徐艷　張家偉

【摘 要】為減少在植物組織培養(yǎng)中使用化學合成激素導致的環(huán)境污染，以鐵皮石斛為材料，研究綠豆芽研磨液與化學合成激素對鐵皮石斛組培苗誘導不定芽的影響。結果顯示，混合使用合成激素0.5mg/L 6BA+0.1mg/L NAA+150g/L綠豆芽研磨液培養(yǎng)基的效果最好，而單獨使用50g/L綠豆芽研磨液亦有良好效果。

【關鍵詞】激素；組織培養(yǎng)；綠豆芽液

1 材料與方法

1.1 實驗材料

綠豆芽（自制），仙斛1號組培苗（河源市裕森農(nóng)林發(fā)展有限公司提供），6-BA，NAA，瓊脂，糖，WPM；以食品攪拌機將綠豆芽攪拌成漿即為綠豆芽液。

1.2 實驗方法

實驗所用的鐵皮石斛品種為仙斛1號，選擇生長情況相近的鐵皮石斛，去除頭部和尾部，保留中間部分的莖節(jié)為實驗材料。

空白組：以WPM為基礎培養(yǎng)基，糖15g/L，瓊脂8g/L。pH 6.8，121℃下滅菌25分鐘。

實驗組：以WPM為基礎培養(yǎng)基，附加不同量的綠豆芽研磨液（50g/L、100g/L、150g/L、200g/L、250g/L），糖15g/L，瓊脂8g/L。pH 6.8，121℃下滅菌25分鐘。

對照組：

（1）以WPM為基礎培養(yǎng)基，再附加不同量的綠豆芽研磨液（50、100、150、200、250g/L），糖15g/L，瓊脂8g/L，另加化學合成激素0.5mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA。pH 6.8，121℃下滅菌25分鐘。

（2）以WPM為基礎培養(yǎng)基，添加化學合成激素0.5mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA，糖15g/L，瓊脂8g/L。pH 6.8，121℃下滅菌25分鐘。

2 結果與分析

取生長情況相似的鐵皮石斛組培苗莖，插入不同激素組合的WPM培養(yǎng)基中，28℃培養(yǎng)10天，觀察其不定芽萌發(fā)情況[1-3]。

2.1 無添加激素與綠豆芽研磨液培養(yǎng)基生長情況

在空白組實驗中，實驗材料在未添加綠豆芽研磨液、6-BA和 NAA的條件下，不定芽依然會萌動生長，但芽生長情況不均勻，芽苗細小。

2.2 單化學激素誘導鐵皮石斛發(fā)芽情況

單獨使用化學激素培養(yǎng)出的組織培養(yǎng)苗生長不均勻，部分芽沒有萌發(fā)，芽生長不均勻，最長1.9厘米，最短0.4厘米。

2.3 綠豆芽提取物誘導鐵皮石斛發(fā)芽情況

經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，添加50g/L，100g/L，150g/L綠豆芽研磨液的不定芽萌發(fā)數(shù)量與生長情況均比空白組好。但若綠豆芽研磨液濃度高于200g/L，則不定芽芽萌發(fā)數(shù)量與生長情況比空白組差。添加50g/L綠豆芽研磨液的實驗組（實驗3）不定芽萌發(fā)數(shù)量與生長情況優(yōu)于只添加化學激素的實驗組（實驗2）。隨著綠豆芽研磨液添加量的增多，接種芽不生長的情況越嚴重，說明綠豆芽研磨液最適宜的使用量為50g/L。

2.4 化學激素聯(lián)合綠豆芽提取物誘導鐵皮石斛發(fā)芽情況

經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基配添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L、150g/L綠豆芽研磨液的實驗組（實驗10）芽增殖數(shù)和芽長均為最好，部分苗一個芽節(jié)萌發(fā)生長出五個芽。化學激素聯(lián)合綠豆芽研磨液在誘導鐵皮石斛不定芽萌發(fā)中效果優(yōu)于單獨使用化學激素或單獨使用綠豆芽研磨液。

2.5 討論

植物學理論認為，由于頂端生長優(yōu)勢，植物頂端幼芽含有較豐富的生長激素，因此植物幼芽可作為尋找純天然植物組織培養(yǎng)激素的來源。目前食用植物的組織培養(yǎng)需要使用化學激素，可能導致食品安全問題，因此開發(fā)純天然植物激素替代或部分替代化學激素將非常有必要。本次實驗發(fā)現(xiàn)：添加50g/L綠豆芽研磨物的實驗組（實驗3）芽增殖數(shù)與芽長均優(yōu)于添加化學激素的實驗組（實驗2），說明添加豆芽研磨液可引起不定芽較好的萌發(fā)和生長，在一定程度上與添加化學激素的作用類似。而添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L、150g/L綠豆芽研磨液的實驗組（實驗10）芽增殖數(shù)和芽長均優(yōu)于添加50g/L綠豆芽研磨物的實驗組（實驗3），說明純天然植物激素聯(lián)合化學激素可引發(fā)更好的不定芽萌發(fā)和生長。

【參考文獻】

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