摘 要 評(píng)估自制奧美拉唑腸溶膠囊（20 mg）與參比制劑（LOSEC，20 mg）在體內(nèi)的生物等效性。受試者均為健康成人，盲法隨機(jī)服用自制制劑或參比制劑的奧美拉唑腸溶膠囊。通過(guò)測(cè)定血漿中奧美拉唑的濃度，以藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為指標(biāo)比較兩種制劑的生物等效性，并評(píng)價(jià)兩制劑體內(nèi)安全性。結(jié)果顯示，在空腹及餐后條件下，自制制劑與參比制劑的奧美拉唑藥動(dòng)學(xué)參數(shù)幾何均數(shù)比值均落在生物等效性接受范圍內(nèi)，具有生物等效性，不良事件發(fā)生率相近，所有不良反應(yīng)均為輕度，安全性無(wú)顯著差異。

關(guān)鍵詞 奧美拉唑 腸溶膠囊 一致性評(píng)價(jià) 生物等效性

中圖分類號(hào)：R969.4； R975.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1006-1533（2024）15-0078-05

引用本文 茅關(guān)興， 趙麗敏， 李琦君， 等. 奧美拉唑腸溶膠囊人體生物等效性臨床研究[J]. 上海醫(yī)藥， 2024， 45（15）： 78-82.

基金項(xiàng)目：上海市戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)資金資助項(xiàng)目

Clinical studies on human bioequivalence of omeprazole enteric-coated capsules

MAO Guanxing1， ZHAO Limin2， LI Qijun3， XU Shiqiang4

（1. Shanghai Pharmaceutical Industry Co.， Ltd.， Shanghai 200002， China； 2. Shanghai Meiyou Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 201422， China； 3. Shenyang Dasan Pharmaceutical Technology Co.， Ltd.， Shenyang 110179， China； 4. School of Medicine， Wuhan University of Science and Technology， Wuhan 430065， China）

ABSTRACT To evaluate the bioequivalence of generic omeprazole enteric-coated capsules （20 mg） versus a reference formulation （LOSEC， 20 mg） in vivo. Healthy adult subjects were enrolled and randomly and blindly administered with either the generic formulation or the reference formulation of omeprazole enteric-coated capsules. By measuring the concentration of omeprazole in plasma， the bioequivalence of the two formulations was compared using pharmacokinetic parameters and their in vivo safety was evaluated. The results showed that under fasting and postprandial conditions， the geometric mean ratio of pharmacokinetic parameters of the two preparations fell within the acceptance range of bioequivalence， the adverse reactions associated with generic preparation were mild and similar to those of reference formulation， and there were no distinctive differences in safety between the two preparations.

KEY WORDS omeprazole； enteric-coated capsules； consistency evaluation； bioequivalence

奧美拉唑（omeprazole）是瑞典Astra公司研發(fā)的質(zhì)子泵抑制劑（PPI），主要用于治療消化性潰瘍及與胃酸有關(guān)的消化系統(tǒng)功能紊亂性疾病[1-2]。由于奧美拉唑在酸性溶液中易分解，為增加藥物的穩(wěn)定性，防止其被胃酸破壞，參比制劑采用腸溶包衣保證奧美拉唑的穩(wěn)定性和生物利用度。腸溶制劑是一種在體內(nèi)釋放行為較為復(fù)雜的藥物劑型，其研發(fā)過(guò)程在仿制藥領(lǐng)域中具有較高的難度。腸溶制劑的釋放行為受到多種因素的影響，如制劑的組成、結(jié)構(gòu)、制備工藝以及體內(nèi)環(huán)境等，尤其在餐后生物等效性試驗(yàn)中，由于進(jìn)食后生理?xiàng)l件發(fā)生顯著變化，腸溶制劑的釋藥行為及藥代動(dòng)力學(xué)特征會(huì)出現(xiàn)較大的變異，自制制劑存在生物不等效的風(fēng)險(xiǎn)[3]。本研究遵循國(guó)家一致性評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)與要求，開發(fā)和生產(chǎn)了自制奧美拉唑腸溶膠囊。為確保制劑的質(zhì)量與療效，我們對(duì)工藝驗(yàn)證批次的自制產(chǎn)品與參比制劑進(jìn)行了人體生物等效性試驗(yàn)，以便全面驗(yàn)證自制制劑在臨床應(yīng)用中的療效，確保其與參比制劑達(dá)到生物等效。

1 材料和方法

1.1 藥品

奧美拉唑腸溶膠囊受試制劑（T）（規(guī)格20 mg/粒，上海美優(yōu)制藥有限公司）；參比制劑（R）LOSEC（規(guī)格20 mg/粒，Astra Zeneca UK Limited）。

1.2 儀器

UPLC I-class 液相色譜儀、Xevo TQ-S 質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters公司）；Hypersil GOLD C18 選擇性 HPLC 色譜柱和預(yù)分析柱（2.1 mm×50 mm，1.7 mm）（美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司）；Phoenix WinNonlin 7.0數(shù)據(jù)處理軟件（美國(guó)Pharsight公司）；XPE105電子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；ST16、ST16R離心機(jī)，ULTS1368醫(yī)用低溫保存箱（美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司）。

1.3 方法

1.3.1 臨床試驗(yàn)方案

根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在一項(xiàng)奧美拉唑腸溶膠囊空腹生物等效性研究中，奧美拉唑Cmax個(gè)體內(nèi)變異系數(shù)（CV%）為26.80%[4]。

參考《藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》（2015年版），考慮到脫落率、制劑間的差異以及拉唑類藥物代謝存在基因多態(tài)性，故最終確定空腹生物等效性試驗(yàn)采用兩周期、雙交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，納入36例受試者。

由于奧美拉唑腸溶膠囊的崩解與釋放受食物與生產(chǎn)工藝的影響較大，故餐后生物等效性試驗(yàn)采用三周期、部分重復(fù)交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，納入48例受試者。

本研究嚴(yán)格遵循“藥物臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范（GCP）”，并且已得到武漢市第四醫(yī)院倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)（臨床試驗(yàn)登記號(hào)：CTR20201363）。所有受試者均通過(guò)體格檢查，并自愿簽署知情同意書。

1.3.2 給藥方法與血樣采集時(shí)間點(diǎn)設(shè)計(jì)

1）空腹組 受試者需在前一晚晚餐后禁食超過(guò)10 h。次日早8：00餐前口服受試或參比制劑（20 mg/人），用240 mL溫水送服。服藥前后1 h禁水，服藥后4 h禁食。采血時(shí)間點(diǎn)包括服藥前1 h至服藥后24 h共24個(gè)時(shí)間點(diǎn)。

2）餐后組 受試者同樣需在前一晚晚餐后禁食超過(guò)10 h。次日早餐后30 min口服受試或參比制劑，服藥前后1 h禁水（除早餐及服藥用水），服藥后4 h禁食。采血時(shí)間點(diǎn)包括早餐前至服藥后24 h共24個(gè)時(shí)間點(diǎn)。給藥方案見表1。

1.3.3 血漿樣本處理

采集的血液樣品置于EDTA-K2抗凝的真空采血管中并輕輕顛倒6次與抗凝劑混勻，室溫暫存；離心（4 ℃、1 700 g、10 min），待升溫至室溫后取約700 mL上層血漿于檢測(cè)管中，剩余上層血漿置于備份管中。樣本從采集到分離血漿后置于？20 ℃冰箱暫存，并于24 h內(nèi)轉(zhuǎn)移至？80 ℃冰箱保存。生物樣本的預(yù)處理及保存均在避光條件下進(jìn)行。

1.3.4 藥物濃度檢測(cè)

采用經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/ MS）測(cè)定受試者服藥后血漿中奧美拉唑的血藥濃度。采用梯度洗脫程序，流速0.8 mL/min，流動(dòng)相A（0.1%甲酸水溶液）與B（0.1%甲酸乙腈溶液）的初始比例為99∶1，該流動(dòng)相比例在20 min的分析時(shí)間內(nèi)會(huì)呈線性梯度轉(zhuǎn)變至A-B=1∶99[5-7]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用Phoenix WinNonlin軟件以非房室模型計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。對(duì)于濃度低于定量下限的樣品，在進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)分析時(shí)，在達(dá)到Cmax以前取樣的樣品應(yīng)以“0”計(jì)算，在達(dá)到Cmax以后取樣的樣品應(yīng)以“ND”計(jì)算。按照給藥分組，采用樣本量、算術(shù)平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)、中位數(shù)值、四分位數(shù)、最小值、最大值以及幾何平均值匯總顯示主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)分析結(jié)果。藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)數(shù)據(jù)來(lái)源于臨床試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析報(bào)告。

對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、AUC0～t、AUC0～∞進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯著性水平為0.05。AUC和Cmax需進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行隨機(jī)效應(yīng)模型的方差分析。隨機(jī)效應(yīng)模型的方差分析將總變異分解為順序變異、周期變異、處理變異（受試制劑與參比制劑所引起的變異）、個(gè)體間的變異和個(gè)體內(nèi)的變異（殘差）。

采用mixed linear model置信區(qū)間法進(jìn)行生物等效性評(píng)價(jià)。受試制劑的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、AUC0～t、AUC0～∞的90%置信區(qū)間為參比制劑相應(yīng)參數(shù)的80.00%～125.00%范圍內(nèi)，可判定兩制劑具有生物等效性。

2 結(jié)果

2.1 血藥濃度檢測(cè)

血漿中奧美拉唑分析測(cè)定方法的回歸方程為y= 0.016 5x+0.005 69（R2=0.998 0），線性范圍為1.500～1 500 ng/mL，定量下限（LLOQ）為1.500 ng/mL，質(zhì)控樣品數(shù)至少為未知樣品數(shù)的5%，全部質(zhì)控樣品的合格率均符合要求。

QC樣品濃度分別為4.500、45.00、450.0、1 125 ng/mL 4個(gè)濃度水平奧美拉唑每一濃度水平QC樣品的精密度（CV%）均不大于9.51%，準(zhǔn)確度偏差范圍為？0.33%～0.52%。

2.2 空腹給藥試驗(yàn)藥代動(dòng)力學(xué)

35例受試者完成兩周期服藥及采血（單劑量20 mg），主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)比結(jié)果見表2，藥時(shí)曲線結(jié)果見圖1。結(jié)果表明，空腹口服受試制劑及參比制劑后，兩者的Cmax、AUC0～t、AUC0～∞的幾何均值比值（T/R）的90%置信區(qū)間均在80.00%～125.00%范圍內(nèi)，符合生物等效性接受標(biāo)準(zhǔn)，具有生物等效性。

2.3 空腹給藥試驗(yàn)安全性

發(fā)生的不良反應(yīng)的例數(shù)為7例，發(fā)生率為19.4%（7/36），T藥例數(shù)5例、發(fā)生率為14.3%（5/35），R藥例數(shù)3例、發(fā)生率為8.3%（3/36）（同一受試者可能發(fā)生不同類別的不良反應(yīng)以及對(duì)不同的藥物發(fā)生不同的不良反應(yīng)）。不良反應(yīng)系統(tǒng)分析見表3。

2.4 餐后給藥試驗(yàn)藥代動(dòng)力學(xué)

48例受試者完成三周期服藥及采血餐后給藥試驗(yàn)，主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)比結(jié)果見表4，藥時(shí)曲線結(jié)果見圖2。

結(jié)果表明，奧美拉唑腸溶膠囊的藥代參數(shù)Cmax的參比制劑SWR為0.405，SWR≥0.294，則采用RSAB進(jìn)行評(píng)價(jià)，Cmax的幾何均數(shù)比值（受試制劑/參比制劑）的點(diǎn)估計(jì)值及單側(cè)95%置信區(qū)間上限，等效界值點(diǎn)估計(jì)值為1.005 1不超過(guò)80.00%～125.00%，單側(cè)95%置信區(qū)間上限？0.0927≤0，符合生物等效標(biāo)準(zhǔn)；AUC0～t、AUC0～∞的參比制劑SWR均為SWR<0.294，則采用平均生物等效性的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)，受試制劑與參比制劑的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUC0～t、AUC0～∞幾何均值比值的90%置信區(qū)間分別為93.21%～106.81%和92.39%～105.09%，均在80.00%～125.00%范圍內(nèi)，符合生物等效性的接受標(biāo)準(zhǔn)，即受試制劑和參比制劑在餐后給藥條件下具有生物等效性。

2.5 餐后給藥試驗(yàn)安全性

發(fā)生的不良反應(yīng)的例數(shù)為10例，發(fā)生率為20.8%（10/48），R藥例數(shù)7例、發(fā)生率為14.6%（7/48），T藥例數(shù)6例、發(fā)生率為12.5%（6/48）（同一受試者可能發(fā)生不同類別的不良反應(yīng)及對(duì)不同的藥物發(fā)生不良反應(yīng)）。不良反應(yīng)系統(tǒng)分析見表5。

3 討論

根據(jù)2016年原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《以藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為終點(diǎn)評(píng)價(jià)指標(biāo)的化學(xué)藥物仿制藥人體生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》以及美國(guó)食品藥品管理局頒布的《奧美拉唑腸溶膠囊生物等效性指導(dǎo)原則》進(jìn)行了臨床研究，對(duì)受試制劑和參比制劑的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，包括Cmax、AUC0～t、AUC0～∞進(jìn)行了對(duì)比分析，結(jié)果顯示兩者幾何均值比的90%置信區(qū)間均符合生物等效性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，生物等效性結(jié)果具有高度的可靠性。對(duì)比文獻(xiàn)的臨床試驗(yàn)結(jié)果，充分體現(xiàn)了不同工藝方法制備的奧美拉唑腸溶膠囊在體內(nèi)吸收行為具有顯著差異，驗(yàn)證了奧美拉唑體內(nèi)吸收的高變異性。此外，受試制劑與參比制劑在不良事件發(fā)生率上相近，且所有不良反應(yīng)均為輕度，安全性無(wú)顯著差異。本研究納入受試者均為18～65歲的健康人群，未涉及老年、低齡和特殊人群的樣本研究，研究結(jié)果的普遍性可能受到一定限制，仿制藥品上市后仍需關(guān)注真實(shí)世界數(shù)據(jù)及藥物警戒信息。

本研究所用的兩種制劑在空腹和餐后兩種條件下均展現(xiàn)出良好的生物等效性和安全性，故在臨床應(yīng)用中可相互替代。

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