唐建洲

【摘要】 目的 調(diào)查血液培養(yǎng)中病原菌的菌群分布及耐藥趨勢(shì)。方法 1995/2004血液培養(yǎng)標(biāo)本用熒光全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀（Bactec9120）進(jìn)行培養(yǎng)，陽(yáng)性標(biāo)本用全自動(dòng)微生物鑒定儀（Vitek32）進(jìn)行鑒定，藥敏采用KB法。結(jié)果 在3 104份血液培養(yǎng)標(biāo)本中分離出病原菌331株，陽(yáng)性檢出率為10.7%。病原菌以革蘭陽(yáng)性（G⁺）需氧球菌居首位（50.3%），革蘭陰性（G^-）需氧桿菌次之（44.7%），真菌占3.0%，厭氧菌占1.1%。血液培養(yǎng)中的G⁺球菌對(duì)萬(wàn)古霉素和亞胺培南較為敏感，G^-桿菌對(duì)亞胺培南、舒普深、丁胺卡那較為敏感。結(jié)論 血液培養(yǎng)病原菌以G⁺球菌為主，G^-桿菌次之；兒童血液培養(yǎng)病原菌以葡萄球菌屬為主；亞胺培南對(duì)G⁺球菌和G^-桿菌均具有較高的敏感率。

【關(guān)鍵詞】 血液培養(yǎng)；病原菌；抗藥性，多藥；分離鑒定

Distribution and antimicrobial resistance of pathogenic bacteria in blood culture TANG Jian-zhou.Yongzhou Peoples Hospital,Hunan 425000,China

【Abstract】 Objective To investigate the distribution and antimicrobial resistance of pathogens isolated from blood specimens in patients with fever in our hospital from 1999-2007,Methods Blood specimens were cultured by Bactec 9120? Fluorescent Instruments.The colonies of the specimens yielding growth were identified by the Vitek32 Instruments and KB method was used for the drug sensitivity tests.Results Three hundred and thirtyone bacteria strains were isolated from a total of 3104 blood culture specimens,with a positive rate of 10.7%.Of the identified bacteria,G⁺cocci accounted for 50.3%,G^-bacilli accounted for 44.7%,fungi accounted for 3.0%,and anaerobian accounted for 1.1%.The susceptibility rates of G^-bacilli to Imipenem,Amikacin and cefoperazone/sulbactam were high.The susceptibility rate of G⁺cocci to vancomycin and Imipenem were also high.Conclusion G⁺cocci prevail over G^-bacilli in the blood specimens.The staphylococci are the chief bacteria in the childrens blood specimens.Both G⁺cocci and G^-bacilli are sensitive to Imipenem.

【Key words】 Blood culture; Pathogens; Drug resistance,Multiple; Isolated identification

血液培養(yǎng)陽(yáng)性是確診敗血癥的重要依據(jù)。大部分患者血液中的細(xì)菌數(shù)量很低，特別是在感染早期或抗生素治療后，通常小于1×10³cfu/L，所以提高血液培養(yǎng)陽(yáng)性率，快速、準(zhǔn)確地作出病原學(xué)診斷，一直是臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的重要課題。為此筆者回顧性分析了本院9年間血液培養(yǎng)結(jié)果,并對(duì)病原菌分布特點(diǎn)及藥物敏感進(jìn)行分析。

1 材料和方法

1.1 材料 1999/2007住院疑似敗血癥靜脈血3 104份(13~15 ml),分別注入需氧和厭氧培養(yǎng)瓶中；兒童取靜脈血1~3 ml注入小兒培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，骨髓取適量注入小兒培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。輕搖振蕩混勻，立即轉(zhuǎn)送入熒光全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀（Bacte 9120）內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。Bacte 9120由美國(guó)BD公司出品，并采用該公司配套熒光血液培養(yǎng)瓶，分厭氧、需氧、小兒培養(yǎng)瓶3種。全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)(Vitek32)系美國(guó)生物梅里埃Vitek公司生產(chǎn)，鑒定卡亦由該公司提供。

1.2 方法 將送檢的血液培養(yǎng)瓶立即放入Bactec9120內(nèi)培養(yǎng)，待其報(bào)警時(shí)取出轉(zhuǎn)種血平板、麥康凱平板、沙保弱平板。如果厭氧培養(yǎng)瓶報(bào)警則取出轉(zhuǎn)種厭氧培養(yǎng)基，置厭氧環(huán)境培養(yǎng)，置35℃溫箱18~24 h后，觀(guān)察生長(zhǎng)情況。根據(jù)菌落形態(tài)，革蘭染色結(jié)果，然后上全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)(Vitek32)進(jìn)行鑒定。所用血液培養(yǎng)瓶及鑒定試卡均采取ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株，并進(jìn)行質(zhì)量控制。藥物敏感性試驗(yàn)采用KB紙片擴(kuò)散法,藥敏紙片為北京天壇中國(guó)生物制品藥品檢定所和英國(guó)Oxoid公司的產(chǎn)品。結(jié)果判定按1997年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)推薦的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。用標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌ATCC 5923,大腸埃希菌ATCC 25922,銅綠假單胞菌ATCC 27853定期做藥敏檢測(cè),以確保藥敏結(jié)果的可靠性。

2 結(jié)果

從3 104份血液培養(yǎng)中分離出病原菌331株,陽(yáng)性檢出率為10.7%,其中革蘭陽(yáng)性菌（G⁺） 55.3%,革蘭陰性菌（G^-） 44.7%,其中G⁺需氧球菌50.3%,G^-需氧桿菌44.1%,真菌3.0%,厭氧菌1.1%。

3 討論

本文研究表明，前10位菌屬分別是葡萄球菌屬、埃希菌屬、鏈球菌屬、沙門(mén)菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、腸球菌屬、不動(dòng)桿菌屬、假單胞菌屬、假絲酵母菌，它們占分離病原菌總數(shù)的88.7%。前10位菌是金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、傷寒沙門(mén)菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌 、陰溝腸桿菌、中間型葡萄球菌、糞腸球菌、醋酸鈣不動(dòng)桿菌，占分離病原菌總數(shù)的66.9%。表明腸桿菌科細(xì)菌和葡萄球菌屬是引起敗血癥發(fā)生的主要病原菌，與國(guó)內(nèi)外資料的報(bào)道相似［1］。根據(jù)10年間病原菌的分布，在疑為敗血癥無(wú)條件做血液培養(yǎng)時(shí)，首先考慮選用針對(duì)這10個(gè)菌屬或10種細(xì)菌的抗生素的應(yīng)用以減少盲目性。

筆者對(duì)6種主要的病原菌藥敏進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，金黃色葡萄球菌β內(nèi)酰酶(+)為85.7%，MRSA為52.1%，提示金黃色葡萄球菌耐藥性已相當(dāng)嚴(yán)重。對(duì)甲氧西林耐藥（MRS）的葡萄球菌耐藥嚴(yán)重，是由于細(xì)菌中產(chǎn)生的一種青霉素結(jié)合蛋白（PBP）發(fā)生突變，產(chǎn)生新的靶位蛋白（PBP2a），導(dǎo)致β內(nèi)酰酶類(lèi)抗生素的親和力極度低下而產(chǎn)生耐藥性［2］。大腸埃希菌耐藥性也相當(dāng)嚴(yán)重?？傊?，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，各種診療手段不斷增加，這有利敗血癥的發(fā)生，在這種情況下，對(duì)于患有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病、長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制劑、免疫功能低下或不全、以及營(yíng)養(yǎng)不良的患者很容易交叉感染引起敗血癥，快速檢出病原菌，根據(jù)抗生素的敏感性，指導(dǎo)臨床合理使用抗生素，對(duì)于減輕患者的痛苦及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)都具有重要的意義［3-5］。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 王幫，李慶興，蘇剛，等.成人敗血癥與院內(nèi)感染.中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2001，13(2):95-96.

［2］ 張秀珍.當(dāng)代細(xì)菌檢驗(yàn)與臨床.人民衛(wèi)生出版社，2000:89-131.

［3］ 郭振林，崔穎鵬，陳冬梅，等.血液培養(yǎng)中病原菌的分布及其耐藥狀況分析.中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2004,16(3):162-164.

［4］薄蘭君,錢(qián)雅芬.血液系統(tǒng)腫瘤化療后院內(nèi)感染522例分析.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004,25(6):573-574.

［5］ 孫怡群,徐修禮,彭道榮,等.血液及體液2675份細(xì)菌培養(yǎng)的臨床分析與評(píng)價(jià).第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，24(16):1535-1536.