吳華芬
摘要以扶郎花花蕾為外植體,進(jìn)行植物組織培養(yǎng)研究。結(jié)果表明:在扶郎花增殖培養(yǎng)中,配方為MS+3.0mg/L BA+0.2mg/L NAA對(duì)扶郎花快速繁殖效果最好,而生根培養(yǎng)則以1/2MS+0.3mg/L NAA為佳。
關(guān)鍵詞盆栽扶郎花;組織培養(yǎng);培養(yǎng)基;增殖;生根
中圖分類(lèi)號(hào)S682.1+1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739(2009)02-0014-01
扶郎花(Gerberjamesonii Bolus.)又稱(chēng)非洲菊、燈盞花,為菊科燈草屬多年生宿根草本花卉。其植株風(fēng)韻秀美,花色碩大,艷麗,花期長(zhǎng),適宜盆栽觀賞,越來(lái)越受到人們的青睞。扶郎花常規(guī)的繁殖方法有播種繁殖和分株繁殖。而種子壽命短,發(fā)芽率低,后代變異大,難以保持原有品種的優(yōu)良性狀;分株繁殖獲得的苗數(shù)量有限,增殖率低,速度慢。利用組織培養(yǎng)技術(shù),可大量快速生產(chǎn)出質(zhì)量高、性狀一致的扶郎花苗,是目前育苗的主要方式。
1材料與方法
1.1材料
采用直徑為0.5~1.0cm扶郎花的幼小花蕾作外植體。
1.2方法
1.2.1無(wú)菌材料滅菌。自長(zhǎng)勢(shì)健壯的盆栽扶郎花上剪取直徑0.5~1.0cm 的帶蕾花托,先在自來(lái)水下沖洗,再用洗衣粉浸泡3min,并用自來(lái)水反復(fù)沖洗。然后在無(wú)菌條件下,于超凈工作臺(tái)上進(jìn)行消毒操作:先用75 %酒精浸泡30s,無(wú)菌水沖洗3次,再用0.1% HgCl2溶液(加土溫2~3滴)浸5~10min,無(wú)菌水沖6~8次,無(wú)菌紙吸干水分,剝?nèi)グò?,留下花托并切成幾小塊,接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+5.0mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。
1.2.2不同基本培養(yǎng)基對(duì)扶郎花增殖的影響試驗(yàn)。植物組織培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基能給植物提供基本營(yíng)養(yǎng)成分,對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育影響較大。試驗(yàn)以配方較全面的4種常用基本培養(yǎng)基即MS、B5、N6、H為試驗(yàn)因子,并添加2.0mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,進(jìn)行不同培養(yǎng)基對(duì)扶郎花增殖影響的試驗(yàn)篩選。每個(gè)處理重復(fù)50瓶,每瓶1苗。30d后觀察生長(zhǎng)情況。
1.2.3不同激素組合對(duì)扶郎花芽分化的影響比較試驗(yàn)。植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)植物分化作用明顯。在確定基本培養(yǎng)基后,進(jìn)行生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的種類(lèi)和濃度配比試驗(yàn)。試驗(yàn)分15組處理,每組處理重復(fù)30瓶,每瓶3苗。30d為1代。培養(yǎng)結(jié)束時(shí)記錄各標(biāo)記培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的芽數(shù)。
1.2.4不同激素組合對(duì)扶郎花的壯苗生根影響比較試驗(yàn)。針對(duì)植物生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)植物生長(zhǎng)健壯和生根的作用進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。試驗(yàn)使用苗高2~3cm的叢生苗分切成單株進(jìn)行壯苗生根培養(yǎng)。試驗(yàn)分5組處理,1組對(duì)照。每組處理重復(fù)30瓶,每瓶3苗。20d后觀察記錄各配比培養(yǎng)的小苗生根率、根長(zhǎng)及生長(zhǎng)情況。
1.3培養(yǎng)條件
培養(yǎng)溫度:20~25℃,光照強(qiáng)度1 500~2 000Lx,光照時(shí)數(shù)12h/d,采用固態(tài)靜止方式培養(yǎng)。以上所選用的培養(yǎng)基配方中,蔗糖濃度為3%,瓊脂濃度為0.7%~0.8%,pH值為5.4~5.8。
2結(jié)果與分析
2.1無(wú)菌體系的形成
經(jīng)過(guò)10d的培養(yǎng),未污染的扶郎花托切口處可看見(jiàn)膨大微綠的小突起,即愈傷組織。35d后,愈傷組織逐漸開(kāi)始少量分化出新的小苗,60d后萌發(fā)的新芽為試驗(yàn)無(wú)菌外植體材料來(lái)源。
2.2不同培養(yǎng)基對(duì)扶郎花增殖的影響
從表1可以看出,扶郎花的增殖率MS>N6>B5 >H,這和培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽種類(lèi)、數(shù)量和濃度有關(guān)。MS培養(yǎng)基中含有高無(wú)機(jī)鹽成分,種類(lèi)豐富,濃度高。B5和N6也是高無(wú)機(jī)鹽成分,但是其中硝酸鹽含量較高,增殖情況沒(méi)有MS培養(yǎng)基好。而H培養(yǎng)基屬于中等無(wú)機(jī)鹽含量的培養(yǎng)基,因而增殖率明顯下降。因此,采用MS培養(yǎng)基較適宜扶郎花的增殖培養(yǎng)。
2.3不同激素組合對(duì)扶郎花分化培養(yǎng)的影響
從表2可以看出,經(jīng)過(guò)30d的生長(zhǎng),不同激素組合對(duì)扶郎花的增殖均可產(chǎn)生一定效果。當(dāng)BA濃度由1.0mg/L提高到3.0mg/L時(shí),芽分化數(shù)量明顯增加,當(dāng)BA濃度增大到5.0 mg/L時(shí),芽分化數(shù)量又開(kāi)始下降。增殖效果上,生長(zhǎng)素NAA>IBA>IAA,而NAA濃度0.2mg/L效果優(yōu)于0.5mg/L,NAA濃度為0.05mg/L效果較差。因此,培養(yǎng)基為MS+3.0mg/L BA+0.2mg/L NAA時(shí),對(duì)扶郎花增殖效果最好。
2.4不同激素組合對(duì)扶郎花的壯苗生根影響
由表3可以看出,經(jīng)過(guò)20d的生長(zhǎng),不同生長(zhǎng)素對(duì)扶郎花的壯苗和生根有一定效果,其中IAA促進(jìn)苗生根的作用弱,IBA促進(jìn)苗生根的作用一般,NAA促進(jìn)苗生根的作用強(qiáng),且能明顯促進(jìn)小苗粗壯。因而,扶郎花的壯苗生根配方以1/2MS+0.3mg/L NAA為宜。
3移栽
當(dāng)扶郎花無(wú)菌瓶苗有3~5條根,且根長(zhǎng)達(dá)2cm以上時(shí),可在常溫條件下,放入培養(yǎng)溫室中進(jìn)行煉苗3d,然后打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋再煉苗2d,即可出瓶。出瓶時(shí),洗凈扶郎花根部培養(yǎng)基,并將其移栽于珍珠巖∶跖石=1∶1的基質(zhì)中,保持80%~90%的空氣濕度,適當(dāng)遮蔭。約2周后即可成活,成活率在95%以上。培養(yǎng)40~50d即可上盆。盆栽扶郎花適宜疏松肥沃的酸性砂質(zhì)壤土,泥炭、礱糠灰、園土也是其盆栽理想基質(zhì)。盆栽時(shí)注意淺植,以利生長(zhǎng),否則易腐爛。
4參考文獻(xiàn)
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注:“本文中所涉及到的圖表、注解、公式等內(nèi)容請(qǐng)以PDF格式閱讀原文?!?/p>