孫夫強 段 洋 王 林

新生兒持續(xù)性肺動脈高壓（persistent pulmonary hypertension of the newborn，PPHN）又稱持續(xù)胎兒循環(huán)，是一種威脅新生兒生命的疾病，發(fā)病率約為0.19%[1]。臨床研究一直在尋找一種僅擴張肺血管而不影響體循環(huán)血壓的治療方法。自20世紀(jì)90年代初吸入一氧化氮（inhaled NO,iNO）首次被成功應(yīng)用于新生兒PPHN治療以來，其臨床應(yīng)用和相關(guān)的基礎(chǔ)研究也取得了長足的進(jìn)步。

1 PPHN發(fā)病機制

肺血管張力通過肺內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的血管收縮物質(zhì)（內(nèi)皮素-1、血栓素-A2及5-羥色胺）和血管擴張物質(zhì)（前列環(huán)素及NO）來調(diào)節(jié)平衡。急性缺氧時體循環(huán)末梢血管擴張，而肺血管收縮。若遇環(huán)境應(yīng)激（如長時間缺氧）或內(nèi)皮素功能障礙，肺血管舒張和血管收縮物質(zhì)的平衡會被破壞，從而引起肺血管收縮。動物模型已經(jīng)證實一氧化氮-環(huán)鳥苷一磷酸（cGMP）、前列環(huán)素-環(huán)腺苷一磷酸(cAMP)和內(nèi)皮信號途徑在PPHN血管異常中起著重要的作用[2]。PPHN可以引起持續(xù)性肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞（PAEC）損傷，抑制PAEC和血管生長，并下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和內(nèi)源性NO合酶蛋白，而VEGF和NO能促進(jìn)PPHN的肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞生長和血管生成[3]。生后幾天內(nèi)源性NO合成受限及內(nèi)皮素-1水平升高可導(dǎo)致新生兒肺動脈高壓，因內(nèi)源性NO不但擴張血管，還能穩(wěn)定新生兒的肺循環(huán)。

2 NO選擇性擴張肺血管機制

NO是NO合酶催化L-精氨酸成胍氨酸過程中由肺內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的，在血管平滑肌發(fā)揮作用，能促進(jìn)鳥苷酸環(huán)化酶活性，并增加cGMP水平，然后通過鈣活化的鉀離子通道引起血管擴張。iNO可以代替缺乏的內(nèi)源性NO。NO由氣道吸入后通過肺泡壁進(jìn)入肺毛細(xì)血管平滑肌細(xì)胞，激活可溶性鳥苷酸環(huán)化酶（sGC）和cGMP產(chǎn)物，從而使肺泡血管平滑肌松弛并改善肺泡通氣/血流比[4]。NO信號傳遞的經(jīng)典途徑是：活化的sGC使cGMP增加，進(jìn)而阻止肌漿網(wǎng)的Ca2+釋放，最終使平滑肌、血管擴張。NO的其他信號傳遞途徑包括：NO氧化成亞硝酸鹽或NO與硫蛋白反應(yīng)形成S-亞硝基硫醇（SNOs）。NO衍生物亦能起血管舒張劑或蛋白翻譯后修飾因子的作用。游離NO最重要的清除劑之一是血紅蛋白（Hb），NO進(jìn)入血流后立即與Hb的血紅素環(huán)結(jié)合失活，形成亞硝酰血紅蛋白，再經(jīng)氧化迅速轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞F血紅蛋白（methemoglobin，metHgb），在紅細(xì)胞內(nèi)metHgb還原酶的作用下，形成亞鐵血紅蛋白和硝酸鹽、亞硝酸鹽，后兩者主要通過尿液排泄，少量通過唾液和腸道排泄。

3 iNO治療PPHN動物實驗

PPHN的主要治療方法是選擇性擴張肺血管。當(dāng)NO以氣體形式經(jīng)呼吸道吸入后能舒張肺血管平滑肌，而進(jìn)入血液的NO很快被滅活，使體循環(huán)血管不受影響。iNO的臨床實踐證明：它能選擇性降低肺動脈壓，能改善通氣/血流比值[5]。動物實驗中iNO能提高氣體交換和促進(jìn)肺結(jié)構(gòu)發(fā)育[6]。Kusuda等[7]研究表明在肺高壓動物模型中，即使在肺表面活性物質(zhì)缺乏時NO也是一種有效的肺動脈血管擴張劑。Porta等[8]通過研究羊肺動脈高壓模型發(fā)現(xiàn)：口服或霧化吸入西地那非可擴張肺血管，作用與iNO相同，而當(dāng)兩者聯(lián)合應(yīng)用能更大程度地降低肺血管阻力，這為臨床治療PPHN提供了更多可供選擇的方法。

4 iNO治療的臨床應(yīng)用

4.1 足月新生兒PPHN Chotigeat等[9]認(rèn)為iNO應(yīng)盡早用于有呼吸衰竭的PPHN新生兒，能提高生存率而沒有明顯的短期不良反應(yīng)。14個隨機對照研究的Meta分析表明iNO能減少體外膜肺（ECMO）應(yīng)用，改善缺氧性呼吸衰竭足月和近足月新生兒血氧飽和度[10]。對于無ECMO應(yīng)用指征的PPHN患兒,越早應(yīng)用iNO治療，住院時間可能越短[11]。一項多中心的回顧性研究表明應(yīng)用靜脈注射硫酸鎂與iNO治療中度PPHN相比較都是有效的，短期及長期并發(fā)癥無明顯差異，但是iNO治療的氧合指數(shù)改善更快[12]。iNO治療PPHN能更快提高全身氧合，避免過度低碳酸血癥，并可能降低腦干誘發(fā)電位異常及神經(jīng)發(fā)育異常的危險[13]。但Hosono等[14]認(rèn)為iNO治療PPHN并沒有明顯減少機械通氣及吸氧支持治療的持續(xù)時間。高頻機械通氣（high-frequencey ventilation,HFV）聯(lián)合iNO治療比單獨使用其中一種療法能更好地改善動脈氧合，減少ECMO的需求[15]。Dobyns等[16]推測HFV能提高小劑量iNO的氣體交換效果。因為肺泡開放越多，到達(dá)血管平滑肌細(xì)胞通路上的NO越多，從而導(dǎo)致肺血流量增加，氧合作用改善。另外，Ambalavanan等[17]發(fā)現(xiàn)利用特殊的氧罩吸入NO也可行有效，且無明顯不良反應(yīng)，但尚需要更大樣本的隨機對照試驗來證實它的效果及是否適用于足月新生兒。

4.2 早產(chǎn)兒PPHN 目前，iNO治療也應(yīng)用于由PPHN引起低氧呼吸衰竭的早產(chǎn)兒（胎齡＜34周），但仍有爭議。低劑量iNO能降低出生體質(zhì)量1 000 g以上早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良的發(fā)生率，1 000 g以下患兒吸入NO組與安慰劑組無明顯差異，但能降低所有早產(chǎn)兒發(fā)生腦損傷風(fēng)險[18]。Tanaka等[19]回顧性比較iNO與吸入100%氧治療的低氧性呼吸衰竭早產(chǎn)兒，結(jié)果表明接受iNO治療早產(chǎn)兒腦癱發(fā)病率為12.5%,而吸入100%氧治療者腦癱發(fā)病率為46.7%，iNO治療能降低患PPHN早產(chǎn)兒發(fā)生腦癱危險性。在對母親分娩時發(fā)熱、出生體質(zhì)量、阿氏5 min評分、高頻振蕩通氣及肺表面活性物質(zhì)治療進(jìn)行配對后，iNO較吸入100%氧治療者腦癱發(fā)生率更低。但 Van Meurs等[20]證實出生體質(zhì)量 401～1 500 g，420 例患兒iNO治療后病死率及支氣管肺發(fā)育不良的發(fā)生率并沒有降低。Field等[21]認(rèn)為早產(chǎn)兒iNO的短期效果不肯定，盡管氧合明顯改善，但病死率仍很高，存活者中神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥發(fā)生率也很高，而且iNO早產(chǎn)兒可能機械通氣和住院時間更長，因此有極嚴(yán)重呼吸衰竭的早產(chǎn)兒不推薦行iNO治療。

5 iNO使用劑量及療效評價

5.1 使用劑量 目前尚無明確使用劑量標(biāo)準(zhǔn)。Roberts等[22]研究發(fā)現(xiàn)短時間內(nèi)（30 min）吸入80 ppm（parts per million,1×10-6）NO，能提高PPHN患兒血氧飽和度及氧分壓，且并不引起血壓降低，但逐漸減少iNO濃度后，只有1例患兒血氧飽和度維持正常水平，其余患兒再次出現(xiàn)低氧血癥。Davidson等[23]對低氧呼吸衰竭的足月新生兒吸入不同劑量NO效果進(jìn)行隨機對照研究，患兒分別隨機接受0（安慰劑）、5、20、80 ppm NO治療后，不同劑量間氧飽和度提高并沒有明顯差別，但是吸入劑量80 ppm組的37例患兒中有13例（35%）發(fā)生metHgb（血中水平＞7%），7例（19%）二氧化氮（NO2）濃度＞3 ppm，因此得出結(jié)論：iNO劑量80 ppm并不比5或20 ppm更有效，但是不良反應(yīng)卻更明顯。Clark等[24]對248例PPHN患兒（胎齡＞34周）進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)NO的吸入濃度為20 ppm時，需要進(jìn)行ECMO治療的危險性降低，慢性肺疾病發(fā)生減少。Finer等[25]研究則表明初始劑量20 ppm應(yīng)用30～60 min后，iNO 劑量減至 1～2 ppm，與大劑量（10～20 ppm）相比，動脈氧分壓升高和氧合指數(shù)降低沒有明顯差別，而且小劑量可以減少不良反應(yīng)發(fā)生。

5.2 療效評價參數(shù) 目前最常用來評價iNO療效的參數(shù)為肺泡-動脈氧分壓差（A－aDO2）、氧合指數(shù)（oxygenation index，OI）以及動脈血氧分壓/肺泡氧分壓（a/AO2）。Hwang 等[26]研究認(rèn)為，應(yīng)用iNO治療后OI降低20%或?qū)Ч芮昂笱醴謮翰町愊?，則為治療有效，但并不是對所有PPHN患兒均敏感，還與導(dǎo)致PPHN的原發(fā)病有關(guān)，比如對原發(fā)病為胎糞吸入或呼吸窘迫的患兒的治療效果要好于患先天膈疝或敗血癥者；在開始治療時OI值越低的患兒iNO療效越好，大多數(shù)患兒在iNO治療1 h內(nèi)顯效。其他監(jiān)測指標(biāo)包括血壓、經(jīng)皮血氧飽和度及血氣分析，有條件時可監(jiān)測中心靜脈壓、肺動脈壓及心輸出量。另外可用超聲確定肺外分流改善、肺動脈壓的下降等作為臨床治療是否有效的依據(jù)。

5.3 iNO撤離時機 關(guān)于iNO撤離目前尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。有些患兒停NO后可能會出現(xiàn)血氧飽和度下降和缺氧反彈，多發(fā)生于停用NO時肺動脈壓仍然較高者，這種反彈可能是因為iNO或cGMP途徑改變而導(dǎo)致內(nèi)源性NO產(chǎn)物受抑。Kinsella等[27]認(rèn)為一旦吸氧濃度（FiO2）為0.5,血氧飽和度達(dá)最佳水平（超過95%）3 h，iNO需開始以每30 min 5 ppm的速度慢慢遞減,可減輕NO這種反跳效應(yīng)。但Ferreira等[28]認(rèn)為當(dāng)患兒適應(yīng)以下呼吸參數(shù):呼氣末壓（PEEP）≤0．58 kPa，吸∶呼（I∶E）=1∶2,FiO2≤0.8,可間斷減量,直至 PaO2≤0.49 kPa，即可完全停掉NO而不引起反跳。Namachivayam等[29]則認(rèn)為昔多芬及米力農(nóng)能增強吸入NO效應(yīng)，并能阻止肺血管收縮以及撤離NO時PPHN反彈。

5.4 iNO不良反應(yīng) 目前研究認(rèn)為iNO不良反應(yīng)有2個方面：一是對肺組織的直接毒性，包括肺組織損傷和水腫，因為在有氧條件下，NO可氧化成對肺組織有損傷作用的NO2和N3O4；二是吸入高濃度的NO易發(fā)生metHgb血癥，對紅細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生間接毒性作用。Salquero等[30]研究表明：iNO小時累積量能預(yù)測metHgb水平，一旦應(yīng)用iNO就應(yīng)當(dāng)監(jiān)測metHgb水平，避免metHgb血癥的發(fā)生。iNO的其他不良反應(yīng)包括因抑制血小板聚集而引起的出血、過氧亞硝酸鹽形成及其對DNA的影響等。

綜上，NO是一種有效的選擇性肺血管擴張劑，對危重PPHN患兒的臨床治療是極其有益的。但是NO吸入的最低有效濃度、療程及治療PPHN的近期及遠(yuǎn)期效果有待于進(jìn)一步研究確定。

[1] Greenough A,Khetriwal B.Pulmonary hypertension in the newborn[J].Pediatr Respir Rev,2005,6(2):111-116.

[2] Farrow KN,Fliman P,Steinhorn RH.The diseases treated with ECMO:focus on PPHN[J].Semin Perinatol,2005,29(1):8-14.

[3] Gien J,Seedorf GJ,Balasubramaniam V,et al.Intrauterine pulmonary hypertension impairs angiogenesis in vitro.Role of vascular endothelial growth facotr-nitric oxide signaling[J].Am J Respir Crit Care Med,2007,176(11):1146-1153.

[4] Dakshinamurti S.Pathophysiologic mechanisms of persistent pulmonary hypertension of the newborn[J].Pediatr Pulmonol,2005,39(6):492-503.

[5] 金漢珍，黃德珉，官希吉.實用新生兒學(xué)[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：477.

[6] McCurnin DC,Pierce RA,Chang LY,et al.Inhaled NO improves early pulmonary function and modifies lung growth and elastin deposition in a baboon model of neonaal chronic lung disease[J].Am J Physiol Lung Cell Mol physiol,2005,288(3):450-459.

[7] Kusuda S,Kim TJ,Koriyama T,et al.Contribution of pulmonary sur-factant with inhaled nitric oxide for treatment of pulmonary hypertension[J].Pediatr Int,2006,48(5):459-463.

[8]Porta NF,Steinhom RH.Inhaled NO in the experimental setting[J].Early Hum Dev,2008,84(11):717-723.

[9]Chotigeat U,Khorana M,Kanjanapattanakul W.Inhaled nitric oxide in newborns with severe hypoxic respiratory failure[J].J Med Assoc Thai,2007,90(2):266-271.

[10]Finer NN,Barrinqton KJ.Nitric oxide for respiratory failure in infant born at or near term[J].Cochrane Database Syst Rev,2006,18(4):CD000399.

[11]Lowe CG,Trautwein JG.Inhaled nitric oxide therapy during the transport of neonates with persistent pulmonary hypertension or severe hypoxic respiratory failure[J].Eur J Pediatr,2007,166(10):1025-1031.

[12]Raimondi F,Migliaro F,Capasso L,et al.Intravenous magnesium sulphate vs.inhaled nitric oxide for moderate,persistent pulmonary hypertension of the newborn.A multicentre,restrospective study[J].J Trop Pediatr,2008,54(3):196-199.

[13]Hintz SR,Vanmears KP,Perritt R,et al.Neuroderelopmental outcomes of premature infants with severe respiratory faicure enrolled in a randomized controlled triaced nitric oxile[J].Pediatrics,2007,15(11):16-22.

[14]Hosono S,Ohno T,Kimoto H,et al.Inhaled nitric oxide therapy might reduce the need for hyperventilation therapy in infants with persistent pulmonary hypertension of the newborn[J].J Perinat Med,2006,34(4):333-337.

[15]Coates EW,Kinepeter ME,O’Shea TM.Neonatal pulmonary hypertension treated with inhaled nitric oxide and high-frequency ventilation[J].J Perinatol,2008，28(10):657-659.

[16]Dobyns EL,Anas NG,Fortenberry JD,et al.Interactive effects of high-frequency oscillatory ventilation and inhaled nitric oxide in acute hypoxemic respiratory failure in pediatrics[J].Crit Care Med,2002,30(11):2425-2429.

[17]Ambalavanan N,El-Ferzli GT,Roane C,et al.Nitric oxide administration using an oxygen hood:a pilot trial[J].PloS One,2009,4(2):e4312.

[18]Kinsella JP,Cutter GR,Walsh WF,et al.Early inhaled nitric oxide therapy in premature newborns with respiratory failure[J].N Engl J Med,2006,355(4):354-364.

[19]Tanaka Y,Hayashi T,Kitajima H,et al.Inhaled nitric oxide therapy decreases the risk of cerebral palsy in preterm infants with persistent pulmonary hypertension of the newborn[J].Pediatrics,2007,119(6):1159-1164.

[20]Van Meurs KP,Wright LL,Ehrenkranz RA,et al.Inhaled nitric oxide for premature infants with severe respiratory failure[J].N Engl J Med,2005,353(1):13-22.

[21]Field D,Elbourne D,Truesdale A,et al.Neonatal ventilation with inhaled nitric oxide versus ventilatory support without inhaled nitric oxide for preterm infants with severe respiratory failure:the INNOVO multicentre randomised controlled trial(ISRC TN 17821339)[J].Pediatrics,2005,115(4):926-936.

[22]Roberts JD,Polancer DM,Lang P,et al.Inhaled nitric oxide in persistentpulmonary hypertension of the newborn[J].Lancet,1992,340（8823）:818-819

[23]Davidson D,Barefield ES,Kattwinkel J,et al.Inhaled nitric oxide for the early treatment of persistent pulmonary hypertension of the term newborn:arandomized,double-masked,placebo-controlled,dose-response,multicenter study[J].Pediatrics，1998，101(3 pt 1):325-334.

[24]Clark RH,Kueser TJ,Walker MW,et al.Low-dose nitric oxide therapy for persistent pulmonary hypertension of the newborn.Clinical inhaled nitric oxide research group[J].N Engl J Med,2000,342(7):469-474.

[25]Finer NN,Sun JW,Rich W,et al.Randomized,prospective study of low-dose versus high-dose inhaled nitric oxide in the neonate with hypoxic respiratory failure[J].Pediatrics,2001,108(4):949-55.

[26]Hwang SJ,Lee KH,Hwang JH,et al.Factors affecting the response to inhaled nitric oxide therapy in persistent pulmonary hypertension of the newborn infants[J].Yonsei Med J,2004,45(1):49-55.

[27]Kinsella JP,Abman SH.Clinical approach to inhaled nitric oxide therapy in the newborn with hypoxemia[J].J Pediatr,2000,136(6):717-726.

[28]Ferreira E,Bevilaceque E,Gagioti SM,et al.Nitric oxide for ARIS-what is the evidence[J]?Phann cotherapy,1999,19(1):60-69.

[29]Namachivayam P,Theilen U,Butt WW,et al.Sildenafil prevents rebound pulmonary hypertension after withdrawal of nitric oxide in children[J].Am J Respir Crit Care Med，2006，174(9):1042-1047.

[30]Salquero KL,Cummings JJ.Inhaled nitric oxide and methemoglobin in full-term infants with persistent pulmonary hypertension of the newborn[J].Pulm Pharmacol Ther,2002,15(1):1-5.