譚有為　賈夫峰

[摘要] 目的 探討無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本金標(biāo)法篩查HBsAg的漏檢原因及對(duì)策。方法 金標(biāo)法初篩合格后,經(jīng)ELISA法檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的標(biāo)本,再用與初篩同批號(hào)金標(biāo)試紙條重新檢測(cè),對(duì)漏檢原因進(jìn)行分析。結(jié)果 11265份初篩合格標(biāo)本共檢出陽(yáng)性32份,漏檢率0.28%,32份漏檢標(biāo)本用金標(biāo)法重新檢測(cè),陽(yáng)性16份,弱陽(yáng)性5份,陰性11份。結(jié)論 加強(qiáng)操作人員業(yè)務(wù)培訓(xùn)和責(zé)任心教育,準(zhǔn)確掌握反應(yīng)條件,特別是反應(yīng)時(shí)間,可以進(jìn)一步降低初篩標(biāo)本陽(yáng)性漏檢率。

[關(guān)鍵詞]金標(biāo)法; HBsAg; 漏檢; 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

[中圖分類號(hào)] R512.62;R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2009)23-115-02

金標(biāo)法檢測(cè)HBsAg具有簡(jiǎn)便、快速、無(wú)需特殊儀器設(shè)備、可單份操作等優(yōu)點(diǎn),是血站系統(tǒng)對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前HBsAg篩查的主要方法[1]。但在利用金標(biāo)法初篩HBsAg的過(guò)程中,常會(huì)出現(xiàn)HBsAg漏檢。為了降低漏檢率,筆者對(duì)金標(biāo)法初篩合格的血液,經(jīng)ELISA法檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)的陽(yáng)性標(biāo)本,再用與初篩相同批號(hào)金標(biāo)試紙條重新檢測(cè)作對(duì)比試驗(yàn),分析漏檢原因,探討解決辦法,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 對(duì)象 經(jīng)金標(biāo)法初篩HBsAg合格后的無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本11265份。

1.1.2 試劑 HBsAg金標(biāo)法試紙條(廈門新創(chuàng)公司提供),ELISA HBsAg試劑盒(由廈門新創(chuàng)公司和北京高達(dá)公司提供),所有試劑均為市售合格試劑盒,在有效期內(nèi)使用。

1.1.3 儀器 TECAN Freedom Evolyzer(瑞士)。

1.2 方法

初篩合格的無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本,按《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(GB18467-2001),使用兩個(gè)不同廠家ELISA法試劑進(jìn)行復(fù)檢,復(fù)檢結(jié)果一陰一陽(yáng)者再進(jìn)行雙孔復(fù)試,一種試劑陽(yáng)性即定為陽(yáng)性。陽(yáng)性標(biāo)本,用與初篩同批號(hào)金標(biāo)試紙條重新檢測(cè)。所有操作均嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,并按試劑使用說(shuō)明書判斷結(jié)果。

2 結(jié)果

2008年1～8月金標(biāo)法初篩合格的11265份無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本,在實(shí)驗(yàn)室分別采用廈門新創(chuàng)和北京高達(dá)ELISA法HBsAg試劑盒進(jìn)行檢測(cè),共檢出陽(yáng)性32份,漏檢率0.28%(32/11265)。ELISA法S/CO≥1的32份標(biāo)本用與初篩相同批號(hào)金標(biāo)法試紙重新檢測(cè),30min內(nèi)觀察,結(jié)果見表1。

32份漏檢標(biāo)本金標(biāo)法重新檢測(cè)陽(yáng)性與反應(yīng)時(shí)間的對(duì)應(yīng)關(guān)系見表2。

3 討論

11265份金標(biāo)法HBsAg初篩合格標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室用ELISA法試劑檢測(cè),共檢出32例陽(yáng)性,這32份陽(yáng)性標(biāo)本再用與初篩相同批號(hào)金標(biāo)試紙條重新檢測(cè),21份呈陽(yáng)性反應(yīng)。從表1可以看出,20份S/CO>10標(biāo)本,金標(biāo)法重新檢測(cè)19例為陽(yáng)性,1例為陰性;12份S/CO<10標(biāo)本,金標(biāo)法重新檢測(cè)2例為陽(yáng)性,10例為陰性。說(shuō)明低值漏檢主要是金標(biāo)法靈敏度低所致。2例S/CO>20,金標(biāo)法重新檢測(cè)呈弱陽(yáng)性反應(yīng),這與ELISA法判斷結(jié)果雖然一致,但顯色線的強(qiáng)弱與S/CO值關(guān)系不一致。表2顯示10min內(nèi)只有16例陽(yáng)性,4例11～20min內(nèi)呈陽(yáng)性反應(yīng),1例20～30min呈陽(yáng)性反應(yīng)。

HBsAg金標(biāo)法初篩漏檢原因主要是:(1)金標(biāo)試劑本身的局限性。金標(biāo)法試劑的靈敏度不及ELISA法,會(huì)造成部分弱陽(yáng)性標(biāo)本的漏檢[2];(2)加樣量不規(guī)范。試劑說(shuō)明書規(guī)定加樣量為60μL,如果血量過(guò)少,會(huì)造成HBsAg濃度比實(shí)際濃度降低,引起漏檢;如果血量過(guò)多特別是再混有紅細(xì)胞,會(huì)造成血液外溢,且濾膜無(wú)法有效阻擋紅細(xì)胞,使紅細(xì)胞和血清一起向檢測(cè)線移動(dòng),造成檢測(cè)背景呈紅色,影響弱陽(yáng)性結(jié)果判斷;(3)溫度、濕度等環(huán)境因素過(guò)高或過(guò)低,都會(huì)影響抗原抗體反應(yīng),也可影響血清在濾膜上的層析速度,進(jìn)而影響試驗(yàn)結(jié)果[3];(4)實(shí)驗(yàn)人員操作不規(guī)范,經(jīng)驗(yàn)不足或操作失誤等;(5)高值漏檢可能與“帶現(xiàn)象”或HBsAg變異型、亞型或試紙條自身原因有關(guān);(6)反應(yīng)時(shí)間不足是重要原因。

根據(jù)金標(biāo)法檢測(cè)HBsAg的特點(diǎn),建立切實(shí)有效的預(yù)防措施,以減少漏檢,節(jié)約寶貴血液資源。 ①建立標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程并嚴(yán)格遵守,加強(qiáng)操作人員業(yè)務(wù)培訓(xùn)和責(zé)任心教育。②耐心做好獻(xiàn)血者的解釋工作,保證反應(yīng)時(shí)間不低于10min,爭(zhēng)取做到20min。③盡量保持適宜的環(huán)境溫度、濕度。④未用完的試紙條,要密封保存,防止受潮。⑤選購(gòu)靈敏度高、特異性好、加樣量少、反應(yīng)速度快的優(yōu)質(zhì)試紙。最好用ELISA法先篩選。發(fā)現(xiàn)試紙性能不穩(wěn)定立即更換。

[參考文獻(xiàn)]

[1]王凱. HBsAg金標(biāo)快速檢測(cè)在街頭獻(xiàn)血中的必要性[J]. 中國(guó)誤診學(xué)雜志,2003,3(6):905.

[2]趙曉華,李錦,李軍,等. 5個(gè)廠家HBsAg金標(biāo)診斷試劑的比較[J]. 中國(guó)輸血雜志,2002,15(4):272-273.

[3]錢立瓊,譚全旭,王鵬. 一種用于快速金標(biāo)法檢測(cè)HBsAg的加溫箱[J]. 中國(guó)輸血雜志,2004,17(5):380.

(收稿日期:2009-06-19)