李瑞娟 于建壘 宋國春 馬 惠

(1 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植保所,濟(jì)南,250100;2 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究中心,濟(jì)南,250100)

作為新型廣譜殺菌劑,國外對吡唑醚菌酯在水果、蔬菜及糧食作物中的殘留分析已有大量報(bào)道[1—6],Abdel-Baky等[2]的前處理方法主要是使用甲醇和水提取,C18柱及中性硅膠柱凈化,高效液相色譜或液相色譜-質(zhì)譜檢測,這些方法操作較為復(fù)雜.國內(nèi)尚未見有關(guān)吡唑醚菌酯殘留測定的報(bào)道.

本研究建立了一種前處理更加簡便的高效液相色譜檢測葡萄和土壤中吡唑醚菌酯含量的方法,并對其在葡萄和土壤中的殘留動(dòng)態(tài)和最終殘留進(jìn)行了研究.

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 小區(qū)試驗(yàn)

農(nóng)藥為60%唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑(5%吡唑醚菌酯+55%代森聯(lián),巴斯夫歐洲公司),推薦使用為600mg(a.i.)?kg-1,試驗(yàn)設(shè)空白對照區(qū)、低濃度試驗(yàn)區(qū)、高濃度試驗(yàn)區(qū)和消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)區(qū).

消解試驗(yàn) 分別于 2007年 5月 27日山東省濟(jì)南市,2007年 5月 25日浙江省杭州市進(jìn)行試驗(yàn).采用一次施藥多次采樣的方法.在供試的葡萄園中,設(shè) 3個(gè)施藥處理區(qū)和 1個(gè)不施藥的對照區(qū),小區(qū)面積10m2.葡萄長到成熟個(gè)體一半大小時(shí),用1200 mg(a.i.)?kg-1的唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑對植株均勻噴霧,噴藥后 2h、1、3、5、7、14、21、28、42d取樣,經(jīng)縮分后,-20℃保存,待測.

最終殘留試驗(yàn) 分別于 2007年 5月 27日山東省濟(jì)南市,2007年 5月 25日浙江省杭州市進(jìn)行試驗(yàn).60%唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑600、900mg(a.i.)?kg-1,分3、4次噴藥,加空白對照,5個(gè)處理,3次重復(fù),共 15個(gè)小區(qū),小區(qū)面積 30m2.于葡萄膨大期開始噴藥,每隔7d施藥一次,共施藥3—4次.對植株均勻噴霧.距最后一次施藥7d、14d、21d各取樣一次,經(jīng)縮分后,-20℃保存,待測.

1.2 分析方法

稱取切碎的葡萄(土)樣品20g于250m l碘瓶中,加80ml二氯甲烷,超聲提取15m in,將提取液經(jīng)無水硫酸鈉過濾,濾渣加 60ml二氯甲烷超聲提取 2次,每次15min,合并濾液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(30℃)減壓濃縮至近干,吹干.過SPE C18柱,用乙腈∶水=70∶30(V/V)定容至10m l,HPLC分析.

高效液相色譜條件：LC-20AT液相色譜儀;檢測器：SPD-20A紫外吸收檢測器,n=278nm;柱溫：室溫;進(jìn)樣量：20μl;色譜柱：VP-ODSC18柱,250mm×4.6mm不銹鋼柱;流動(dòng)相：乙腈∶水= 70∶30(V/V);流速：0.8ml?min-1.

2 結(jié)果與討論

2.1 實(shí)驗(yàn)方法的精密度、準(zhǔn)確度和相關(guān)性

以甲醇為溶劑,配制吡唑醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)系列溶度,濃度分別為 0.01、0.02、0.1、0.2、1、2、5 μg?m l-1,各進(jìn)樣20μl.測定結(jié)果顯示,液相色譜峰面積Y與吡唑醚菌酯濃度X呈線性正相關(guān)(p＜0.001),其校準(zhǔn)曲線方程為Y=5953.7X-9406.9,相關(guān)系數(shù)為0.9986.

在不含吡唑醚菌酯的葡萄及土壤中分別添加0.01、1和2mg?kg-1的吡唑醚菌酯,每個(gè)加標(biāo)量平行測定5次,計(jì)算加標(biāo)回收率和變異系數(shù)(表1).表1顯示,試樣中的添加量為0.01—2mg?kg-1,葡萄及土壤中的加標(biāo)回收率分別為80.4%—94.1%和81.8%—98.4%,變異系數(shù)為1.8%—3.8%和2.6%—3.0%.表明本方法的準(zhǔn)確性、再現(xiàn)性可以滿足痕量吡唑醚菌酯檢測的要求.

表1結(jié)果顯示,當(dāng)葡萄中吡唑醚菌酯添加量為0.01μg?ml-1,加標(biāo)回收率為83.5%,變異系數(shù)為3.8%,因此,吡唑醚菌酯在葡萄中的最低檢測濃度為0.01mg?kg-1.我國尚未規(guī)定吡唑醚菌酯在葡萄中最高殘留限量(MRL值),食品法典委員會規(guī)定MRL值為2.0mg?kg-1,本方法能滿足要求.

表1 空白葡萄、土壤添加吡唑醚菌酯的回收率和精密度Table 1 Recoveries and precision of pyraclostrobin in blank samp les of grape and soil

吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的色譜圖見圖 1,目標(biāo)峰與雜質(zhì)峰很好地分離.在上述色譜條件下,當(dāng)吡唑醚菌酯濃度低至0.01μg?m l-1,信噪比﹥3,吡唑醚菌酯的最小檢出量為2×10-10g.

圖1 吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的色譜圖Fig.1 Chromatogram of pyraclostrobin in grape and soil sample

2.2 60%唑醚?代森聯(lián)水分散性粒劑中吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的消解動(dòng)態(tài)

吡唑醚菌酯在葡萄中的消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)結(jié)果如表 2所示.由表 2可見,吡唑醚菌酯在葡萄中于 0—7d消解較快,隨后逐漸趨緩.在葡萄中的消解率于 14d均達(dá)到了91.8%以上,其在葡萄中的消解動(dòng)態(tài)方程分別為：C=0.1908e-0.1895t,r=-0.9975,t1/2=3.7d(山東省);C=0.1919e-0.1845t, r=-0.9940,t1/2=3.8d(浙江省).吡唑醚菌酯在土壤中于0—14d消解較快,隨后逐漸趨緩.在土壤中的消解率于42d均達(dá)到了 92.2%以上,其在土壤中的消解動(dòng)態(tài)方程分別為：C=0.7757e-0.0801t, r=-0.9715,t1/2=8.7d(山東省);C=0.1908e-0.1895t,r=-0.9872,t1/2=10.2d(浙江省).

表2 60%唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑中吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)結(jié)果Tab le 2 Degradation dynam ics of pyraclostrobin in grape and soil

2.3 60%唑醚?代森聯(lián)水分散性粒劑中吡唑醚菌酯在葡萄中的最終殘留量

在葡萄膨大期,60%唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑按600mg(a.i.)?kg-1和900mg(a.i.)?kg-1兌水噴霧,施藥次數(shù)最多4次,每次間隔 7d,最后一次施藥后 7、14、21d采摘葡萄.試驗(yàn)結(jié)果見表3.

表3 60%唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑中吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中最終殘留試驗(yàn)Tab le 3 The final residues of pyraclostrobin in grape and soil

表 3可見,吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的最終殘留量,隨不同劑量、不同施藥次數(shù)和距收期而異.吡唑醚菌酯在土壤中的殘留量為0.0206—0.6935mg?kg-1(山東省)和0.0142—0.7245 mg?kg-1(浙江省).低劑量處理中 3次藥后吡唑醚菌酯在葡萄中的殘留量均未檢出;4次藥后 7d殘留量吡唑醚菌酯為0.0168—0.0241mg?kg-1,藥后14d、21d未檢出.高劑量處理中3次藥后7d、14d吡唑醚菌酯在葡萄中殘留量為0.0142—0.1165mg?kg-1,藥后21d未檢出;4次藥后7d、14d、21d吡唑醚菌酯殘留量為0.0213—0.1886mg?kg-1.對照區(qū)均未檢出.檢出樣品的殘留量均低于MRL值.

3 結(jié)論

固相萃取-反相高效液相色譜檢測葡萄和土壤中吡唑醚菌酯的殘留,其最小檢出量為 2×10-10g,最低檢測濃度為0.01mg?kg-1,在0.01—5μg?ml-1呈很好的線性關(guān)系.60%唑醚?代森聯(lián)水分散粒劑900mg(a.i.)?kg-1,吡唑醚菌酯在葡萄上的半衰期為3.7—3.8d,屬于易降解農(nóng)藥.噴藥后7d、14d、21d,葡萄中吡唑醚菌酯殘留量為0.0168—0.1886 mg?kg-1,均未超過2.0mg?kg-1.

[1] Abdel-Baky S,Analysis of BAS 500F Residue in Coffee and Soybeans after Treatment with BAS51200F in Brazil.2001.BASF 2001/ 5002345

[2] Abdel-Baky S,Analysisof BAS 500F in Plant Matrices in Brazil.BASF2000/5276

[3] Beck J,Study on the Residue Behaviour of BAS 500F and BAS 510F in Lettuce after Treatmentwith BAS 516GA F under Field Conditions in Germany;France;the Netherlands and Spain.2001,2000 BASF 2001/1000999

[4] FAO,Pesticide Residues in Food-Report 2004,2004.FAO Plant Protection and Production Paper FAO,178

[5] FAO,Pesticide Residue in Food,Evalutions 2004,2005.Plant Production and Protection Paper,1007—1118

[6] Schulz H,Determination of the Residuesof BAS 500Fand BAS 510F in Apples Following Treatmentwith BAS 51601Funder Field Conditions in Italy and France.2001,BASF 2001/1000946