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連接酶介導(dǎo)的誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移法檢測(cè)基因點(diǎn)突變

2009-04-29 00:44:03孟祥賢黃建華譚擁軍
生命科學(xué)研究 2009年4期
關(guān)鍵詞:能量轉(zhuǎn)移雙鏈遺傳病

孟祥賢 黃建華 譚擁軍

摘要:發(fā)展了一種基于連接酶介導(dǎo)的誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)用于基因點(diǎn)突變的準(zhǔn)確快速檢測(cè)方法,針對(duì)特定突變位,最設(shè)計(jì)的核酸探針,當(dāng)與模板之間完全匹配時(shí),被連接形成一條長(zhǎng)的雙鏈,雙鏈特異性嵌入熒光染料SYBR Green Ⅰ插入新生的雙鏈區(qū)域,誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移發(fā)生,相反,核酸探針與模板之間不匹配,則不能誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移的出現(xiàn),利用該方法,成功實(shí)現(xiàn)了口地中海貧血遺傳病兩種普遍存在的點(diǎn)突變Ivs-2-654(C→T)和CD17(A→T)的基因型檢測(cè)。

關(guān)鍵詞:連接酶;誘導(dǎo)熒光共振能量轉(zhuǎn)移;SYBR Green Ⅰ;地中海貧血遺傳病

中圖分類號(hào):Q319.31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1007-7847(2009)04-0283-05

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