趙曉東，舒紅，姜衛(wèi)國，楊向紅

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬盛京醫(yī)院病理科，沈陽 110004）

微小活檢組織的石蠟包埋及切片的制作方法

AMethod about Paraffin Embedding and Section of Biopsy Microsample

趙曉東，舒紅，姜衛(wèi)國，楊向紅

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬盛京醫(yī)院病理科，沈陽 110004）

介紹一種環(huán)保、簡易、有效的微小組織的石蠟包埋方法。

微小組織；石蠟包埋；制片

微小組織的病理制作是病理技術(shù)工作中的一個(gè)難題，由于體積小，組織經(jīng)脫水浸蠟等處理后，會(huì)變得更小、易丟失或不易找到；同時(shí)，由于脫水透明時(shí)間掌握不好，易使組織變脆，切出的片子裂隙多，不利于病理診斷?，F(xiàn)將工作中摸索出的一種較好的微小組織蠟塊及切片的制作方法報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 取材

將臨床送檢的0.3c m以下的小標(biāo)本，包括胃鏡、腸鏡、氣管鏡、膀胱鏡、宮腔鏡及各種穿刺的組織（已固定于10%的福爾馬林溶液中），置于微孔包埋盒中，立即投入含有2‰伊紅的0.9%的氯化鈉溶液中，浸泡30m i n左右，使組織著紅色。

1.2 蠟塊制作

取出包埋盒，放到脫水筐中，置自動(dòng)脫水機(jī)（美國，Th e rm o）中，設(shè)置程序?yàn)椋?0%福爾馬林溶液中固定2h；分別在85%、90%、95%的乙醇中20m i n，100%乙醇2次各30m i n；二甲苯溶液3次各10m i n；浸蠟2次，分別為10m i n及30m i n。常規(guī)包埋，制成蠟塊。

1.3 切片及染色

把蠟塊放于切片機(jī)（德國，Le i c a）上，切片厚度為3μm，烘片后，用自動(dòng)染色機(jī)（德國，MICROM）染色。

2 結(jié)果

制成的蠟塊及切片見圖1、圖2。

3 討論

一般情況下，所取的材料放入包埋盒后，或于空氣中暫時(shí)放置，或直接投入福爾馬林固定液中。如果在送檢的小標(biāo)本較多時(shí)，取材時(shí)間較長，先取的微小組織暴露在空氣中容易干燥變硬，影響染色；如果直接投入福爾馬林固定液中，由于其中乙醛的揮發(fā)等原因，久而久之，對(duì)取材的工作人員健康會(huì)造成傷害，對(duì)環(huán)境造成污染［1］。0.9%的氯化鈉溶液是與人體組織等滲的溶液，不會(huì)對(duì)組織標(biāo)本及工作人員造成任何損傷，所以我們采用此溶液作為取材時(shí)臨時(shí)保存組織的液體，既維持了組織結(jié)構(gòu)，又保持了組織的濕潤，尤其有利于工作人員健康及環(huán)境的保護(hù)。

微小組織在技術(shù)員包埋過程中需仔細(xì)觀看、查找、核對(duì)取材的塊數(shù)，有時(shí)與凝固的石蠟碎屑無法區(qū)別。我們?cè)?.9%氯化鈉溶液中加入2‰的伊紅，使組織著紅色。由于適當(dāng)?shù)囊良t染料在一系列處理過程中不脫色，所以使組織在包埋過程中易識(shí)別，大大提高了包埋速度和質(zhì)量。伊紅染料是切片染色的染料之一，所以組織上的紅色不會(huì)影響切片的染色效果。

小組織的脫水、透明及浸蠟的時(shí)間要嚴(yán)格掌握，一旦處理不好，組織就會(huì)硬脆，切出的片子都是刀痕，無法進(jìn)行病理診斷。我們確定了脫水、透明及浸蠟的時(shí)間，切片質(zhì)量非常理想。

在日常切片過程中，經(jīng)常由于無法確定小組織的邊界，而使切片組織不全或蠟塊切修過度，造成組織丟失。由于加入伊紅，使紅色組織在白色的蠟塊中非常醒目，很容易掌握蠟塊的切修深度，保證了切片的質(zhì)量。

［1］張藝濱，吳傳楠，楊慧敏，等.甲醛毒性作用的研究進(jìn)展［J］.吉林醫(yī)藥醫(yī)院學(xué)報(bào)，2008，29（4）：232-235.

（編輯 武玉欣，英文編輯 鄭華川）

R361

B

0258-4646（2010）01-0076-01

趙曉東（1962-），男，技師，中專.

舒紅，E-mail：shuhong0302@hotmail.com

2009-05-22