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綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)

2008-03-05 23:52:04鄭偉偉
中學(xué)生物學(xué) 2008年1期
關(guān)鍵詞:層析濾紙研磨

鄭偉偉

1實(shí)驗(yàn)時(shí)間安排

傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)都安排在上完新課后,這樣可以在已有理論知識(shí)上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,進(jìn)一步加深學(xué)生的印象并能提高學(xué)生的動(dòng)手操作能力。但是新課程強(qiáng)調(diào)學(xué)生能像科學(xué)家那樣探索,在實(shí)驗(yàn)中學(xué)習(xí)到知識(shí)。于是我將本實(shí)驗(yàn)安排在“能量之源——光與光合作用”的第一節(jié)課,在學(xué)生對(duì)色素了解一片空白的情況下探索色素的種類和含量,可以大大提高學(xué)生的興趣和探索欲望。

2實(shí)驗(yàn)材料的改進(jìn)

課本要求稱取5 g的綠葉,加入二氧化硅和碳酸鈣后加入10 mL的無水乙醇。由于該實(shí)驗(yàn)為定性實(shí)驗(yàn),并考慮到很多普通學(xué)校中沒有很多的電子天平或臺(tái)秤以及實(shí)驗(yàn)時(shí)間的緣故,所以改為:取2~3片菠菜的葉片,加入二氧化硅和碳酸鈣后加入5 mL的無水乙醇迅速研磨。如果有條件的學(xué)校還可以把菠菜先進(jìn)行烘干,因?yàn)椴げ酥械乃畬?duì)色素的分離有一定的影響。具體為:取0.5 g的干菠菜葉(或取少量的干菠菜葉),加入2.5 mL的無水乙醇或丙酮。

2.1畫濾液細(xì)線的改進(jìn)

課本上采取用毛細(xì)吸管吸取少量的濾液,沿鉛筆線均勻畫出一條細(xì)線,待濾液干后,再畫1~2次,要求濾線細(xì)線直且細(xì)。但是實(shí)驗(yàn)下來效果總是不好,濾液細(xì)線不直,量不均勻,所以分離后的色素帶也是呈“M”型。筆者做了一下嘗試:色素研磨后不必過濾,用蓋玻片取代毛細(xì)吸管,具體是:用蓋玻片一端蘸取少量的色素提取液,在空氣中停留片刻后,將樣品點(diǎn)在離濾紙條一端1.5 cm處,形成一條綠色橫條帶,待濾液干后,根據(jù)點(diǎn)樣效果,可重復(fù)操作1~3次,細(xì)線稍微寬點(diǎn),但要求直的。

2.2層析液的改進(jìn)

課本提供的層析液有石油醚、丙酮、苯按比例混合而成,也可用93號(hào)汽油取代,筆者曾經(jīng)用過93號(hào)汽油,但是分離的效果不是很明顯,過一會(huì)顏色消失,主要由于汽油擴(kuò)散速度太快。參考了《生物學(xué)通報(bào)》2007年第九期楊培俊、秦峰秀的《幾種層析液對(duì)濾紙圓盤分離葉綠體色素的影響》,用單種層析液分離色素,結(jié)果發(fā)現(xiàn)石油醚的分離效果明顯,但是對(duì)葉綠素a和葉綠素b分離效果不是很好,用四氯化碳分離發(fā)現(xiàn)橙黃色和黃色能分離,但是分離不太明顯,黃色的葉黃素很不明顯;把石油醚和四氯化碳以1:2或者石油醚與苯2:1混合之后的效果則非常的理想。

3實(shí)驗(yàn)裝置的改進(jìn)

課本中色素的提取放在研缽中進(jìn)行,為防止無水乙醇的揮發(fā)所以要迅速研磨,色素的分離采用紙層析法,把畫有濾線的濾紙條放在盛有層析液的試管或燒杯中,防止層析液的揮發(fā)和避免學(xué)生過多地吸入層析液中的揮發(fā)性物質(zhì),所以用棉塞塞緊試管或用培養(yǎng)皿蓋好小燒杯。但是空氣中還是彌漫著揮發(fā)性氣體,所以有條件的學(xué)??梢再徺I實(shí)驗(yàn)配套的研磨過濾器和點(diǎn)樣器(如北京川布蘭生物技術(shù)開發(fā)有限公司生產(chǎn)的過濾器和點(diǎn)樣器)。

4加入了探究實(shí)驗(yàn)圓形濾紙中色素的分離

新課程非常重視提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)探究能力。提高探究能力除了要有一定的基礎(chǔ)知識(shí)、基本的實(shí)驗(yàn)方法和技能外,還要求學(xué)生積極參與探究實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和研究性。學(xué)習(xí)活動(dòng),為此教師應(yīng)該為學(xué)生進(jìn)行探究實(shí)驗(yàn)指點(diǎn)迷津,包括改變實(shí)驗(yàn)探究點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)方法等。在該實(shí)驗(yàn)等待色素分離過程中鼓勵(lì)學(xué)生用圓形濾紙代替條形濾紙,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如何?會(huì)不會(huì)比條形濾紙的分離更明顯?很多學(xué)生提出用圓形濾紙代替條形濾紙的問題是如何讓層析液溶解色素從而分離,有學(xué)生說在濾紙中滴入色素后滴入少量的層析液,教師對(duì)學(xué)生進(jìn)行鼓勵(lì)和表揚(yáng)。最后在教師與學(xué)生的共同探討下,制定了用圓形濾紙分離色素的具體步驟:在圓形濾紙中央滴一滴研磨液,在滴研磨液處用牙簽穿一小孔,再在小孔中插入濾紙小棒作為濾紙與層析液中的橋梁,在表面皿中加入適量的層析液,最后把插有小棒的圓形濾紙蓋在表面上,觀察色素分離效果。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用圓形濾紙分離色素能形成4個(gè)同心圓,從外到里依次為橙黃色的胡蘿卜素、黃色的葉黃素、藍(lán)綠色的葉綠素a(最寬)、黃綠色的葉綠素b。

5加入探究實(shí)驗(yàn)色素的吸收光譜

某天陽光明媚,所以我突然來靈感想進(jìn)行色素的吸收光譜探究實(shí)驗(yàn),由我演示,學(xué)生參與討論,能夠很直觀地觀察到色素吸收的光譜。太陽光通過三棱鏡可以得到7種顏色的連續(xù)光譜,然后將學(xué)生的綠色研磨液收集起來過濾到一試管中,放在光和三棱鏡之間,結(jié)果發(fā)現(xiàn)光無法透過試管,墻壁上出現(xiàn)試管的黑影,咨詢了物理老師后,她建議進(jìn)行稀釋,具體是:將各小組試管中剩余的濾液收集到一起,取一個(gè)50 mL的小燒杯,量取10 mL濾液,加入5 mL無水乙醇稀釋,混均后,量取10mL加入一支大試管中,試管口加棉塞,放在光和三棱鏡之間。結(jié)果意外發(fā)現(xiàn)在紅光和藍(lán)紫光光譜中逐漸出現(xiàn)一些黑色區(qū)域,說明了色素主要吸收紅光和藍(lán)紫光。如果效果不明顯可以對(duì)溶液進(jìn)行不同程度的稀釋,或加強(qiáng)光照。

6對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過程性評(píng)價(jià)

教學(xué)評(píng)價(jià)是課程實(shí)施過程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié),它直接影響著課程實(shí)施的方向及質(zhì)量,影響著課程培養(yǎng)目標(biāo)的實(shí)現(xiàn),是實(shí)現(xiàn)課程變革的必要條件之一。傳統(tǒng)的評(píng)價(jià)重視終緒性評(píng)價(jià),由一次考試定終生。在新課程環(huán)境下,教學(xué)評(píng)價(jià)必須改變以單一的學(xué)習(xí)結(jié)果作為衡量教學(xué)好壞的惟一標(biāo)準(zhǔn),突出學(xué)習(xí)的過程和在過程中表現(xiàn)出來的情感、態(tài)度、意志、信念、學(xué)習(xí)方式和學(xué)習(xí)策略等方面的發(fā)展,從而帶來了評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、方法和主體諸方面的發(fā)展性科學(xué)評(píng)價(jià)。新課程強(qiáng)調(diào)形成性評(píng)價(jià)與終緒勝評(píng)價(jià)相結(jié)合,能夠給學(xué)生一個(gè)最公正的評(píng)價(jià)。

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