摘要：【目的】觀察含笑花（Michelia figo）雄蕊形態(tài)建成過程，探究其雄蕊發(fā)生和發(fā)育的基本特征，為木蘭科植物繁育與進(jìn)化生物學(xué)的研究積累基礎(chǔ)資料?！痉椒ā坷脪呙桦婄R、顯微成像及石蠟切片技術(shù)，對(duì)不同生長階段含笑花花芽中的雄蕊進(jìn)行解剖觀察?！窘Y(jié)果】含笑花雄蕊原基的發(fā)生方式為螺旋狀排列、向心方式發(fā)生。隨著雄蕊形態(tài)建成的完成，其表觀形態(tài)特征發(fā)生系列變化，最終形成較長的花藥與較短的花絲。花藥組織包括花藥隔和4個(gè)花藥室。花藥室內(nèi)造孢組織分化形成的小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂不同步，最終形成左右對(duì)稱型和正四面體型小孢子四分體，之后游離的小孢子發(fā)育成二細(xì)胞型花粉和少量的三細(xì)胞型花粉?；ㄋ幈谟?層表皮細(xì)胞、1層藥室內(nèi)壁細(xì)胞、2～3層中層細(xì)胞及1層分泌絨氈層細(xì)胞組成。成熟花粉發(fā)育時(shí)期絨氈層解體消失，但部分中層細(xì)胞宿存，直至花藥壁開裂時(shí)才完全解體消失?；ńz外有1層表皮細(xì)胞包裹，內(nèi)部由薄壁組織填充，中央貫穿著直達(dá)藥隔的維管束。發(fā)育早期的花絲薄壁組織內(nèi)具有氣腔的結(jié)構(gòu)，成熟期消失。【結(jié)論】含笑花雄蕊發(fā)生與發(fā)育的過程基本正常，雄蕊螺旋狀向心發(fā)生、小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂不同步、花絲氣腔結(jié)構(gòu)的時(shí)序變化、多數(shù)左右對(duì)稱型小孢子四分體及二細(xì)胞型花粉等基本特征，體現(xiàn)了木蘭科植物的原始性。

關(guān)鍵詞：含笑花；雄蕊發(fā)生；花絲；花藥；小孢子四分體

中圖分類號(hào)：S718; Q944.33"""" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

文章編號(hào)：1000-2006（2024）06-0034-07

The basic characteristics of stamen morphogenesis and" development in Michelia figo

LIU Sitong1， NIE Tangjie1，WU Qingxian1， JIN Leni1， WAN Xiaoxia2， YIN Zengfang1

（1.Co-Innovation Center for Sustainable Forestry in Southern China， College of Life Science， Nanjing Forestry University， Nanjing 210037， China；2. Cryo-electron Microscope Center， Zhejiang University， Hangzhou 310058， China）

Abstract： 【Objective】The fundamental characteristics of stamen morphogenesis and development were described according to the observation of stamen morphogenesis in Michelia figo. The findings provide valuable basic data for future investigations in plant breeding and evolutionary biology within the Magnoliaceae family. 【Method】Using the" scanning electron microscopy and paraffin section technology， the stamens of flower buds in M. figo at different growth stages were observed. 【Result】The formation pattern of stamen primordium in M. figo was found to be helical and centripetal. Upon the completion of stamen morphogenesis， distinct morphological changes were observed， leading to the formation of a longer anther and a shorter filament. The anther tissue consists of anther septa and four anther locules. Normally， the sporogenous tissue differentiates gradually into microspore mother cells in the anther locule. The microspore mother cell meiosis was not synchronized， and eventually the isobilateral and tertrahedroid microspore tetrads were formed. Then， the free microspore developed into two-celled pollen and a few three-celled pollen. The structure of the anther wall was composed of one layer of epidermis cells， one layer of endothecium cells， two to three layers of middle layer cells， and one layer of secretory tapetum cells. During the development of mature pollen， the tapetum cells disintegrated and disappeared， but some middle layer cells persisted until the anther wall underwent dehiscence. The filaments were surrounded by a single layer of epidermis cells on the outer surface. Internally， the filaments were composed of parenchyma tissue， and a vascular bundle ran through the center toward the connective tissue. There was the cavity structure in the parenchyma of the filaments during the earlier development stage， which later disappeared during the mature stage of the stamen.【Conclusion】The process of stamen morphorgenesis in M. figo is normal compared with other Michelia plant species. The fundamental characteristics observed， including the helical centripetal formation of stamens， asynchronous meiotic division of microspore mother cells， temporal changes of the cavity structure in filaments， predominance of isobilateral tetrads， and two-celled pollen reflected the inherent nature of the Magnoliaceae family.

Keywords：Michelia figo; stamen morphorgenesis; filament; anther; microspore tetrad

雄蕊是被子植物進(jìn)行有性生殖的重要繁殖器官，包括花藥和花絲兩部分，花藥是產(chǎn)生花粉及雄配子體發(fā)育的場所，而花絲則為花藥發(fā)育提供所需營養(yǎng)物質(zhì)[1]。因此，雄蕊結(jié)構(gòu)與功能的正常行使對(duì)被子植物的繁殖至關(guān)重要，在雄蕊發(fā)育過程中任一環(huán)節(jié)發(fā)生異常都將對(duì)植物生殖的有效性產(chǎn)生顯著影響，進(jìn)而導(dǎo)致其自我更新過程受阻等問題，所以探究雄蕊發(fā)育的過程對(duì)研究植物繁殖、控制作物育種及雜交種子生產(chǎn)具有重要意義[2-3]。目前，已有眾多學(xué)者對(duì)雄蕊的發(fā)育及近緣種間生殖發(fā)育的異同進(jìn)行了探究。如Zhang等[4]為研究防己科（Menispermaceae）植物不同類型雄蕊的發(fā)育情況，詳細(xì)觀察了該科植物雄蕊發(fā)育過程；Ning等[5]觀察了獨(dú)葉草（Kingdonia uniflora）可育雄蕊和退化雄蕊的分化過程及退化雄蕊蜜腺的結(jié)構(gòu)，對(duì)單花雄蕊數(shù)量和個(gè)體發(fā)育變化進(jìn)行了分析。作為最古老被子植物類群之一的木蘭科（Magnoliaceae）植物，其雄性生殖器官的發(fā)育也受到了廣泛的重視。關(guān)于木蘭屬（Magnolia）[6]、玉蘭屬（Yulania）[7-8]、木蓮屬（Manglietia）[9]和含笑屬（Michelia）[10]等植物已積累了較多有關(guān)小孢子發(fā)生及雄配子體發(fā)育的胚胎學(xué)資料，總體上木蘭科各屬植物花藥的發(fā)育過程普遍表現(xiàn)出了較為原始的特征，但在紫玉蘭（Yulania liliiflora）和二喬玉蘭（Y. × soulangeana）中發(fā)現(xiàn)了較為進(jìn)化的胞質(zhì)分裂方式[11-12]。因此，木蘭科植物雄性生殖器官發(fā)育的基本特性研究是一個(gè)值得關(guān)注的科學(xué)命題。

含笑花（Michelia figo）原產(chǎn)中國，為木蘭科含笑屬常綠灌木，花期較長且具有濃郁的花香，常作為觀賞植物用于景觀營造或園林綠化[13]；其花瓣具有祛淤生新、活血止痛的功效，是重要的藥用植物資源，亦可被制成花茶或香料[14]。因此，含笑花是極具發(fā)展?jié)摿Φ膬?yōu)良觀賞和香料樹種，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前，國內(nèi)外對(duì)含笑花的研究主要集中在化學(xué)成分[15]、藥用作用[16]、抗寒性[17]、繁殖技術(shù)[18]、生理學(xué)[19]、孢粉學(xué)[20]及基因組學(xué)[21]等方面，其有性生殖方面的研究鮮有詳細(xì)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膱?bào)道，而厘清含笑花的生殖發(fā)育特征是未來開展育種工作的前提和基礎(chǔ)。本研究利用形態(tài)解剖學(xué)的方法對(duì)含笑花雄蕊的發(fā)生及發(fā)育過程進(jìn)行觀察，旨在揭示其形態(tài)建成與發(fā)育的一般規(guī)律，為利用含笑花為父本開展分子精準(zhǔn)設(shè)計(jì)雜交育種及種質(zhì)資源創(chuàng)新積累基礎(chǔ)數(shù)據(jù)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及觀察方法

以栽培于南京林業(yè)大學(xué)校園（118°48′40″E，32°4′44″N）內(nèi)、長勢(shì)良好的3 株9年生含笑花為試驗(yàn)材料，采用常規(guī)方法栽培管理。

2021年5月中旬至翌年4月中下旬，每隔15 d觀察含笑花腋芽形態(tài)特征。每次隨機(jī)選取3 枚腋芽，用游標(biāo)卡尺測(cè)量其長度、寬度，在體視顯微鏡（日本，Nikon SMZ18）下進(jìn)行解剖并拍照。隨后常規(guī)石蠟制樣、切片機(jī)（德國，Leica RM 2255）切片，切片厚度為8 μm，經(jīng)番紅-固綠對(duì)染，中性樹膠封片后，置于顯微鏡（日本，Nikon 50i）下觀察拍照。

2021年5月下旬至6月中旬，每隔5 d采集腋芽，用于掃描電鏡制樣。樣品經(jīng)體積分?jǐn)?shù)70% FAA固定、乙醇系列脫水、乙酸異戊酯置換，在臨界點(diǎn)干燥儀（英國，EMITECH K850）內(nèi)干燥樣品24 h，離子濺射儀（日本，日立 E1010）中噴金120 s，OXFORD Inca X-act（美國，F(xiàn)EI）能譜儀掃描雄蕊發(fā)生過程的微觀形態(tài)學(xué)特征變化并拍照記錄。

1.2 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用Excel 2021、Photoshop CC 2020完成數(shù)據(jù)處理和圖表制作。

2 結(jié)果與分析

2.1 含笑花雄蕊發(fā)育過程形態(tài)特征的變化

5月下旬含笑花完成成花轉(zhuǎn)變，隨后花芽發(fā)育；6月初，腋生花芽肉眼依稀可辨?；ㄑ堪l(fā)育過程見表1。體視顯微鏡下解剖觀察發(fā)現(xiàn)，在花被片原基內(nèi)側(cè)雄蕊原基開始分化（圖1）。圖1a顯示在圓錐形的生殖頂端基部出現(xiàn)半球形狀突起，第2枚雄蕊原基與第1枚交互排列，并呈螺旋狀向頂發(fā)生（圖1b）。掃描電鏡下花托上雄蕊原基依序發(fā)生

（圖1c），在發(fā)生后快速生長，并逐漸形成扁條形（圖1d）。6月中旬雄蕊形態(tài)建成漸次完成，但表觀上雄蕊花藥和花絲未明顯分化（圖1e），此時(shí)雌蕊原基開始發(fā)生（圖1d、1e）。7月上旬，在雌蕊原基發(fā)育形成條形葉片形態(tài)時(shí)，雄蕊初步分化成花藥和花絲的結(jié)構(gòu)（圖1f）。8—11月，含笑花花芽生長緩慢，圖1g顯示的是11月下旬去除花被片后花芽的形態(tài)，可見雄蕊可以區(qū)分為花藥和花絲兩個(gè)部分。隨后雄蕊伸長生長速度較快，圖1h顯示雌蕊被雄蕊包裹。12月下旬至翌年2月上旬，雄蕊形態(tài)分化更加明顯，表觀上有紫紅色色素沉積（圖1 i、1j）。2月初至3月初是雌蕊的快速分化期，此時(shí)可以觀察到心皮逐漸發(fā)育成熟并突出雄蕊之上，雄蕊紫色色素逐漸消失，僅花藥先端呈紫色，表觀略帶紫色條紋，花絲伸展明顯，呈紫紅色（圖1j、1k、1l）。4月上旬，含笑花進(jìn)入花期，開放的花內(nèi)雄蕊花藥縱裂，呈散粉狀態(tài)（圖1n、1o）。

2.2 含笑花雄蕊發(fā)育過程結(jié)構(gòu)特征的變化

2.2.1 花藥壁的發(fā)育

依據(jù)Davis[22]的分類標(biāo)準(zhǔn)，含笑花的花藥壁發(fā)育類型為基本型，發(fā)育動(dòng)態(tài)過程如表1所示。發(fā)育初期的花藥原基，由一團(tuán)細(xì)胞壁薄、細(xì)胞質(zhì)濃厚的細(xì)胞組成（圖2a）。圖2b顯示的是單個(gè)花藥原基的橫切面，表面的一層細(xì)胞為花藥原基的表皮原，其內(nèi)部孢原細(xì)胞已經(jīng)形成。圖2c為花藥原基角隅處的半圓形突起部分，內(nèi)部已形成造孢組織，周緣細(xì)胞也初步完成分裂。隨后由周緣細(xì)胞分裂產(chǎn)生的細(xì)胞規(guī)律排列在表皮原細(xì)胞內(nèi)側(cè)，構(gòu)成花藥壁層，此時(shí)的花藥壁層包括1層表皮細(xì)胞、1層藥室內(nèi)壁細(xì)胞、2～3層中層細(xì)胞，絨氈層細(xì)胞尚未分化形成（圖2d）。在造孢組織向小孢子母細(xì)胞轉(zhuǎn)化期，絨氈層細(xì)胞開始分化，成熟的絨氈層細(xì)胞較大、細(xì)胞質(zhì)濃厚、內(nèi)含多個(gè)核（圖2e—2g）。圖2h顯示小孢子二分體、四分體時(shí)期的花藥壁層細(xì)胞，表現(xiàn)為中層細(xì)胞未完全消失，局部區(qū)域仍保留1～2層中層細(xì)胞。隨著小孢子的發(fā)育，花藥壁層細(xì)胞形態(tài)變化明顯，橫切面觀察初期表皮細(xì)胞呈扁平方形（圖2n），隨后表皮細(xì)胞逐漸液泡化（圖2o）；藥室內(nèi)壁細(xì)胞徑向伸長，呈排列整齊的扁長方形，并形成“U”形木栓質(zhì)增厚壁，但在兩個(gè)花粉囊的連接處，藥室內(nèi)壁細(xì)胞未發(fā)生細(xì)胞壁的次生增厚，為唇細(xì)胞區(qū)。同時(shí)，絨氈層表現(xiàn)出分泌絨氈層的典型特征，如細(xì)胞逐漸空泡化（圖2p），圖2q顯示絨氈層最終完全解體消失，但此時(shí)尚有未解體的中層細(xì)胞殘跡位于藥室內(nèi)壁內(nèi)側(cè)。在成熟花粉時(shí)期，伴隨唇細(xì)胞的解體，中層和絨氈層細(xì)胞完全解體消失，花藥壁呈開裂狀態(tài)（圖2r）。

2.2.2 小孢子發(fā)生及雄配子體發(fā)育

含笑花花藥內(nèi)造孢組織時(shí)期持續(xù)時(shí)間較長，從花藥原基開始分化的6月初直至11月下旬（表1）。在此期間，初生造孢細(xì)胞不斷進(jìn)行有絲分裂，形成次生造孢細(xì)胞（圖2c—2f）。隨后次生造孢細(xì)胞逐漸形成胼胝質(zhì)的壁，分化形成小孢子母細(xì)胞（圖2g）。小孢子母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂，在同一花藥室內(nèi)可觀察到既有二分體又有四分體小孢子的發(fā)育不同步的現(xiàn)象（圖2h）。圖2i—2k顯示的是二分體小孢子（圖2i）與四分體小孢子，其中小孢子四分體具有兩種不同發(fā)育類型，包括四面體型（圖2j）和左右對(duì)稱型（圖2k）。此時(shí)，偶爾會(huì)觀察到同一個(gè)花藥兩個(gè)相鄰藥室也存在發(fā)育不同步的現(xiàn)象。一個(gè)藥室內(nèi)小孢子母細(xì)胞正在進(jìn)行減數(shù)分裂，另一個(gè)藥室還處于次生造孢組織狀態(tài)（圖2m）。翌年2月中下旬，小孢子四分體共同的胼胝質(zhì)壁降解消失，此時(shí)游離的小孢子細(xì)胞質(zhì)濃，細(xì)胞核位于中央，為小孢子單核居中期（圖2n）。隨后小孢子液泡化明顯，細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)被擠向細(xì)胞壁的一側(cè)，為小孢子單核靠邊期（圖2o）。3月中旬，單核小孢子進(jìn)行有絲分裂形成1個(gè)大的營養(yǎng)核和1個(gè)小的生殖核，發(fā)育為二細(xì)胞型花粉（圖2p），部分生殖核會(huì)繼續(xù)分裂形成兩個(gè)精細(xì)胞，發(fā)育形成三細(xì)胞型花粉（圖2l），因此，含笑花的同一藥室內(nèi)中同時(shí)存在二細(xì)胞型和三細(xì)胞型花粉（圖2q、2r）。

2.2.3 花絲的發(fā)育

7月上旬，雄蕊原基逐漸發(fā)育形成花藥和花絲（表1）。觀察橫切面發(fā)現(xiàn)，花絲由1層表皮細(xì)胞及內(nèi)部的薄壁組織組成，其中位于花絲中心部位的薄壁細(xì)胞體積較?。▓D3a），隨后逐漸發(fā)育形成維管組織，此時(shí)薄壁組織區(qū)域出現(xiàn)空泡狀結(jié)構(gòu)（圖3b）。在小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)期，薄壁組織內(nèi)空腔的數(shù)量達(dá)到最多（圖3c）；翌年1—2月，在小孢子四分體形成后，薄壁組織空腔數(shù)量逐漸減少，此時(shí)維管組織的細(xì)胞數(shù)量開始增加（圖3d）；3月下旬，二細(xì)胞型花粉逐漸發(fā)育成熟，可見花絲中央的維管束數(shù)量明顯增多（圖3e）；4月初，花藥縱向開裂，此時(shí)花絲的表皮細(xì)胞呈扁平的長方體狀，內(nèi)部的薄壁細(xì)胞體積增加，氣泡狀結(jié)構(gòu)消失殆盡（圖3f）。

3 討 論

3.1 含笑花雄蕊發(fā)育過程的原始特征

含笑花隸屬于被子植物中系統(tǒng)演化地位較原始的木蘭科，在其雄蕊形態(tài)建成過程中，部分特征表現(xiàn)出了一定的原始性?，F(xiàn)有的研究資料表明，木蘭科植物桂南木蓮（Manglietia conifera）[23]及觀光木（Tsoongiodendron odorum）[24]的雄蕊原基均在花被片原基內(nèi)側(cè)螺旋狀向頂發(fā)生，含笑花的雄蕊原基也呈現(xiàn)同樣的發(fā)生方式，與營養(yǎng)枝葉序形成模式一致。在廣東木蓮（Manglietia" kwangtungensis）、長葉木蘭（Magnolia paenetalauma）及煥鏞木（Woonyoungia septentrionalis）中，雄蕊的基部寬而短，沒有形態(tài)的分化，而紫花含笑（Michelia crassipes）的雄蕊則明顯分化為花藥和花絲[25]。本研究發(fā)現(xiàn)，含笑花雄蕊發(fā)生初期花藥與花絲表觀特征幾乎難以區(qū)分，在花藥形成造孢組織時(shí)，花藥與花絲分化形成。對(duì)花絲的組織學(xué)特征進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，其最明顯的變化是氣腔結(jié)構(gòu)在發(fā)育過程中從無到有的改變。萬小霞[26]認(rèn)為深山含笑（Michelia maudiae）花芽苞片中氣腔結(jié)構(gòu)的形成預(yù)示著抗寒能力的增加。與深山含笑花芽外的苞片組織結(jié)構(gòu)相似，含笑花花絲組織中氣腔結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)也表現(xiàn)出季節(jié)性的特征，說明花絲的組織結(jié)構(gòu)與苞片的葉性特征的變化相吻合。特別地，含笑花雄蕊發(fā)育過程中的原始性可能與其生態(tài)適應(yīng)性有關(guān)，這些氣腔結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)可能是其對(duì)環(huán)境適應(yīng)的需要[27]。

植物的原始特征在進(jìn)化過程中會(huì)被保留下來，并在后續(xù)的演化中發(fā)生了一些變化[28]。本研究發(fā)現(xiàn)含笑花的絨氈層為分泌型，僅具1層多核細(xì)胞，與對(duì)紅花玉蘭（Y. wufengensis）[7] 的研究結(jié)果一致。但香木蓮（Michelia aromatica）[29]及灰木蓮（Manglietia conifera）[9]絨氈層則具有多層細(xì)胞，這種絨氈層細(xì)胞結(jié)構(gòu)差異的原因可能與其進(jìn)化歷史有關(guān)。此外，含笑花的中層細(xì)胞至花粉完全成熟依然存在，在花藥壁開裂前才徹底消失，其長時(shí)間宿存的原因、對(duì)花粉發(fā)育的影響以及是否為進(jìn)化的特征還有待進(jìn)一步的探究?，F(xiàn)有的研究資料還證實(shí)，木蘭科植物小孢子四分體多為原始的左右對(duì)稱型[10，30]，而含笑屬的西疇含笑（Michelia coriacea）[31]小孢子四分體為四面體型，并將其視為一種進(jìn)化的類型。含笑花具有左右對(duì)稱型小孢子四分體，還可以觀察到四面體型小孢子四分體，但數(shù)量上明顯少于前一種類型。此外，研究資料還顯示深山含笑[10]、西疇含笑[31]、廣西含笑（M. guangxiensis）[32]的成熟花粉均為原始的二細(xì)胞型，而熬成齊[33]的研究則顯示含笑的花粉為三細(xì)胞型花粉。根據(jù)筆者的研究結(jié)果，在含笑花中二細(xì)胞型花粉和三細(xì)胞型花粉是同時(shí)存在的，且前者數(shù)量明顯多于后者。因此，筆者推測(cè)這種四分體類型的變化、二細(xì)胞型和三細(xì)胞型花粉的存在具備一定的系統(tǒng)演化意義，值得進(jìn)一步探討。

3.2 花粉發(fā)育不同步現(xiàn)象的生物學(xué)意義

在含笑花小孢子發(fā)生及雄配子體發(fā)育過程中，同一藥室內(nèi)花粉的發(fā)育在小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂前基本同步，但在減數(shù)分裂后出現(xiàn)了不同步的現(xiàn)象，即在同一花藥室內(nèi)，同時(shí)存在二分體及四分體，這一現(xiàn)象與對(duì)煥鏞木報(bào)道的結(jié)果[34]類似。Hu等[35]研究發(fā)現(xiàn)白玉蘭（Y. denudata）小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂前期Ⅰ之前，花藥室內(nèi)小孢子母細(xì)胞的分化是同步的，但隨后核分裂出現(xiàn)了明顯的不同步現(xiàn)象，小孢子母細(xì)胞胞質(zhì)分裂方式也是雙向性的，分析其作為基部被子植物類群，上述特征是其原始性的具體體現(xiàn)。至于不同花藥間或同一花藥的不同花藥室內(nèi)，存在小孢子的發(fā)育進(jìn)程相差1～2個(gè)時(shí)期的現(xiàn)象在含笑花花粉發(fā)育過程中更為常見，這與百合科（Liliaceae）植物類似[36]。此外，花粉發(fā)育的不同步現(xiàn)象可能與植物繁殖策略有關(guān)。含笑花是一種以異交為主且異交需要傳粉者的植物[37]，這種發(fā)育不同步能夠增加花朵的持續(xù)開放時(shí)間，從而提高異花授粉的機(jī)會(huì)；當(dāng)一部分花粉還未完全成熟時(shí)，已成熟的花粉就可以被傳遞給傳粉媒介，從而增加了花粉的傳播范圍和數(shù)量，以適應(yīng)傳粉媒介的活動(dòng)規(guī)律和環(huán)境變化。

參考文獻(xiàn)（reference）：

［1］LIU X L，TAN X Y．Mutation in Arabidopsis MOR1 gene impairs endocytosis in stamen filament cells and results in anther indehiscence[J]．Plant Growth Regul，2022，96（2）：303-314．DOI： 10.1007/s10725-021-00777-7.

［2］GMEZ J F，TALLE B，WILSON Z A．Anther and pollen development：a conserved developmental pathway[J]．J Integr Plant Biol，2015，57（11）：876-891．DOI： 10.1111/jipb.12425.

［3］MARCHANT D B，WALBOT V．Anther development： the long road to making pollen[J]．Plant Cell，2022，34（12）：4677-4695．DOI： 10.1093/plcell/koac287.

［4］ZHANG H Y，ZHANG X Y，NING K，et al．Stamen and pollen development in Menispermaceae with contrasting androecium structure[J]．Plant Syst Evol，2022，308（5）：36．DOI： 10.1007/s00606-022-01828-w.

［5］NING K，ZHU Q Q，ZHANG X H．How do fertile stamens and staminodes go differently in Kingdonia uniflora？Evidence from stamen numbers，ontogeny，and structure[J]．Flora，2023，303：152293．DOI： 10.1016/j.flora.2023.152293.

［6］張風(fēng)娟，徐興友，陳鳳敏，等．天女木蘭小孢子發(fā)生及雄配子體發(fā)育的觀察[J]．經(jīng)濟(jì)林研究，2008，26（4）：71-75．ZHANG F J，XU X Y，CHEN F M，et al．Observation of microsporogenesis and male gametophyte development in Magnolia sieboldii K[J]．Nonwood For Res，2008，26（4）：71-75．DOI： 10.3969/j.issn.1003-8981.2008.04.016.

［7］陳麗園，桑子陽，陳發(fā)菊，等．紅花玉蘭大小孢子發(fā)生及雌雄配子體發(fā)育的研究[J]．西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2016，44（9）：181-185．CHEN L Y，SANG Z Y，CHEN F J，et al．Sporogenesis and gametophytes development of Magnolia wufengensis[J]．J Northwest A F Univ （Nat Sci Ed），2016，44（9）：181-185．DOI： 10.13207/j.cnki.jnwafu.2016.09.024.

［8］王姍，沈永寶，鮑華鵬，等．寶華玉蘭大小孢子發(fā)生和雌雄配子體發(fā)育過程中解剖結(jié)構(gòu)的變化[J]．植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào)，2021，30（3）：46-53．WANG S，SHEN Y B，BAO H P，et al．Change of anatomical structure in the process of mega- and microsporogenesis and female and male gametophyte development of Yulania zenii[J]．J Plant Resour Environ，2021，30（3）：46-53．DOI： 10.3969/j.issn.1674-7895.2021.03.06.

［9］潘麗琴，郝建，徐建民，等．灰木蓮花藥結(jié)構(gòu)和花粉發(fā)育特征[J]．林業(yè)科學(xué)研究，2021，34（6）：107-113．PAN L Q，HAO J，XU J M，et al．Anther structure and pollen development characteristic of Manglietia conifera[J]．For Res，2021，34（6）：107-113．DOI： 10.13275/j.cnki.lykxyj.2021.06.013.

[10]熊海燕，劉志雄．深山含笑大、小孢子發(fā)生和雌、雄配子體發(fā)育研究[J]．植物研究，2018，38（2）：212-217．XIONG H Y，LIU Z X．Mega- and microsporogenesis and development of female and male gametophytes in Michelia maudiae Dunn[J]．Bull Bot Res，2018，38（2）：212-217．DOI： 10.7525/j.issn.1673-5102.2018.02.007.

[11]HAYASHI Y．On the microsporogenesis and pollen morphology in the family Magnoliaceae[J]．Sci Rep Tohoku Univ，1960，26：45-52.

[12]DINIS A，SANTO D， MESQUITA J. Ultrastructure of the mature pollen of Michelia figo （Lour.） Spreng. （Magnoliaceae）[J]. J. Submicrosc Cytol Pathol， 2000， 32（4）： 591-601.

[13]SRINROCH C，SAHAKITPICHAN P，CHIMNOI N，et al．Phenolic glycosides from Magnolia figo[J]．Phytochem Lett，2020，37：110-115．DOI： 10.1016/j.phytol.2019.09.008.

[14]張冬蓮，念波，汪志威，等．不同加工工藝對(duì)含笑花茶品質(zhì)的影響[J]．中國茶葉加工，2019（1）：31-36．ZHANG D L，NIAN B，WANG Z W，et al．Effect of different processing techniques on the quality of Michelia figo tea[J]．China Tea Process，2019（1）：31-36．DOI： 10.15905/j.cnki.33-1157/ts.2019.01.009.

[15]LIN C L，KAO C L，HUANG S T，et al．Chemical constituents of the flowers of Michelia figo[J]．Chem Nat Compd，2019，55（4）：781-782．DOI： 10.1007/s10600-019-02811-7.

[16]CHEN J，WANG M，HAN X，et al．First report of leaf blight caused by Colletotrichum karstii on banana shrub （Michelia figo） in Sichuan，China[J]．Plant Dis，2023，107（9）：2868．DOI： 10.1094/PDIS-04-23-0642-PDN.

[17]亓白巖，周冬琴，於朝廣，等．8種含笑屬植物的抗寒性研究[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（5）：258-263．QI B Y，ZHOU D Q，YU C G，et al．Study on cold resistance of 8 species of Michelia[J]．Jiangsu Agric Sci，2010，38（5）：258-263．DOI： 10.15889/j.issn.1002-1302.2010.05.131.

[18]樊光毅，胡烈棟．含笑花苗培育技術(shù)探討[J]．園藝與種苗，2018，38（12）：18-19．FAN G Y，HU L D. Discussion on the cultivation technology of Michelia figo （Lour.） Spreng seedlings[J]． Hortic Seed，2018，38（12）：18-19．DOI： 10.16530/j.cnki.cn21-1574/s.2018.12.007.

[19]TAKEUCHI S，SHINOZAKI K，MATSUSHIMA D，et al．Calibration of the heat ratio method by direct measurements of transpiration with the weighing root-ball method for Michelia figo[J]．Acta Hortic，2020（1300）：21-28．DOI： 10.17660/actahortic.2020.1300.4.

[20]周瑾，柏永清，曾妍，等．含笑花花粉萌發(fā)和花粉管生長的離體培養(yǎng)研究[J]．湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，61（19）：72-77． ZHOU J，BO Y Q， ZENG Y，et al．Study on pollen germination and pollen tube growth culture in vitro of Michelia figo[J]．Hubei Agric Sci，2022，61（19）：72-77．DOI： 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2022.19.014.

[21]ZHAI M．The complete chloroplast genome sequence of Michelia figo based on landscape design，and a comparative analysis with other Michelia species[J]．Mitochondrial DNA B Resour，2020，5（3）：2723-2724．DOI： 10.1080/23802359.2020.1788446.

[22]DAVIS G L. Systematic embryology of the angiosperms[M]. New York： John Wiley amp; Sons，1966.

[23]HAO J，PAN L Q，JIA H Y，et al．Floral structure and breeding systems of Manglietia conifera Dandy （Magnoliaceae）[J]．Forests，2019，10（9）：756．DOI： 10.3390/f10090756.

[24]付琳，曾慶文，徐鳳霞，等．觀光木的花器官發(fā)生[J]．熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2007，15（1）：30-34．FU L，ZENG Q W，XU F X， et al．Floral organogenesis of Tsoongiodendron odorum Chun[J]．J Trop Subtrop Bot，2007，15（1）：30-34．DOI： 10.3969/j.issn.1005-3395.2007.01.005.

[25]XU F X，CHEN D Q，SPECHT C．Comparative microsporogenesis and anther development of selected species from Magnoliaceae[J]．Nord J Bot，2013，31（3）：291-300．DOI： 10.1111/j.1756-1051.2012.01445.x.

[26]萬小霞. 三種木蘭科植物分枝成花過程及其溫度適應(yīng)性[D]. 南京：南京林業(yè)大學(xué)， 2021. WAN X X. Study on the process of branching and flowering in three Magnoliaceae species and their temperature adaptability[D]. Nanjing：Nanjing Forestry University， 2021.

[27]MAO P L，ZANG R Z，SHAO H B，et al．The ecological adaptability of four typical plants during the early successional stage of a tropical rainforest[J]．Plant Biosyst Int J Deal Aspects Plant Biol，2014， 148（2）：288-296．DOI： 10.1080/11263504.2013.770808.

[28]CRAWFORD D J，DOYLE J J，SOLTIS D E，et al．Contemporary and future studies in plant speciation，morphological/floral evolution and polyploidy：honouring the scientific contributions of Leslie D．Gottlieb to plant evolutionary biology[J]．Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci，2014，369（1648）：1-10．DOI： 10.1098/rstb.2013.0341.

[29]PAN Y Z， LIANG H X， GONG X. Studies on the reproductive biology and endangerment mechanism of the endangered plant Manglietia aromatica[J]. J Integr Plant Biol， 2003， 45（3）： 311.

[30]王利琳，胡江琴，龐基良，等. 凹葉厚樸大、小孢子發(fā)生和雌、雄配子體發(fā)育的研究[J].實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào)， 2005（6）： 490-500. WANG L L， HU J Q， PANG J L， et al. Studies on the megasporogenesis and microsporogenesis and the development of their female and male gametophyte in Magnolia biloba[J]. Chinese J" Exp" Biol， 2006， 38（6）： 490-500.

[31]趙興峰，孫衛(wèi)邦，楊華斌，等．極度瀕危植物西疇含笑的大小孢子發(fā)生及雌雄配子體發(fā)育[J]．云南植物研究，2008，30（5）：549-556．ZHAO X F，SUN W B，YANG H B，et al．Mega- and microsporogenesis and development of female and male gametophytes of Michelia coriacea（Magnoliaceae），a globally critical endangered plant in south-east Yunnan of China[J]．Acta Bot Yunnanica，2008，30（5）：549-556．DOI： 10.3969/j.issn.2095-0845.2008.05.008.

[32]付琳，徐鳳霞，曾慶文，等．廣西含笑的小孢子發(fā)生及雄配子體形成的研究[J]．廣西植物，2011，31（3）：312-317，311．FU L，XU F X，ZENG Q W，et al．Studies of microsporogenesis and male gametophyte formation of Michelia guangxiensis[J]．Guihaia，2011，31（3）：312-317，311．DOI： 10.3969/j.issn.1000-3142.2011.05.007.

[33]敖成齊．含笑小孢子的發(fā)生、雄配子體的發(fā)育及其系統(tǒng)學(xué)意義[J]．廣西植物，2007，27（6）：836-839．AO C Q．Microsporogenesis，development of male gametophyte in Michelia figo and their systematic significance[J]．Guihaia，2007，27（6）：836-839．DOI： 10.3969/j.issn.1000-3142.2007.06.006.

[34]FU L，XU F X，ZENG Q W．Embryology of the dioecious Woonyoungia septentrionalis （Magnoliaceae）[J]．Nord J Bot，2012，30（2）：215-225．DOI： 10.1111/j.1756-1051.2011.01151.x.

[35]HU M L，BAI M，YANG M，et al．Cell polarity，asynchronous nuclear divisions，and bidirectional cytokinesis in male meiosis in Magnolia denudata[J]．Protoplasma，2021，258（3）：621-632．DOI： 10.1007/s00709-020-01604-y.

[36]KARTAL C．Microsporogenesis，microgametogenesis and in vitro pollen germination in the endangered species Fritillaria stribrnyi（Liliaceae）[J]．Caryologia，2015，68（1）：36-43．DOI： 10.1080/00087114.2014.998947.

[37]劉晨妮.玉蘭與含笑雜交生物學(xué)基礎(chǔ)研究[D]. 南京：南京林業(yè)大學(xué)， 2018. LIU C N. The basic research of the hybrid biology of Magnolia and Michelia[D]. Nanjing：Nanjing Forestry University， 2018.

（責(zé)任編輯 鄭琰燚）