摘 要：首次在中國(guó)報(bào)道1例由長(zhǎng)頸囊尾蚴（Cysticercus longicollis）引起的5歲雄性圈養(yǎng)環(huán)尾狐猴（Lemur catta）皮下囊尾蚴病，患病動(dòng)物表現(xiàn)為明顯的臀部囊腫，但無(wú)其他異常體征。該病例就診于四川農(nóng)業(yè)大學(xué)第二教學(xué)動(dòng)物醫(yī)院。在就診期間，采用細(xì)針穿刺對(duì)囊腫內(nèi)容物進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查。結(jié)果顯示：囊腫內(nèi)含有大量囊尾蚴，典型囊尾蚴呈橢圓形，具有長(zhǎng)而可伸縮的頸部和單個(gè)頭節(jié)，頭節(jié)上有4個(gè)吸盤(pán)和16個(gè)（單排）小鉤。通過(guò)對(duì)囊尾蚴DNA進(jìn)行nad1 和cox1 基因擴(kuò)增及測(cè)序，進(jìn)一步確定該囊尾蚴為肥頭絳蟲(chóng)（Taenia crassiceps）的幼蟲(chóng)形態(tài)，即長(zhǎng)頸囊尾蚴，研究結(jié)果可為該寄生蟲(chóng)在國(guó)內(nèi)的流行病學(xué)調(diào)查及防控提供參考。

關(guān)鍵詞：肥頭絳蟲(chóng)；環(huán)尾狐猴；長(zhǎng)頸囊尾蚴

中圖分類(lèi)號(hào)：S858. 9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：2310 - 1490（2024）- 03 - 0648 - 05

DOI：10.12375/ysdwxb.20240321

肥頭絳蟲(chóng)（Taenia crassiceps）屬于扁型動(dòng)物門(mén)（Platyhelminthes）多節(jié)絳蟲(chóng)亞綱（Cestoda）帶絳蟲(chóng)科（Taeniidae）帶絳蟲(chóng)屬（Taenia）。該寄生蟲(chóng)主要以赤狐（Vulpes vulpes）和其他犬科（Canidae）動(dòng)物為終末宿主，流行于北美洲、亞洲和歐洲等地［1?2］。肥頭絳蟲(chóng)的傳播途徑為糞口傳播，食用被蟲(chóng)卵污染的食物和水可導(dǎo)致以嚙齒動(dòng)物為主的中間宿主感染。蟲(chóng)卵在體內(nèi)隨后發(fā)育成長(zhǎng)頸囊尾蚴（Cysticercus longicol?lis），其體態(tài)透明，呈橢圓形，長(zhǎng)度可達(dá)3 mm，頭節(jié)有4個(gè)吸盤(pán)和28～34個(gè)小鉤［3］，并定殖于皮下、肌肉和胸膜腹腔內(nèi)等部位形成囊腫。當(dāng)終末宿主捕食受感染的中間宿主后，長(zhǎng)頸囊尾蚴通過(guò)吸盤(pán)附著在腸道內(nèi)棲息，并發(fā)育成絳蟲(chóng)成蟲(chóng)。

據(jù)報(bào)道，肥頭絳蟲(chóng)在德國(guó)、斯洛文尼亞、西班牙和法國(guó)的赤狐中感染率較高，為19. 9%～29. 0%［4?7］。相比之下，該寄生蟲(chóng)在伊比利亞半島、意大利、瑞士和中國(guó)的赤狐中流行率相對(duì)較低，為0. 7%～8. 0%［8?11］。目前，全球范圍內(nèi)有多例環(huán)尾狐猴（Lemur catta）感染長(zhǎng)頸囊尾蚴的病例報(bào)道［12?14］，其中一例未見(jiàn)明顯癥狀即突發(fā)死亡［14］。人類(lèi)也有多例感染長(zhǎng)頸囊尾蚴的病例報(bào)道［15?16］，主要是免疫力低下的人食用了被蟲(chóng)卵污染的食物或水所致。盡管長(zhǎng)頸囊尾蚴感染健康人類(lèi)較為少見(jiàn)，但仍應(yīng)考慮其潛在的人獸共患風(fēng)險(xiǎn)。

首次在中國(guó)報(bào)道1例圈養(yǎng)環(huán)尾狐猴感染肥頭絳蟲(chóng)囊尾蚴病，以期為長(zhǎng)頸囊尾蚴蟲(chóng)在國(guó)內(nèi)的流行病學(xué)調(diào)查及防控提供參考。

1 材料與方法

1. 1 病例描述與囊尾蚴樣品采集

研究對(duì)象為2019年從捷克共和國(guó)引入四川雅安碧峰峽動(dòng)物園的1只5歲成年雄性環(huán)尾狐猴。該猴為開(kāi)放式飼養(yǎng)，食物包括紅棗、花生、蘋(píng)果、胡蘿卜、窩窩頭、瓜子以及一些游客私自喂食的食品。2021 年5 月，飼養(yǎng)員發(fā)現(xiàn)該猴臀部有皮下囊腫（圖1），但沒(méi)有其他異常癥狀，園區(qū)獸醫(yī)使用氨芐西林（批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥字154416286，濰坊鴻盛生物科技有限公司）對(duì)其進(jìn)行治療。給藥方式為口服給藥，劑量為50 mg/kg，給藥周期為1 次/d，總給藥時(shí)間為12 d。治療結(jié)束后，患病環(huán)尾狐猴囊腫未見(jiàn)消退。

2022年10月20日，患病環(huán)尾狐猴被送往雅安市四川農(nóng)業(yè)大學(xué)第二教學(xué)動(dòng)物醫(yī)院接受治療。值班醫(yī)師接診后，首先使用電動(dòng)剃刀剃除該猴患病部位周?chē)l(fā)，確保采樣區(qū)域清潔無(wú)毛；而后使用碘伏溶液徹底消毒并采用23G針頭及注射器進(jìn)行細(xì)針抽吸，抽取的樣本立即轉(zhuǎn)移到載玻片上，確保樣本均勻分布；最后，使用光學(xué)顯微鏡對(duì)載玻片上的樣本進(jìn)行觀察，并拍攝圖像記錄樣本特征。通過(guò)鏡檢確定該猴為寄生蟲(chóng)感染后，值班醫(yī)師采用抗寄生蟲(chóng)藥阿苯達(dá)唑（批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥生產(chǎn)證字15295號(hào)，河南南華千牧生物科技有限公司）進(jìn)行保守治療。給藥方式為口服給藥，劑量為20 mg/kg，給藥周期為1次/d，總給藥時(shí)間為30 d。在治療過(guò)程中，囊腫在第10天開(kāi)始明顯縮小，到第25天時(shí)基本消退，該猴無(wú)不良反應(yīng)。治療結(jié)束后，環(huán)尾狐猴恢復(fù)健康，未再發(fā)現(xiàn)其他異常癥狀。

1. 2 囊尾蚴基因組DNA 提取及線粒體nad1 和cox1 基因的擴(kuò)增

參照糞便DNA 提取試劑盒（OMEGA，美國(guó)）說(shuō)明書(shū)從單個(gè)囊尾蚴中提取DNA。合成Samorek-Pieróg等［13］報(bào)道的引物，對(duì)提取DNA的線粒體細(xì)胞色素c氧化酶第Ⅰ亞基（cox1）基因和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶第Ⅰ亞基（nad1）基因的部分序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物信息見(jiàn)表1。

1. 3 測(cè)序和系統(tǒng)發(fā)育分析

擴(kuò)增片段的測(cè)序工作由生工生物工程（上海）股份有限公司完成，測(cè)序方式為Sanger 雙脫氧測(cè)序。使用SeqMan Pro軟件對(duì)擴(kuò)增的正反向序列進(jìn)行比對(duì)和拼接。隨后利用BLAST在GenBank中搜索拼接序列的同源序列，并使用BLAST核苷酸算法進(jìn)行物種鑒定。利用MEGA11軟件中的UPGMA法對(duì)拼接序列及部分同源序列構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)，模型為“Kimura 2-parameter”，Bootstrap設(shè)置為1 000。

2 結(jié)果

2. 1 鏡檢結(jié)果

顯微鏡下觀察到大量存活的囊尾蚴，典型囊尾蚴呈橢圓形囊體，具有長(zhǎng)而可伸縮的頸部和單個(gè)頭節(jié)（圖2A），頭節(jié)上有4 個(gè)吸盤(pán)和16 個(gè)（單排）小鉤（圖2B）。

2. 2 PCR 擴(kuò)增及進(jìn)化樹(shù)

利用合成的引物成功擴(kuò)增囊尾蚴的DNA片段，兩個(gè)PCR反應(yīng)產(chǎn)物均符合預(yù)期大小。使用GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)擴(kuò)增子的測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析和比較，結(jié)果證實(shí)該寄生蟲(chóng)為肥頭絳蟲(chóng)。

擴(kuò)增的nad1和cox1基因序列均已上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)，登錄號(hào)分別為OP991968. 1和OP831183. 1?；趎ad1 基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)（圖3A）顯示，本研究的肥頭絳蟲(chóng)與波蘭某環(huán)尾狐猴感染的肥頭絳蟲(chóng)（OM992098. 1）親緣關(guān)系最近，置信度為100%?；赾ox1 基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)（圖3B）顯示，本研究的肥頭絳蟲(chóng)與捷克共和國(guó)某地松鼠（Xerus in?auris）感染的肥頭絳蟲(chóng)（KY321320. 1）親緣關(guān)系最近，置信度為62%。

3 討論

首次在中國(guó)報(bào)道圈養(yǎng)環(huán)尾狐猴感染肥頭絳蟲(chóng)囊尾蚴病，雖然該病的感染源和傳播方式尚不清楚，但系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)結(jié)果顯示本研究的病原與波蘭和捷克共和國(guó)的病原親緣關(guān)系最近，而本病例環(huán)尾狐猴正是從捷克共和國(guó)引進(jìn)，波蘭和捷克共和國(guó)為鄰國(guó)關(guān)系，所以初步推測(cè)該猴在引入前就已感染病原，并在碧峰峽動(dòng)物園發(fā)病。

阿苯達(dá)唑作為一種苯并咪唑類(lèi)的廣譜抗寄生蟲(chóng)藥物，可有效治療蛔蟲(chóng)、絳蟲(chóng)、蟯蟲(chóng)和鉤蟲(chóng)等多種寄生蟲(chóng)感染［17］，所以該藥物對(duì)本病例有較好的治療效果。除阿苯達(dá)唑外，藥物吡喹酮和硝唑沙奈也可用于治療絳蟲(chóng)引起的疾病［18?19］。

肥頭絳蟲(chóng)及其幼蟲(chóng)能夠感染狐貍、非人靈長(zhǎng)類(lèi)、鼠、犬甚至人，其中非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物對(duì)帶絳蟲(chóng)科物種高度敏感。在各種圈養(yǎng)的非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物中，已有多例多房棘球絳蟲(chóng)（Echinococcus multilocularis）、奧氏棘球絳蟲(chóng)（E. ortleppi）、肥頭絳蟲(chóng)和馬帶絳蟲(chóng)（Tae?nia martis）引起的感染病例報(bào)道［12?13，20?23］。所以應(yīng)充分考慮肥頭絳蟲(chóng)的人獸共患潛力，在監(jiān)測(cè)、診斷和治療等多個(gè)方面進(jìn)行深入研究，以減少該寄生蟲(chóng)的公共衛(wèi)生危害。

參考文獻(xiàn)：

［1］ SHIMALOV V， SHIMALOV V. Helminth fauna of the red fox

（Vulpes vulpes Linnaeus， 1758） in southern Belarus［J］. Parasitology

Research， 2002， 89（1）： 77-78.

［2］ LESCANO A G， ZUNT J. Other cestodes： sparganosis， coenurosis

and Taenia crassiceps cysticercosis［J］. Handbook of Clinical

Neurology， 2013， 114： 335-345.

［3］ LOOS-FRANK B. An up-date of Verster’s （1969）‘ Taxonomic

revision of the genus Taenia Linnaeus’ （Cestoda） in table format

［J］. Systematic Parasitology， 2000， 45（3）： 155-184.

［4］ WESSBECHER H， DALCHOW W， STOYE M. The helminth

fauna of the red fox （Vulpes vulpes Linne 1758） in the administrative

district of Karlsruhe. 1. Cestodes［J］. Deutsche Tierarztliche

Wochenschrift， 1994， 101（8）： 322-326.

［5］ RATAJ A V， POSEDI J， ZELE D A， et al. Intestinal parasites of

the red fox （Vulpes vulpes） in Slovenia［J］. Acta Veterinaria Hungarica，

2013， 61（4）： 454-462.

［6］ ALVAREZ M F， IGLESIAS R， GARCíA J， et al. Intestinal helminths

of the red fox （Vulpes vulpes L.） in Galicia （northwest

Spain）［J］. Wiadomosci Parazytologiczne， 1995， 41（4） ：

429-442.

［7］ PéTAVY A F， DEBLOCK S， PROST C. Epidemiology of alveolar

echinococcosis in France. 1. Intestinal helminths in the red fox

（Vulpes vulpes L.） from Haute-Savoie［J］. Annales de Parasitologie

Humaine et Comparee， 1990， 65（1）： 22-27.

［8］ SANCHIS-MONSONíS G， FANELLI A， MARTíNEZ-CARRASCO

C， et al. The typical cestodes of the red fox in eastern areas of the

Iberian Peninsula have a grouped distribution［J］. Veterinary

Parasitology， 2020， 283： 109168.

［9］ CITTERIO C V， OBBER F， TREVISIOL K， et al. Echinococcus

multilocularis and other cestodes in red foxes （Vulpes vulpes） of

northeast Italy， 2012-2018［J］. Parasites amp; Vectors， 2021， 14

（1）： 29.

［10］ HOFER S， GLOOR S， MüLLER U， et al. High prevalence of

Echinococcus multilocularis in urban red foxes （Vulpes vulpes）

and voles （Arvicola terrestris） in the city of Zürich， Switzerland

［J］. Parasitology， 2000， 120（Pt 2）： 135-142.

［11］ LI W， GUO Z H， DUO H， et al. Survey on helminths in the

small intestine of wild foxes in Qinghai， China［J］. The Journal

of Veterinary Medical Science， 2013， 75（10）： 1329-1333.

［12］ LUZóN M， DE LA FUENTE-LóPEZ C， MARTíNEZ-NEVADO

E， et al. Taenia crassiceps cysticercosis in a ring-tailed lemur

（Lemur catta）［J］. Journal of Zoo and Wildlife Medicine， 2010，

41（2）： 327-330.

［13］ SAMOREK-PIERóG M， KARAMON J， BRZANA A， et al. Molecular

confirmation of Taenia crassiceps cysticercosis in a captive

ring-tailed lemur （Lemur catta） in Poland［J］. Pathogens，

2022， 11（8）： 835.

［14］ ALI? A， HOD?I? A， ?KAPUR V， et al. Fatal pulmonary cysticercosis

caused by Cysticercus longicollis in a captive ring-tailed

lemur （Lemur catta）［J］. Veterinary Parasitology， 2017， 241：

1-4.

［15］ BRUNET J， BENOILID A， KREMER S， et al. First case of human

cerebral Taenia martis cysticercosis［J］. Journal of Clinical

Microbiology， 2015， 53（8）： 2756-2759.

［16］ CHERMETTE R， BUSSIéRAS J， MARIONNEAU J， et al. Invasive

cysticercosis due to Taenia crassiceps in an AIDS patient

［J］. Bulletin de l’Académie Nationale de Médecine， 1995， 179

（4）： 777-780； discussion 780-783.

［17］ HORTON J. Albendazole： a broad spectrum anthelminthic for

treatment of individuals and populations［J］. Current Opinion in

Infectious Diseases， 2002， 15（6）： 599-608.

［18］ CHAI J Y. Praziquantel treatment in trematode and cestode infections：

an update［J］. Infection amp; Chemotherapy， 2013， 45

（1）： 32-43.

［19］ LATEEF M， ZARGAR S A， KHAN A R， et al. Successful treatment

of niclosamide- and praziquantel-resistant beef tapeworm infection

with nitazoxanide［J］. International Journal of Infectious

Diseases， 2008， 12（1）： 80-82.

［20］ FEDERER K， ARMUA-FERNANDEZ M T， GORI F， et al. Detection

of taeniid （Taenia spp. ， Echinococcus spp.） eggs contaminating

vegetables and fruits sold in European markets and

the risk for metacestode infections in captive primates［J］. International

Journal for Parasitology Parasites and Wildlife， 2016， 5

（3）： 249-253.

［21］ DENK D， BOUFANA B， MASTERS N J， et al. Fatal echinococcosis

in three lemurs in the United Kingdom： a case series［J］.

Veterinary Parasitology， 2016， 218： 10-14.

［22］ KONDO H， WADA Y， BANDO G， et al. Alveolar hydatidosis

in a gorilla and a ring-tailed lemur in Japan［J］. The Journal of

Veterinary Medical Science， 1996， 58（5）： 447-449.

［23］ BRUNET J， PESSON B， CHERMETTE R， et al. First case of

peritoneal cysticercosis in a non-human primate host （Macaca

tonkeana） due to Taenia martis［J］. Parasites amp; Vectors， 2014，

7： 422.