古DNA分子作為遺傳信息的載體,是開展分子考古學研究的重要介質(zhì)。分子考古學家能根據(jù)遺骸的古DNA分子,找到其所屬族群,將遺骸“對號入座”。例如,山羊和綿羊的遺骸,其骨骼外形相似,用肉眼無法區(qū)分。分子考古學家通過提取遺骸中的古DNA分子,并與生物基因庫中的山羊、綿羊族進行比對,就能判斷出遺骸的真實身份。
傳統(tǒng)的考古發(fā)掘工作大都在鄉(xiāng)間田野進行,因此又被稱為“田野考古”。而分子考古學家開展的古DNA分子提取實驗需要在室內(nèi)進行,并且要嚴格控污,對實驗環(huán)境要求極高。
進入實驗室之前,實驗員會從遺址運輸來的骨骼材料中選取保存良好的部分,切割出2×2厘米左右大小的樣品,進行編號、記錄,以備提取實驗。
實驗員進入實驗室后,需按照實驗室工作規(guī)程穿戴工作服、佩戴口罩、使用專用橡膠手套,以避免人體DNA分子混入樣品。
同時,為避免實驗過程中發(fā)生交叉污染,總實驗會分為5階段小實驗,在不同的實驗室依次進行。
如果說采樣、編號是為了評估、篩選優(yōu)質(zhì)樣品,前處理實驗則是對所選樣品進行清洗和研磨處理。
在實驗中,實驗員會將樣品用酸泡、清洗,之后用液氮研磨機將其研磨成骨粉,盛裝進干凈的離心管,放入冰箱冷凍封存,從而保證古DNA分子的完整性,防止其降解和被污染。
實驗員在裝入骨粉的離心管中,加入可將古DNA分子從骨骼細胞中分離出來的裂解液(通常包含鹽離子、離液劑、還原劑和蛋白酶抑制劑等成分),從而破壞骨粉細胞表面的脂質(zhì)結(jié)構(gòu),使古DNA分子被釋放、進而懸浮在溶液中。
為更高效地提取古DNA分子,過夜后的離心管會被放入離心機離心,離心后的骨粉漸漸沉淀于管底。實驗員為有效回收古DNA分子片段,會將含有古DNA分子的上層清液提取至新試管中。
與現(xiàn)代DNA分子不同,受埋藏環(huán)境的影響,古DNA分子會出現(xiàn)不同程度的降解,即雙螺旋結(jié)構(gòu)遭到破壞。
因此,提取出的古DNA分子需加入特定劑量的引物、酶和混合劑,混勻后放入PCR儀中進行擴增,修復(fù)它的雙螺旋結(jié)構(gòu)。
電泳是一種利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術(shù)。在純化階段,實驗員會借助電泳實驗結(jié)果,判斷古DNA分子是否提取成功。
提取成功后,會對樣品進行專業(yè)的堿基序列檢測。
在這樣一系列的實驗操作后,就可以獲得一條完整的古DNA分子信息了。實驗員對檢測結(jié)果進行分析,就能回答部分考古學問題,如可通過檢測結(jié)果判斷該生物的所屬族群。
考古學的目標是盡可能地復(fù)原古人類的社會生活環(huán)境,而考古遺址中的遺跡、遺物都是古人類生活更迭的記錄者,因此,遺跡、遺物研究是探尋當時人類生活環(huán)境、社會發(fā)展狀況不可或缺的線索。
古DNA分子研究以骨骼遺存為依托,在解決人類起源和遷徙、動植物的家養(yǎng)與馴化過程等重大考古學問題上扮演著重要角色,讓我們從遺傳信息中看到種族基因的歸屬與演變。
但是,古DNA分子具有含量極低、高度降解和廣泛損傷的特點,它是否能被提取,以及提取出的結(jié)果,都嚴重依賴樣品的保存情況。實驗過程中,古DNA分子的提取過程易被污染,且人類或動物的起源與擴散問題也十分復(fù)雜,這些都為古DNA分子的研究帶來很大的難度。
不過,隨著科技水平不斷提升、設(shè)備更新、實驗環(huán)境升級以及歷代分子考古學家的不斷努力,古DNA分子研究技術(shù)已顯著提高,為解決更多考古學中的困難提供了堅實支持。
雖然遺骸不會說話,但攜帶遺傳物質(zhì)的古DNA分子記錄著它們的故事。在科技與學術(shù)發(fā)展齊頭并進的當下,只要遺骸尚在,分子考古學家就能夠找到它們的古DNA分子信息,幫助更多遺骸再見天日、重歸故里。
(責任編輯 / 王佳璇 美術(shù)編輯 / 徐博宇)