?！∶簟●R文麗　孫朝暉等

摘要：研制和優(yōu)化寡核苷酸芯片以初步實(shí)現(xiàn)對(duì)多種常見(jiàn)HPv(Human papillomavirus)病毒的分型檢測(cè)，應(yīng)用生物學(xué)軟件對(duì)四型常見(jiàn)HPV病毒(6、11、16、18型)的全基因組序列進(jìn)行分析，設(shè)計(jì)具有型特異性、熔解溫度(Tm)相近的～60mer寡核苷酸撂針，對(duì)玻片片基進(jìn)行優(yōu)化處理后，點(diǎn)樣制備成寡核苷酸基因芯片，將含HPV全長(zhǎng)基因序列的質(zhì)粒作為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品，利用梯度限制性熒光標(biāo)記技術(shù)對(duì)其進(jìn)行熒光標(biāo)記，標(biāo)記好的樣品與芯片雜交，結(jié)果顯示HPV樣品與相應(yīng)的型特異性探針雜交有明顯的熒光信號(hào)，而與陰性對(duì)照探針和空白對(duì)照探針沒(méi)有雜交信號(hào)，通過(guò)對(duì)芯片片基處理和樣品熒光標(biāo)記方法的優(yōu)化，可以提高芯片檢測(cè)的雜交特異性和熒光信號(hào)強(qiáng)度。

關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒(HPV)；寡核苷酸芯片；限制性熒光標(biāo)記技術(shù)：檢測(cè)

中圖分類(lèi)號(hào)：R372

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007－7847(2009)03－0240－06