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毛細(xì)管電泳四色熒光檢測法分析茶樹SSR標(biāo)記

2009-04-29 21:37:57黃建安譚月萍等
生命科學(xué)研究 2009年3期
關(guān)鍵詞:毛細(xì)管電泳茶樹

黃建安 李 娟 譚月萍等

摘要:將毛細(xì)管電泳四色熒光檢測技術(shù)應(yīng)用于茶樹SSR標(biāo)記分析,該方法采用三引物PCR擴(kuò)增SSR位點,三引物即在5'端加有M13尾巴序列(5'-CACGACGTTGTAAAACGAC-3')的特異正向引物、特異反向引物及帶有熒光標(biāo)記的通用型M13引物;為了運用四色熒光檢測系統(tǒng)使通過一次毛細(xì)管電泳能同時檢測3個以上的SSR位點。采用藍(lán)、綠、黑3種不同顏色的熒光染料分別對3個M13引物進(jìn)行標(biāo)記,應(yīng)用該方法對42個茶樹品種(系)的16個SSR位點進(jìn)行遺傳分析的結(jié)果表明:此法具有簡便、可靠、低成本及高通量的優(yōu)點;且隨著所分析SSR位點數(shù)的增加,降低成本的效果更加顯著,采用建立的方法,還篩選獲得了11個多態(tài)性豐富的可應(yīng)用于茶樹遺傳研究的SSR標(biāo)記。

關(guān)鍵詞:微衛(wèi)星(microsatellite,SSR);通用M13引物;毛細(xì)管電泳;四色熒光檢測;茶樹

中圖分類號:S571.1;Q523

文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A

文章編號:1007-7847(2009)03-0251-07

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