劉建新

摘要利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)研究了不同基本培養(yǎng)基、不同濃度的吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖以及活性炭等因子對(duì)越橘組培苗生根的影響。結(jié)果表明:5個(gè)因子對(duì)越橘再生苗生根的影響程度依次為活性炭、吲哚丁酸、基本培養(yǎng)基、萘乙酸和蔗糖。其中,活性炭的添加對(duì)越橘的生根有極顯著影響,吲哚丁酸的影響較顯著,基本培養(yǎng)基有影響但不顯著。越橘組培苗生根的適宜培養(yǎng)基組合為1/2WPMA+IBA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖20g/L+活性炭1g/L。

關(guān)鍵詞越橘;組培苗;生根培養(yǎng);正交試驗(yàn);培養(yǎng)基篩選

中圖分類(lèi)號(hào)S663.904+3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739(2009)11-0036-02

越橘(Vaccinium vitis-idaea L.)又稱(chēng)藍(lán)莓,杜鵑花科越橘屬植物,是具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣闊開(kāi)發(fā)前景的新興果樹(shù)樹(shù)種。成熟的果實(shí)呈紅色或藍(lán)色,越橘果實(shí)富含VE、VA、VB、SOD、自由基、熊果苷、花青苷等特殊成分以及鉀、鐵、鋅、鈣等微量元素,具有抗癌、增強(qiáng)心臟功能、明目、延緩腦神經(jīng)衰老等藥用價(jià)值和保健功能[1]。在美國(guó)、智利、日本、德國(guó)、加拿大等國(guó),它的生產(chǎn)也已進(jìn)入了產(chǎn)業(yè)化栽培階段。我國(guó)近幾年藍(lán)莓栽培的面積也在不斷擴(kuò)大。然而由于苗木供應(yīng)不足,目前栽培面積還相當(dāng)有限。高效育苗技術(shù)的研究將有助于我國(guó)越橘的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。

在組織培養(yǎng)中,組培苗最后移栽成活率的高低,直接關(guān)系到生產(chǎn)的效益。影響這一效益的因素眾多,其中組培苗在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的生根率與所長(zhǎng)根的質(zhì)量就是其中一項(xiàng)?；诖?本研究嘗試采用不同的激素及其濃度配比,借助正交設(shè)計(jì)方法,對(duì)越橘組培無(wú)根苗進(jìn)行培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)生根,篩選出最適宜組培苗生根的培養(yǎng)基配方,促進(jìn)組培苗更好生根,進(jìn)而為實(shí)現(xiàn)順利移栽創(chuàng)造條件,指導(dǎo)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。

1材料與方法

1.1材料選取及處理

越橘材料為購(gòu)買(mǎi)的矮生越橘品種美登(Blomidon)的二年生組培苗。剪取健壯無(wú)病蟲(chóng)害的當(dāng)年生枝條,剪成3~4cm長(zhǎng)帶芽莖段,去掉葉片,自來(lái)水沖洗干凈。無(wú)菌條件下將沖洗干凈的莖段放入70%乙醇溶液中浸泡30s,無(wú)菌水沖洗2~3次,再用0.1%升汞溶液浸泡10min,無(wú)菌水沖洗4次,切成1cm左右小段接入接種培養(yǎng)基WPMA(改良WPM培養(yǎng)基)+ZEA 1.0mg/L+蔗糖20g/L。培養(yǎng)溫度(25±1)℃,每日光照16h,光強(qiáng)1 500~2 000Lx。將初代培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生成的芽轉(zhuǎn)接于繼代擴(kuò)繁培養(yǎng)基,每3周繼代1次,以獲得優(yōu)質(zhì)健壯小苗,為進(jìn)一步生根作準(zhǔn)備。繼代培養(yǎng)20d后,取高2.5cm左右的越橘再生苗莖段作為供試材料。再生苗擴(kuò)繁培養(yǎng)基與接種培養(yǎng)基成分相同。

1.2方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)。采用L16(45)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),共16個(gè)處理,試驗(yàn)因子見(jiàn)表1。每個(gè)處理7瓶,每瓶接種7~8個(gè)莖段。

1.2.2 培養(yǎng)條件。培養(yǎng)溫度為白天24~25℃,夜晚22℃,光周期16h,光源為日光燈光源,光照強(qiáng)度2 000Lx。

1.2.3統(tǒng)計(jì)方法。接種2周后,觀察不同處理的生根數(shù),計(jì)算平均生根率,并對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行方差分析。

2結(jié)果與分析

由表2可知,不同處理組合之間越橘組培苗的生根率存在差異。在基本培養(yǎng)基為1/2WPMA,附加IBA 2.0mg/L、NAA 0.5mg/L、蔗糖20g/L和活性炭時(shí),越橘組培苗的生根率為45.23%,顯著高于其他15個(gè)組合。極差分析結(jié)果表明,這5個(gè)因素對(duì)于越橘生根影響的主次關(guān)系依次為活性炭、IBA濃度、基本培養(yǎng)基成分、NAA濃度和蔗糖濃度。

方差分析結(jié)果表明(見(jiàn)表3),添加活性炭是影響越橘生根的高度顯著因素,IBA濃度對(duì)越橘生根率影響較顯著,基本培養(yǎng)基對(duì)越橘生根的影響不顯著。

各因素及其水平對(duì)越橘生根有不同的影響?；九囵B(yǎng)基成分對(duì)越橘生根率影響程度依次為1/2WPMA、1/2 WPM、WPMA和1/2MS,但是各水平間差異不顯著。IBA濃度是影響越橘生根的較重要的因素。IBA濃度為2.0mg/L時(shí),生根率最高。方差分析結(jié)果中NAA濃度對(duì)越橘生根影響不顯著,NAA 0.5mg/L時(shí),生根率相對(duì)較高。蔗糖濃度也是影響較弱的一個(gè)因素,生根率相對(duì)較高的濃度是20g/L,與通常進(jìn)行生根培養(yǎng)的用的蔗糖濃度相同。本試驗(yàn)中影響最顯著的因素是活性炭,試驗(yàn)結(jié)果表明,添加活性炭的組合,無(wú)論其培養(yǎng)基成分如何,越橘組培苗生根率都明顯高于不加活性炭的組合。說(shuō)明根部的暗環(huán)境對(duì)于越橘生根非常重要。

在實(shí)際的觀察中,雖然3號(hào)組合與6號(hào)組合的生根率都能達(dá)到40%以上,但從圖1可以看出,3號(hào)組合的根數(shù)量較多,長(zhǎng)度比較長(zhǎng),根系的長(zhǎng)勢(shì)也更強(qiáng)壯,根系生長(zhǎng)狀況比6號(hào)組合要好。

將L16(45)正交試驗(yàn)進(jìn)行單因子效果分析,最優(yōu)化的組合為1/2WPMA+IBA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖20g/L+活性炭1g/L,與第3號(hào)試驗(yàn)的組合正好符合。

3結(jié)論與討論

試驗(yàn)的結(jié)果表明,除活性炭和IBA外,NAA、基本培養(yǎng)基和蔗糖的不同水平對(duì)越橘生根影響的差異不顯著,說(shuō)明越橘生根要求的條件不高,屬于比較容易生根的植物。

在實(shí)際生產(chǎn)中,由于從培養(yǎng)瓶取苗到移栽的過(guò)程中非常容易損傷莖、葉柄和根系,影響移栽成活率,一般不用無(wú)菌操作進(jìn)行生根培養(yǎng)。通常將增殖后的外植體切下經(jīng)IBA粉劑2 000mg/L速蘸處理或IBA溶液10mg/L浸泡后直接扦插于基質(zhì)中,生根成活率可達(dá)90%,但所需時(shí)間較長(zhǎng),約40d[2]。本試驗(yàn)中最優(yōu)化培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng),2周內(nèi)生根率可達(dá)50%,20d左右即可進(jìn)行移栽,且生根率達(dá)到85%以上。如果能減少移栽過(guò)程中人為的損傷,將不失為一個(gè)很好的方法,有待于科研和技術(shù)人員的進(jìn)一步研究和試驗(yàn)。

4參考文獻(xiàn)

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