杜宗沛,解慧梅,吳 植,徐婷婷,黃銀蕓

(江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,江蘇泰州225300)

1 發(fā)病情況

2009年8月份,蘇中地區(qū)某種豬場,某日10頭2月齡仔豬發(fā)病,病豬食欲降低直至廢絕,高熱,遂注射頭孢哌酮,未見好轉(zhuǎn)。隨后又有幾頭繁殖母豬、哺乳仔豬、保育舍豬只發(fā)病。先發(fā)病的仔豬有幾頭死亡,隨后來本院就診。

2 臨床癥狀

豬只突然發(fā)病,體溫41℃～42℃,食欲降低直至廢絕,精神沉郁,臥地不起;有短期輕度嘔吐和腹瀉;咳嗽,張口呼吸,口腔和鼻腔流出大量帶血的泡沫樣分泌物,呈犬坐姿勢,逐漸出現(xiàn)呼吸衰竭;耳、鼻、頸、胸腹、四肢直至全身皮膚發(fā)紺。

3 病理變化

剖檢病死豬只可見黏膜、漿膜出血,鼻腔、喉頭及氣管、支氣管黏膜充血,內(nèi)有大量血色氣泡。肺充血、腫脹、出血,呈暗紅色,切面易碎,間質(zhì)充滿血色膠樣液體,肝變明顯;可見纖維素性出血性胸膜肺炎。全身淋巴結(jié)腫大、充血。心包有淡黃色積液。胸腔內(nèi)有大量血色液體。胸膜與心包粘連。

4 實驗室檢驗

4.1 病原檢查 分別取病死豬的肺、胸膜及心血觸片,經(jīng)革蘭染色后鏡檢,見革蘭陰性卵圓形兩極濃染球桿菌和長絲狀菌存在。

4.2 病原分離培養(yǎng) 將鮮血瓊脂培養(yǎng)基,加熱到85C°,經(jīng)10 min后,即制成巧克力培養(yǎng)基;嚴(yán)格無菌操作,分別取病死豬的肺、胸膜及心血,鉤菌、接種,在10%CO2環(huán)境中,經(jīng)37℃恒溫培養(yǎng)24 h后挑取分離菌鏡檢,與4.1結(jié)果相同。

所培養(yǎng)的菌落呈圓形隆起,表面光滑、邊緣整齊、灰白色半透明小菌落。

4.3 動物試驗 取30只體重20 g左右的小鼠(購自揚州大學(xué)實驗動物中心),對其中10只各皮下注射0.2 mL胸膜、心血乳劑懸液,作為第1組;再取10只各注射0.2 mL巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)物的生理鹽水稀釋液,作為第2組;另10只作為對照組。結(jié)果對照組全部存活;試驗組小鼠分別在20 h～50 h死亡,剖檢死亡小鼠癥狀1組、2組基本相似,同時進(jìn)行組織觸片和細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果檢查也和上述發(fā)病豬一樣。

4.4 生化試驗 將從病料中分離的病菌進(jìn)行生化試驗鑒定,結(jié)果：溶血性、需 X因子、氧化酶、吲哚、脲酶、甘露醇、鳥氨酸脫羧酶、精氨酸水解酶、木糖反應(yīng)為陰性。需V因子、葡萄糖產(chǎn)酸、氮還原、蔗糖、觸酶、七葉苷反應(yīng)為陽性。CO2促生長、乳糖反應(yīng)變化不確定。生化試驗結(jié)果表明,分離菌株符合副豬嗜血桿菌的生化特性。

4.5 V因子需要試驗 挑取巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)菌,接種兔鮮血瓊脂平板培養(yǎng)基,用金黃色葡萄球菌于中間畫一直線,置10%CO2環(huán)境中,經(jīng)37℃恒溫培養(yǎng)24 h后,見靠近金黃色葡萄球菌直線的菌落很大,遠(yuǎn)離直線的菌落很小,甚至不見生長,證明“衛(wèi)星現(xiàn)象”存在。同時,菌落周圍β溶血明顯。

4.6 藥敏試驗 22種藥敏紙片購自上海市伊華有限公司。試驗結(jié)果表明,該菌對復(fù)方新諾明、磺胺甲基咪啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺異噁唑、林可霉素、結(jié)晶紫、桿菌肽、紅霉素、土霉素、卡那霉素高度敏感;對頭孢哌酮、頭孢噻吩、慶大霉素、四環(huán)素、青霉素、呋喃妥因、氯霉素、鏈霉素、洛美沙星、環(huán)丙沙星、氟甲砜霉素、安普霉素不敏感。

4.7 酶聯(lián)免疫吸附試驗 對發(fā)病經(jīng)治愈豬只采血分離血清。選用武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)的豬傳染性胸膜肺炎ApxⅣ-ELISA抗體檢測試劑盒,按照說明書進(jìn)行操作。結(jié)果在酶標(biāo)儀上測各孔樣品OD630值＞0.35,判為陽性。

5 防治

確診為該豬場發(fā)生的是豬放線桿菌性胸膜肺炎。立即隔離發(fā)病豬只;對死亡豬只進(jìn)行無害化處理;清理圈舍,用菌毒敵消毒殺菌。對發(fā)病豬只每頭肌肉注射卡那霉素50萬單位、磺胺類藥物一支,早晚各1次。

對未發(fā)病豬群,圈舍消毒殺菌,如發(fā)現(xiàn)有癥狀豬只,立即進(jìn)行藥物注射、隔離。

全場采取以上措施3 d后,已無新發(fā)病例出現(xiàn),疫情得到控制。