馬 超 江明樹
【摘要】化橘紅經(jīng)熱水提取、乙醇沉淀配合法進(jìn)一步分離純化得化橘紅多糖(ECP),隨后對(duì)化橘紅多糖提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。
【關(guān)鍵詞】化橘紅;多糖;提取工藝;正交試驗(yàn)
【中圖分類號(hào)】R284.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2009)10-0010-01
1材料與方法
1.1材料化橘紅(本實(shí)驗(yàn)所用材料從化州的化橘紅采集得到)。
1.2化橘紅多糖(ECP)的提取曬干的化橘紅經(jīng)粉碎過篩處理后,稱取干燥的化州橘紅細(xì)粉100g,經(jīng)石油醚、乙醚提取脫脂,加入80%乙醇250mL,加水800mL于90℃水浴浸提2次,過濾,濾液減壓濃縮至100mL,加入5倍體積95%乙醇醇析后,依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌,干燥即得半粗多糖。將半粗品溶水后,取30mL,在攪拌下滴加10g/L(1%)鞣酸溶液,升溫煮沸,離心棄沉淀,加入20g/L(2%)活性炭攪拌10min,漏斗過濾,透析5 h后,加一定比例的乙醇,靜置24h后,過濾,沉淀用70%乙醇反復(fù)洗滌,直至洗液內(nèi)無鞣酸為止,得沉淀物后經(jīng)低溫干燥即得精制化橘紅多糖粉末。
1.3化橘紅多糖(ECP)的含量測(cè)定采用苯酚-硫酸測(cè)定法,用分光光度計(jì)測(cè)定490nm下多糖樣品含量[4]。
1.4化橘紅多糖(ECP)提取條件的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
1.4.1浸提時(shí)間選擇實(shí)驗(yàn)在料水比1:30 ,浸提溫度90℃條件下,分別在2h、3h、4h、5h進(jìn)行浸提,比較浸提時(shí)間對(duì)ECP得率的影響。
1.4.2浸提溫度選擇實(shí)驗(yàn)在料水比1:30,浸提時(shí)間4h條件下,分別在70℃、80℃、90℃、100℃進(jìn)行浸提,比較溫度對(duì)ECP得率的影響。
1.4.3料水比選擇實(shí)驗(yàn)在浸提溫度90℃,浸提時(shí)間4h條件下,選擇料水比為1:20、1:30、1:40、1:50條件下浸提,比較料水比對(duì)ECP得率的影響。
1.4.4正交試驗(yàn)根據(jù)單因素試驗(yàn)確定的條件范圍,選取三個(gè)因素的三個(gè)不同水平進(jìn)行正交試驗(yàn)(L9(33)),得出化橘紅多糖(ECP)提取最優(yōu)條件。
2結(jié)果與討論
2.1單因素分析
2.1.1浸提時(shí)間對(duì)多糖得率的影響見表1。
2.1.2料水比對(duì)多糖得率的影響見表2。
2.1.3溫度對(duì)多糖得率的影響見表3。
2.2正交實(shí)驗(yàn)根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,確定正交因素水平范圍如表4所示,根據(jù)最佳優(yōu)化條件進(jìn)行驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),所得多糖得率為16.25%。
本研究通過對(duì)化橘紅可溶性多糖提取工藝、分離純化,通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)研究了化橘紅多糖的提取工藝,確定了料水比是影響提取率的關(guān)鍵因素其次是溫度,浸提時(shí)間為最次要因素,對(duì)化橘紅多糖的提取工藝達(dá)到了極顯著水平。化橘紅多糖提取的最優(yōu)條件為:料水比為1:40,浸提溫度為100 ℃浸提時(shí)間為4h,所得多糖得率為16.25%。
(收稿日期:2009.03.28)