高海燕 丁恩峰 趙麗雅 張文英

(1. 石藥集團(tuán)恩必普藥業(yè)有限公司；2. 英國施達(dá)化學(xué)集團(tuán)公司中國代表處，河北石家莊 050031)

無菌藥品制造是涉及多學(xué)科、多工種的復(fù)雜制藥技術(shù)。其中，無菌檢測是評估產(chǎn)品是否符合無菌要求的關(guān)鍵手段。由于檢測條件的限制和人員操作技術(shù)的欠缺，無菌檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性受到很多質(zhì)疑。Isolator技術(shù)是國際上流行的無菌檢測保障手段，對于確保無菌檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性具有重要意義。

在19世紀(jì)80年代中期，人類就開始使用隔離器（isolator）來建立一個無菌檢驗(yàn)工作環(huán)境。隔離器可以通過密封的方法或者采用過濾除菌空氣保持正壓的方法，創(chuàng)造一個無菌的環(huán)境。當(dāng)隔離器處于密閉狀態(tài)時，僅僅能夠在隔離器內(nèi)部或者通過一個特殊的快速傳遞倉來傳遞物品；當(dāng)隔離器打開時，允許通過一個特殊設(shè)計(jì)并經(jīng)過驗(yàn)證的可避免污染物進(jìn)入的開口遞出物品。隔離器一般采用柔軟的塑料（例如：聚氯乙烯）、硬塑料、玻璃或不銹鋼來制造。

由于隔離器（isolator）系統(tǒng)從根本上避免了分析人員與物品的直接接觸，因此在無菌檢驗(yàn)時可以避免被檢驗(yàn)物品和輔助設(shè)備被污染。當(dāng)隔離器內(nèi)部與外部環(huán)境完全隔離時，隔離器內(nèi)部的物品是在無菌條件下進(jìn)行傳遞的。操作者穿著半身衣在隔離器內(nèi)部進(jìn)行無菌操作。半身衣是連接在隔離器墻體上的柔軟的部分，隔離器內(nèi)部有足夠的空間允許操作者穿著半身衣在隔離器內(nèi)部進(jìn)行操作；當(dāng)然，操作者也可以通過連接在隔離器璧體上的袖子和手套進(jìn)行操作。在使用隔離器的情況下，不要求操作者穿著特殊的潔凈服進(jìn)行操作，操作者穿著標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室服裝進(jìn)行操作就足夠了。為確保隔離器內(nèi)部無菌，一般使用殺孢子化學(xué)試劑對隔離器內(nèi)部滅菌來殺死全部活的生物。

1 隔離器的類別和使用范圍

隔離器系統(tǒng)（Isolator system）是無菌制藥領(lǐng)域的關(guān)鍵設(shè)備。隔離器系統(tǒng)最早從二十世紀(jì)八十年代開始使用以來，逐漸完善和發(fā)展。在近十年中，獲得長足技術(shù)進(jìn)步。在2002年5月，USP微生物方面的開放會議中，僅有兩項(xiàng)無菌技術(shù)被冠予“高級的（advanced）”名號來進(jìn)行討論：隔離器技術(shù)（Isolator technology）和吹-填-封技術(shù)（Blow-fill-seal technology）。由此可見，隔離器技術(shù)在無菌制藥領(lǐng)域的地位。

目前，在無菌制藥領(lǐng)域中，主要有如下幾種隔離器在使用，分別是無菌取樣隔離器、無菌分裝隔離器，無菌檢驗(yàn)隔離器等。隨著隔離器技術(shù)的發(fā)展和完善，這項(xiàng)技術(shù)必將在無菌制藥行業(yè)的更多環(huán)節(jié)使用。另外，在和制藥行業(yè)相關(guān)的教學(xué)環(huán)節(jié)和科研環(huán)節(jié)，隔離器也在逐漸被采用。圖1展示了隔離器的目前使用情況和發(fā)展前景。

圖1 隔離器在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用和發(fā)展

2 隔離器的結(jié)構(gòu)和設(shè)計(jì)

2.1 空氣處理系統(tǒng)

用于無菌檢驗(yàn)的隔離器需要配備除菌過濾器（要求使用HEPA）。靜態(tài)時，要求隔離器內(nèi)部塵埃粒子項(xiàng)目符合美國聯(lián)邦標(biāo)準(zhǔn)209E的100級空氣質(zhì)量要求。動態(tài)時，不要求隔離器內(nèi)部符合100級空氣質(zhì)量要求，也不要求隔離器內(nèi)部的空氣流速或者換氣次數(shù)達(dá)到某標(biāo)準(zhǔn)。隔離器系統(tǒng)是能夠防止泄漏的，然而，它不是通常意義上的防止隔離器與外界環(huán)境進(jìn)行空氣交換。當(dāng)與外界環(huán)境直接相連的門打開時，隔離器內(nèi)部的正壓保證隔離器內(nèi)部的無菌環(huán)境不被污染。用于無菌檢驗(yàn)的隔離器內(nèi)部空氣流可以是單向流或者湍流。

2.2 傳遞接口及傳遞門

隔離器有一個附屬的“傳遞通路”殺菌器，通過傳輸通道殺菌器可以直接將無菌的培養(yǎng)基、無菌的稀釋液、無菌的裝備等傳遞進(jìn)隔離器系統(tǒng)。一般設(shè)計(jì)成快速傳遞倉或門（RTP=rapid transfer port），通過快速傳遞倉或門可以把兩個隔離器彼此相連，無菌的物品就能夠從一個隔離器傳遞到另一個隔離器。通過快速傳遞倉，兩個隔離器或者一個隔離器和一個容器就可以在普通環(huán)境中連接。通過密封圈或法蘭，將傳遞倉的非無菌表面連接。用墊圈壓緊來保證氣密性，避免微生物進(jìn)入。

當(dāng)兩個傳遞倉法蘭連接形成一個密封通道時，存在一個狹長的墊圈帶，這個部位可能存在微生物污染。因此一旦連接完，在使用傳遞倉傳遞物品之前，必須立即用殺孢子殺菌劑對墊圈暴露部分進(jìn)行處理。并且在傳遞物品時，應(yīng)當(dāng)注意無菌操作技巧的運(yùn)用，避免物品或手套接觸墊圈表面。

將墊圈裝配在法蘭上時，應(yīng)當(dāng)按照傳遞倉生產(chǎn)商的建議進(jìn)行預(yù)防性的維護(hù)和潤滑。傳遞倉墊圈應(yīng)當(dāng)按照生產(chǎn)商建議的要求定期更換并且定期檢查，破損的墊圈不能夠保證真正的密封。

3 隔離器安裝位置的選擇

用于無菌檢驗(yàn)的隔離器不需要安裝在潔凈區(qū)，但是安裝在一個限制非授權(quán)人員進(jìn)入的區(qū)域仍然是重要的。安裝時，應(yīng)當(dāng)使隔離器周圍有足夠的空間，以便于移動隔離器，傳遞物料，以及通常的維護(hù)。隔離器所在的房間不要求進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測。

隔離器房間溫度和濕度對于操作者的安全和舒適是重要的，溫濕度對于除菌和凈化技術(shù)的影響效果也很關(guān)鍵。如果隔離器位于空氣補(bǔ)給口的氣流通道中，當(dāng)隔離器采用蒸汽滅菌時，空氣氣流會使隔離器個別部位溫度較低形成冷凝水。當(dāng)采用對溫度敏感的滅菌方法時，隔離器所處房間的溫度應(yīng)當(dāng)是均一的。

4 隔離器和傳統(tǒng)潔凈技術(shù)的比較

無菌隔離器系統(tǒng)和傳統(tǒng)潔凈技術(shù)比較，具有明顯的優(yōu)勢。請參見下表：

無菌隔離系統(tǒng)與傳統(tǒng)潔凈技術(shù)的對比

當(dāng)然，采用無菌隔離器系統(tǒng)進(jìn)行無菌生產(chǎn)和無菌檢驗(yàn)，首次固定資產(chǎn)投資較大，在驗(yàn)證投入和技術(shù)維護(hù)方面需要較大精力和資金。

5 隔離器系統(tǒng)的驗(yàn)證

無菌檢驗(yàn)合格與否是產(chǎn)品放行的前提，在進(jìn)行無菌檢驗(yàn)之前，隔離器系統(tǒng)的驗(yàn)證必須完成。為了核實(shí)隔離器及其輔助設(shè)備能夠用于進(jìn)行無菌檢驗(yàn)，隔離器系統(tǒng)的驗(yàn)證可以分成三個部分：安裝確認(rèn)（IQ）、運(yùn)行確認(rèn)（OQ）、性能確認(rèn)（PQ）。在無菌檢驗(yàn)隔離器系統(tǒng)驗(yàn)證過程中，應(yīng)當(dāng)考慮到下面建議：在驗(yàn)證程序中，對特定階段（例如：IQ、OQ、PQ）而言，測試功能項(xiàng)目在那個階段進(jìn)行就不是關(guān)鍵的。只要在隔離器用于檢測前，隔離器的功能已經(jīng)被驗(yàn)證并且有書面記錄就可以了。

5.1 安裝確認(rèn)（IQ）

IQ階段包括隔離器系統(tǒng)詳細(xì)的外觀描述，例如：隔離器尺寸、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、所用的材料。關(guān)于接觸面和傳遞系統(tǒng)，要清晰的畫圖并標(biāo)注尺寸。設(shè)計(jì)的隔離器是否符合使用的規(guī)格需要被核實(shí)，例如：空氣補(bǔ)給、真空、外部排氣、溫濕度控制功能等。其他與隔離器系統(tǒng)一起使用的設(shè)備也要詳細(xì)描述；任何設(shè)計(jì)規(guī)格的修訂都應(yīng)當(dāng)詳細(xì)描述。設(shè)備指南和復(fù)印件應(yīng)當(dāng)編成目錄并保存，在需要的時候，操作者可以得到并重新查閱。一旦設(shè)計(jì)規(guī)格符合性被確認(rèn)，所有的圖紙、方法和設(shè)備圖要編成目錄，完善保存并能夠重新得到。

所有的文檔應(yīng)重新被審閱，便于核實(shí)能夠反映出安裝系統(tǒng)的關(guān)鍵屬性要求。這樣就建立了符合隔離器系統(tǒng)設(shè)計(jì)規(guī)格和安裝要求的技術(shù)基礎(chǔ)。

在故障模式下或高風(fēng)險情況下進(jìn)行分析時，可能導(dǎo)致試驗(yàn)失敗的潛在的過程控制問題和設(shè)備問題可能被發(fā)現(xiàn)，這些問題應(yīng)當(dāng)進(jìn)行核實(shí)并記錄在文件中。如果有必要，系統(tǒng)可以被修改以便將失敗的風(fēng)險降到最低點(diǎn)，并且應(yīng)該建立關(guān)鍵點(diǎn)的控制方法。

IQ 的結(jié)果應(yīng)進(jìn)行匯總形成報(bào)告，報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：

設(shè)備：設(shè)備應(yīng)符合設(shè)計(jì)規(guī)格并被列表記錄。IQ報(bào)告應(yīng)核實(shí)：符合設(shè)計(jì)規(guī)格的設(shè)備被接收，并且按照生產(chǎn)廠商的要求進(jìn)行安裝。

結(jié)構(gòu)材質(zhì)：隔離器系統(tǒng)關(guān)鍵部位的結(jié)構(gòu)材質(zhì)經(jīng)檢測是符合設(shè)計(jì)要求的。應(yīng)該核實(shí)隔離器材質(zhì)的殺菌方法兼容性。

儀表：系統(tǒng)儀表按照它們實(shí)際的校驗(yàn)狀態(tài)來列表記錄。

設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)：所有操作功能，例如：在操作手冊、流程、儀器圖表中指明的功能，都應(yīng)當(dāng)被核實(shí)能夠執(zhí)行并且符合規(guī)格要求。隔離器系統(tǒng)和其他系統(tǒng)的所有連接部分應(yīng)進(jìn)行審核，其功能應(yīng)被核實(shí)并符合設(shè)計(jì)要求。

過濾器：HEPA過濾器和其他微生物截留過濾器的測試和證書應(yīng)該存檔；測試結(jié)果和證書復(fù)印件應(yīng)包括在IQ報(bào)告中。核對采購合同，核實(shí)空氣過濾系統(tǒng)是否符合規(guī)格要求。

計(jì)算機(jī)軟件：所有的和隔離器系統(tǒng)有關(guān)系的計(jì)算機(jī)軟件列出名稱、規(guī)格、文檔版本號碼。計(jì)算機(jī)系統(tǒng)盤被檢查是否貼簽并安全保存。

5.2 運(yùn)行確認(rèn)（OQ）

運(yùn)行確認(rèn)階段將驗(yàn)證隔離器系統(tǒng)的運(yùn)行是否符合設(shè)計(jì)的功能要求。

運(yùn)行性能檢查：這個試驗(yàn)核實(shí)所有的警報(bào)和警報(bào)的功能是否符合說明書要求。系統(tǒng)所有設(shè)置點(diǎn)和可調(diào)整的參數(shù)都應(yīng)當(dāng)被核實(shí)是否符合規(guī)定的要求。

隔離器完整性檢測：在通常的操作條件下，隔離器應(yīng)保持完整性。在隔離器裝載物品并使用化學(xué)殺菌劑滅菌前，一個泄露試驗(yàn)可以證明隔離器符合廠家說明書要求并且是安全的。為了避免外界污染，隔離器通常在20-50Pa正壓下進(jìn)行操作。如果隔離器系統(tǒng)要求一個恒定的正壓，驗(yàn)證過程中必須核實(shí)：操作時的壓力設(shè)置值能夠維持恒定的正壓并且可以控制壓力數(shù)值。

滅菌周期確認(rèn)：執(zhí)行一個滅菌周期，以便核實(shí)操作的實(shí)際數(shù)值與滅菌周期的各個步驟情況和設(shè)置數(shù)值一致性。

可以采用幾種不同的滅菌方法來殺死隔離器和輔助系統(tǒng)的微生物。可以用于隔離器滅菌的化學(xué)試劑包括：過氧乙酸、二氧化氯、臭氧、過氧化氫，不同的試劑有不同的使用條件和過程控制要求。選定的滅菌方法應(yīng)符合廠家的操作要求，并且在使用規(guī)程中對這些方法進(jìn)行詳細(xì)描述是十分關(guān)鍵的。使用過氧化氫蒸汽滅菌時，隔離器房間的溫度和濕度的控制是關(guān)鍵的。隔離器內(nèi)部的溫度也是重要的，尤其對使用過氧化氫蒸汽滅菌過程中的影響是非常重要的，關(guān)鍵在于保持過氧化氫的濃度，避免低于過氧化氫的冷凝點(diǎn)。一些化學(xué)試劑，例如二氧化氯和臭氧，要求在滅菌前預(yù)先增加隔離器的濕度。如果采用對濕度有較高的要求的滅菌方法，在OQ中，隔離器系統(tǒng)控制濕度的能力必須被核實(shí)。

滅菌劑的濃度和濃度分布情況也是重要的。當(dāng)滅菌劑以氣態(tài)或蒸汽狀態(tài)存在時，它的濃度可以通過化學(xué)指示劑、光譜方法或電子傳感器檢測。滅菌劑分布情況也可以使用化學(xué)指示劑測量。

采用滅菌劑在氣態(tài)或蒸汽的狀態(tài)下進(jìn)行滅菌時，要求隔離器內(nèi)部使用風(fēng)機(jī)來均勻分布滅菌劑。風(fēng)機(jī)的位置和方向可以進(jìn)行調(diào)節(jié)以保證適宜的氣流分布。由于架子、設(shè)備、手套、袖子裝置和半身衣等能夠影響氣流分配模式，必須對隔離器滿載狀態(tài)下的氣流分布進(jìn)行檢測；對物品的擺放情況進(jìn)行詳細(xì)描述并以書面形式記錄。圖2就是OQ末期滿載狀態(tài)下對isolator進(jìn)行滅菌檢測的情況。

圖2 在OQ過程中對隔離器進(jìn)行滅菌檢測的狀況

有時使用較小的傳遞隔離器作為便攜式表面滅菌器，待驗(yàn)物品和輔助用具通過傳遞倉進(jìn)入隔離器之前，這些物品和用具在便攜式表面隔離器中進(jìn)行化學(xué)滅菌。在OQ過程中，應(yīng)制定出便攜式表面滅菌器中物品和用具的擺放情況，審核擺放圖并記錄在OQ上。應(yīng)該注意：化學(xué)滅菌劑作用在設(shè)備表面，因此，一些被遮蓋的設(shè)備表面能夠殘留微生物并存活。

當(dāng)達(dá)到殺菌劑作用時間后，可以使用通過除菌裝置的新鮮空氣或其他方式處理過的新鮮空氣將殺菌劑從隔離器中移走。通過一個向外開放的通道，氣體通過排風(fēng)口排入大氣；或者通過一個密閉的通道，在通道中使用一個殺菌裝置移走并破壞滅菌劑。如果使用一個向外開放的排風(fēng)通道，排放系統(tǒng)的氣流和安全性應(yīng)當(dāng)被檢測。

滅菌周期的研究—當(dāng)OQ完成后，進(jìn)行滅菌周期的研究以便建立日常滅菌控制過程必要的參數(shù)。一些普遍使用在工業(yè)中的無菌工藝驗(yàn)證的方法是可行的，例如：控制生物負(fù)荷量和過度殺滅法。滅菌工藝應(yīng)該進(jìn)行生物指示劑挑戰(zhàn)試驗(yàn)。生物指示劑的孢子數(shù)和耐熱性是已知的。應(yīng)該盡量獲得生物指示劑真實(shí)的D值，從生物指示劑供應(yīng)商處獲得D值是可以接受的。如果不可能獲得準(zhǔn)確的D值，同時無法獲得滅菌劑濃度時，可以使用半滅菌周期的方法對滅菌周期進(jìn)行研究和確認(rèn)。

5.3 性能確認(rèn)（PQ）

性能確認(rèn)（PQ）是核實(shí)隔離器系統(tǒng)的功能是否符合操作者的要求。PQ過程完成后，如果可能的話，滅菌周期的有效性和排出口的滅菌劑應(yīng)該被檢測。所有的PQ過程的數(shù)據(jù)應(yīng)該被統(tǒng)計(jì)，分析和存檔。

清潔確認(rèn)—在通常情況下，對于無菌檢驗(yàn)來說，清潔不是關(guān)鍵的，但是，殘留的產(chǎn)品可能會對檢驗(yàn)有影響，有殺菌效果產(chǎn)品的殘留對檢驗(yàn)結(jié)果的影響尤其顯著，在檢測低水平污染時，這些殘留的物質(zhì)會對檢測產(chǎn)生影響。由于粉末容易擴(kuò)散，殺菌性粉末產(chǎn)品的殘留對檢驗(yàn)結(jié)果的影響是重要的。對于無菌檢驗(yàn)隔離器系統(tǒng)和操作者的要求來說，沒有肉眼可見污染這種清洗水平是合適的。清潔方法、周期、設(shè)備和清潔隔離器中所用的材料應(yīng)該記錄在文件中。

無菌驗(yàn)證—隔離器內(nèi)表面、隔離器內(nèi)的設(shè)備、拿進(jìn)隔離器的各種物料都應(yīng)當(dāng)去除微生物。隔離器表面、無菌檢驗(yàn)設(shè)備、檢驗(yàn)物品的滅菌和產(chǎn)品接觸部位或者產(chǎn)品藥物成分接觸部位的滅菌是不同的。隔離器滅菌可以用過度滅菌的log降低值來評估。如果超過滅菌周期，無菌保證水平不再被確定。隔離器滅菌操作完成之后，通過空氣過濾系統(tǒng)的維持，良好的物品傳遞技術(shù)的采用，更重要的是，經(jīng)過無菌處理的隔離器手套完整性的保持，隔離器的無菌性可以被保證。

通過陰性分?jǐn)?shù)法或者過度殺滅法可以證實(shí)用于隔離器、試驗(yàn)物品、無菌檢驗(yàn)用設(shè)備的滅菌方法可以使某種合適的、高抗性的生物指示劑來證實(shí)。過度殺滅分析法應(yīng)該采用每單位104孢子數(shù)的生物指示劑，而陰性分?jǐn)?shù)法應(yīng)該采用每單位孢子數(shù)大于等于105的生物指示劑。使用足夠數(shù)量的生物指示劑進(jìn)行試驗(yàn)可以從統(tǒng)計(jì)學(xué)上證明滅菌效果是可以再現(xiàn)的以及滅菌劑的分布是合適的。隔離器內(nèi)設(shè)備和物品滿載時，需要用更多的指示劑進(jìn)行試驗(yàn)。因此，沒有一個或者更多的足夠量的傳感器來測量殺菌劑的濃度時，增加生物指示劑的放置是可以考慮的。在連續(xù)三次滅菌試驗(yàn)中，六個log降的殺菌能力試驗(yàn)結(jié)果可以證明滅菌有效性。

操作者應(yīng)該建立隔離器再次滅菌的周期。這個周期可以是短短的幾天，也可以是幾周的時間，建立的依據(jù)是隔離器系統(tǒng)的無菌保持能力。

6 物料包裝完整性確認(rèn)

一些材料對殺菌劑有影響，這些材料能抑制微生物的生長。我們關(guān)注的是殺菌劑在產(chǎn)品包裝上的穿透能力，在一些輔助設(shè)施，例如：過濾裝置和管道的穿透力、在一些能夠和產(chǎn)品、培養(yǎng)基、無菌試驗(yàn)的稀釋劑接觸的材料上的穿透力。在滅菌過程中，操作者有責(zé)任核實(shí)包裝物、培養(yǎng)基、輔助物品在被批準(zhǔn)使用的滅菌過程中沒有受到影響。帶旋轉(zhuǎn)帽的管狀容器、膠塞密封的小瓶、卷曲的褶皺已經(jīng)被證明能夠降低殺菌劑的穿透力。金屬箔包裝并且密封的容器能夠防止殺菌劑的進(jìn)入；然而，這些情況也能夠?qū)е乱恍┍砻娌槐粶缇?/p>

在多數(shù)情況下，在進(jìn)行無菌檢驗(yàn)之前，操作者使用殺菌劑處理產(chǎn)品包裝表面來減少進(jìn)入隔離器物品的生物負(fù)荷量。操作者有責(zé)任通過驗(yàn)證證明：使用殺菌劑處理產(chǎn)品包裝這個過程，存在于產(chǎn)品內(nèi)部的低水平的微生物污染沒有受到殺菌劑的影響，不會影響到檢驗(yàn)的檢出限度。建議用化學(xué)和微生物試驗(yàn)來檢測包裝物對污染的抵制能力。經(jīng)過隔離器全部的滅菌過程后，殺菌劑對于細(xì)菌和真菌的抑制情況的驗(yàn)證需要進(jìn)行。對于醫(yī)療裝置的包裝、藥品的包裝和密封系統(tǒng)包裝的要求都是一致的。

驗(yàn)證研究可以確定，不論無菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基還是環(huán)境控制用的培養(yǎng)基，是否符合在無菌檢驗(yàn)時的需氧菌、厭氧菌、真菌的生長促進(jìn)試驗(yàn)。

7 隔離器內(nèi)部無菌環(huán)境的維持

在一個無菌周期內(nèi)，隔離器系統(tǒng)保持內(nèi)部環(huán)境無菌的能力必須被驗(yàn)證。隔離器系統(tǒng)出現(xiàn)故障或者隔離器內(nèi)部的偶然污染情況下的微生物必須被檢測。微生物檢測通常包括一個例行的取樣程序，它可以包括這樣的時間點(diǎn)，例如：滅菌后的第一天和無菌保持期的最后一天。驗(yàn)證方法：就是放置在隔離器中的培養(yǎng)基被證明是無菌的。

隔離器內(nèi)部可以使用接觸碟監(jiān)控規(guī)則表面，或者使用棉簽擦拭監(jiān)控不規(guī)則表面。然而，因?yàn)榕囵B(yǎng)基殘留會使隔離器產(chǎn)生染菌的風(fēng)險，因此，這些檢測最好在檢測周期快結(jié)束時進(jìn)行。如果環(huán)境監(jiān)控和檢測同時進(jìn)行，而且有培養(yǎng)基殘留，要細(xì)心地從隔離器內(nèi)部清理干凈?？諝馊雍统两稻鷻z測可以使用，但它們在檢測隔離器內(nèi)部非常低水平的污染時不是很靈敏。

最可能污染的途徑是檢驗(yàn)用具和樣品進(jìn)入隔離器的過程。驗(yàn)證所有進(jìn)入隔離器內(nèi)部的物品是無菌的是關(guān)鍵的，也應(yīng)當(dāng)定期檢查墊圈，確保其完整，避免微生物的進(jìn)入。手套和半身衣是另一個可能產(chǎn)生污染的來源。因?yàn)椴僮髡叽髦痔滋幚頍o菌檢驗(yàn)物品，所以手套是應(yīng)當(dāng)特別關(guān)注的，手套上微小的破損很難檢查出來，手套在使用時，在拉伸情況下，手套上微小的破損可以體現(xiàn)出來。特別注意：培養(yǎng)基接觸法檢測手指菌落的方法，在檢測低水平的污染時靈敏度是不足的。用0.1%的蛋白胨水溶液浸泡手套，將溶液過濾，然后將濾膜放在生長培養(yǎng)基碟子上檢測，這個方法可以檢測出其他方法檢測不出的泄露。

隔離器內(nèi)部進(jìn)行連續(xù)的塵埃粒子檢測是理想情況，這樣可以快速檢測到過濾器的泄露。第二個選擇是使用便攜式的塵埃粒子檢測器進(jìn)行周期檢測。塵埃粒子檢測取樣不能對隔離器內(nèi)部的無菌環(huán)境產(chǎn)生風(fēng)險。

8 無菌檢測結(jié)果的解釋

如果人員沒有直接接觸工作區(qū)，驗(yàn)證過的傳輸通道沒有破損，隔離器內(nèi)部微生物被殺死并有一個高的無菌保證水平，那么，無菌檢驗(yàn)中的假陽性是很難出現(xiàn)的。然而，隔離器是一種機(jī)械裝置，好的無菌操作技術(shù)仍然是必須的。如果出現(xiàn)陽性結(jié)果，只有根據(jù)USP<71>《無菌檢驗(yàn)檢測和調(diào)查》進(jìn)行徹底調(diào)查，才能得出陽性結(jié)果無效這樣的結(jié)論。

9 人員培訓(xùn)和安全要求

因?yàn)闊o菌檢驗(yàn)操作在潔凈室進(jìn)行，需要對操作者進(jìn)行關(guān)于隔離器專門程序培訓(xùn)。所有的培訓(xùn)記錄和操作者操作的評估應(yīng)有一個單獨(dú)的記錄并且存檔。對所有進(jìn)行操作或者維護(hù)隔離器的人員進(jìn)行必要的安全培訓(xùn)是必須的。

人員使用殺菌劑的安全性必須被評估。使用殺菌劑的最近區(qū)域，應(yīng)該保存原材料的安全數(shù)據(jù)或者一個類似安全數(shù)據(jù)文件供使用參考。貯藏和安全方面的預(yù)防措施應(yīng)當(dāng)符合規(guī)定。在隔離器使用之前，應(yīng)該對隔離器和所有連接的通道安全進(jìn)行檢查。

[1] USP<1208>《Sterility Testing—Validation of Isolator Systems》.

[2] USP<1116> 《Microbiological evaluation of clean rooms and other Environments》.

[3] UK《 Isolators for the aseptic preparation of Pharmaceuticals》.

[4] PIC/S recommendations to the inspectors for《Isolators used for aseptic processing and sterility testing》.

[5] PDA TR 34《Design and Validation of Isolator Systems for the manufacturing and testing of Health care Products》.