing hormone receptor，LHR） 和促卵泡激素受體（follicle-stimulatinghormone receptor，F(xiàn)SHR） 在正常睪丸及隱睪的分布及表達。【結(jié)果】與正常睪丸相比，隱睪中各類細(xì)胞數(shù)量顯著減少，Leydig 細(xì)胞發(fā)育遲緩，Sertoli 細(xì)胞多呈幼稚態(tài)，結(jié)締組織及生精小管基膜酸性黏蛋白陽性強度下降，總蛋白分布下降；ERα、LHR 和FSHR 的表達極顯著升高（Plt;0.01），AR 的表達極顯著降低（Plt;0.01），ERβ 的表達差異不顯著（Pgt;0.05）；AR 在Leydig 細(xì)胞和Sertoli 細(xì)胞中的表達強度減弱，ERα 在Sertoli 細(xì)胞中的表達強度減弱，ERβ 在Leydig 細(xì)胞和Sertoli 細(xì)胞中的表達強度無變化，LHR 和FSHR 在Leydig 細(xì)胞和Sertoli 細(xì)胞中的表達強度增強?！窘Y(jié)論】雙峰駝隱睪組織結(jié)構(gòu)發(fā)育遲緩，糖原及蛋白分泌異常。隱睪Leydig細(xì)胞和Sertoli 細(xì)胞性激素受體表達異常，不利于精子正常發(fā)生，阻礙生精細(xì)胞發(fā)育。

關(guān)鍵詞： 雙峰駝；性激素受體；免疫組化；隱睪

中圖分類號： S824.1 文獻標(biāo)志碼： A 文章編號： 1004–390X （2024） 02?0027?09

駱駝隱睪癥發(fā)生率約為0.7%，即幼駝出生后睪丸未及時下降至陰囊，造成睪丸處于腹腔及腹股溝之間，對雄性駱駝生殖繁育影響較大。性激素分泌紊亂可導(dǎo)致隱睪并損害睪丸功能，通過作用于對應(yīng)性激素受體參與調(diào)節(jié)睪丸發(fā)育及精子發(fā)生[1-2]。胚胎期睪丸下降階段，雄激素通過雄激素受體（androgen receptor，AR） 作用于下生殖股神經(jīng)，控制睪丸引帶及提睪肌分化，AR 缺乏時會導(dǎo)致引帶內(nèi)陷、睪丸鞘突形成，嚴(yán)重影響睪丸正常下降，增加隱睪發(fā)病率[3]。外源雌激素可通過雌激素受體（estrogen receptor，ER） 作用干擾睪丸Leydig 細(xì)胞發(fā)育，通過影響雄激素及胰島素樣肽3 （insulin-like peptide 3，INSL-3） 的分泌導(dǎo)致隱睪[4-5]。ERα 和ERβ 在睪丸Leydig 細(xì)胞表達異常會提高隱睪發(fā)病概率[6]。研究顯示：隱睪患者血清促性腺激素（gonadotropin-releasing hormone，GnRH） 水平明顯升高[7]。促黃體生成激素（luteinizinghormone，LH） 是睪丸Leydig 細(xì)胞合成雄激素的關(guān)鍵因子，胚胎發(fā)育早期缺少LH 會導(dǎo)致胎盤中雄激素分泌量下降，導(dǎo)致生殖器官先天發(fā)育障礙[8]。在LH 與促卵泡激素（follicle-stimulatinghormone，F(xiàn)SH） 雙重刺激下，間質(zhì)細(xì)胞促黃體生成素受體（luteinizing hormone receptor，LHR） 才對LH 發(fā)揮作用。FSH 通過促卵泡激素受體（folliclestimulatinghormone receptor，F(xiàn)SHR） 作用于生精細(xì)胞和Leydig 細(xì)胞啟動生精過程，還可促使Leydig細(xì)胞中的雄激素在芳香化酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に兀答佌{(diào)節(jié)雄激素的分泌[9]；而FSH 和FSHR突變會使男性精子發(fā)生受損，導(dǎo)致不育[10]。因此，睪丸作為分泌激素和產(chǎn)生精子的部位，性激素受體與隱睪等繁殖疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

雙峰駝（Camelus bactrianus） 是中國重要的資源和優(yōu)勢畜種[11]。隱睪是駱駝科（Camelidae） 動物繁殖功能障礙疾病之一，由于睪丸未正常下降，導(dǎo)致體溫升高及激素分泌異常，嚴(yán)重影響哺乳動物精子發(fā)生及精液品質(zhì)[12]。袁莉剛等[13-14]研究發(fā)現(xiàn)：雙峰駝隱睪中Sertoli 細(xì)胞分化異常，Leydig細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)育不均衡，間質(zhì)組織中合成膠原纖維的能力下降，網(wǎng)狀纖維分布明顯，間質(zhì)血管及生精小管固有膜糖原陽性反應(yīng)較弱。此外，雙峰駝隱睪較正常睪丸組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，影響生殖功能[15]。動物發(fā)生隱睪時，受熱應(yīng)激及激素調(diào)控異常，睪丸組織結(jié)構(gòu)及各類激素表達異常，但已有研究未深入探討導(dǎo)致異常的原因。性激素作為調(diào)節(jié)睪丸的關(guān)鍵因素，與隱睪的發(fā)生密切相關(guān)，因此，本研究通過觀察隱睪中性激素受體分布及水平與正常睪丸的不同，進一步探究雙峰駝隱睪癥與性激素受體變化的關(guān)系，以期為雙峰駝睪丸病理和生殖生理研究提供形態(tài)學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物與樣品制備

試驗動物收集自寧夏回族自治區(qū)吳忠澇河橋屠宰場。采用睪丸切除術(shù)收集12 頭2 周齡雄性雙峰駝的睪丸，其中10 頭正常睪丸為對照組，2 頭隱睪為試驗組。新鮮樣品使用4% 多聚甲醛溶液固定保存。