李學(xué)慧，孫貴才，李廣玉

1.中國人民解放軍第404醫(yī)院 檢驗病理科，山東 威海 264200；2.中國人民解放軍第92323部隊醫(yī)院，山東 青島266011

微生物染色和細(xì)胞染色是醫(yī)學(xué)檢驗工作中的重要組成部分。為了更好地適應(yīng)醫(yī)療市場的需求，方便廣大群眾，將檢驗工作更細(xì)致、更全面地推向中小醫(yī)院、社區(qū)門診部和邊遠(yuǎn)地區(qū)的醫(yī)療單位，染色項目的展開意義重大，它為形態(tài)學(xué)疾病的診斷提供了重要的依據(jù)。在染色過程中，根據(jù)染色項目的實際情況，需要在恒定的適宜溫度下開展。經(jīng)檢索，目前對專用的檢驗染色工具的報道較少，近年來出現(xiàn)的主要設(shè)備有檢驗染色柜和全自動染色儀。但兩者的體積都較大，不便于攜帶，且前者沒有水浴箱及專用的染色孔，多依靠染色缸進(jìn)行化學(xué)染色，染液不能長時間放置，浪費嚴(yán)重；后者設(shè)備成本昂貴，且主要用于病理學(xué)中的組織蠟塊包埋、切片等技術(shù)，不適用于小規(guī)模醫(yī)療單位的檢驗染色工作。而將這幾者完全聯(lián)系在一起的研究暫時還沒有。在實際工作中我們摸索設(shè)計了便攜式的恒溫染色箱，經(jīng)試用，效果較好，現(xiàn)將該產(chǎn)品及其應(yīng)用情況介紹如下。

1 原理

檢驗染色的常用方法有細(xì)胞染色和微生物染色，其原理是在物理和化學(xué)因素的作用下，利用細(xì)菌、真菌和細(xì)胞中的酸性或堿性物質(zhì)對堿性或酸性染料的吸附作用而使其著色。在反應(yīng)過程中提供適宜的溫度可以縮短酸(堿)性物質(zhì)著色的時間,提高染色效果。

2 結(jié)構(gòu)

整個箱體體積較小，為48×36×36(cm3)，為分上下兩層。上層為收納箱，備有試劑盒、載玻片、蓋玻片、推片、試管等物品器械，用于制備待染玻片，打開箱蓋即可使用。下層為恒溫箱，溫度可自行設(shè)制。恒溫箱頂部嵌放有帶蓋的染色盤。染色盤上設(shè)有12個染色孔位，大小與載玻片一致，片頭1/4處跨有橫梁，橫梁高4mm，一端固定在染色盤上，可90°轉(zhuǎn)動，另一端為自由點。染色孔位下排列有凹槽，凹槽的末端匯入環(huán)繞在染色盤四周的排污管道，依照左端略高、上端略高的原則走向。管道出口處連有橡皮管，中間設(shè)有吸耳球，下接污水瓶，可反復(fù)擠壓吸耳球吸取排污管道中的廢液。污水瓶掛置在箱子一側(cè)，與污水瓶并排的是凈水瓶，凈水瓶材質(zhì)較柔軟，可擠捏加壓出水沖洗玻片。整套染色箱以不銹鋼材質(zhì)為主，導(dǎo)熱性好，美觀整潔且防腐蝕。

3 操作

染色時將恒溫箱接通電源，打開開關(guān)，將溫度設(shè)定在37℃或需要的其它溫度。從收納箱中取出需要的器械，推制出合格的待染玻片。取一張空白載玻片，放在染色盤的一個染色孔位上。在空白玻片片尾1/3處滴加200μL染液，已干燥的待染玻片待染面朝下，兩張玻片片尾對應(yīng)。先由片尾處緩慢放下，接觸到染液后再將片頭輕輕放下，近片頭四分之一處正好擔(dān)在橫梁上，使待染片與底片呈10°夾角，利用地球的重力和液面的張力使染液與玻片緊密結(jié)合。蓋上染色盤的蓋子，染色到時間后，將蓋子取下，將凈水瓶的噴嘴對準(zhǔn)兩張玻片的夾角處，輕捏瓶身，擠壓出水，將染液先行沖走大部分，然后扶住染片的兩側(cè)，由片頭處輕輕提起后，繼續(xù)用凈水瓶沖洗干凈，晾干。廢液經(jīng)孔位下的凹槽匯入四周的排污管道，最后流至接有橡皮管的最低點，反復(fù)擠壓吸耳球，吸取廢液存至污水瓶中。最后可將橡皮管拔下，將嵌放的染色盤整體取下沖洗。污水瓶也可取下沖洗。

4 使用體會

(1)傳統(tǒng)的染色方法基本上為染色缸法。即在50mL的染色缸內(nèi)注滿染液，將玻片置于其中染色。因染液大多需要新鮮配制，短時間內(nèi)若無相應(yīng)的標(biāo)本需要處理，則染缸內(nèi)的染液便要廢棄。這種方法浪費較大，不適用于標(biāo)本量少的醫(yī)療單位。而染色孔位的設(shè)計科學(xué)合理，將單張玻片所耗損的染液量降到最低，使玻片與染液一一對應(yīng)，節(jié)省了試劑成本。

(2)進(jìn)行特殊染色時需要恒定的溫度。傳統(tǒng)的染色方法是將染缸先置于水浴箱或恒溫箱內(nèi)，平衡好溫度后再將待染片放入，沖洗時再將染缸取出。來回取放設(shè)備操作不便，若拿置不當(dāng)還易造成水浴箱的污染。

(3)普通的染色方法是待染面朝上染色。這種方法的缺點是易造成染料沉渣的附著，影響讀片結(jié)果。而該染色箱獨有的逆向染色法克服了這一困難，提高了染色效果。一體式的恒溫染色箱體積較小，功能齊全，便于攜帶，易于展開，可用于規(guī)模較小的醫(yī)療單位的檢驗工作中。減輕了購買專業(yè)醫(yī)療設(shè)備的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，縮短了染色時間，提高了染色效果，對形態(tài)學(xué)疾病的診斷提供了及時可靠的依據(jù)。

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