祁瀟哲，王 靜，周 催，許 超，車會蓮*

(中國農(nóng)業(yè)大學食品科學與營養(yǎng)工程學院，北京 100083)

較長期喂養(yǎng)轉人乳鐵蛋白全乳粉對SD大鼠血清鐵、鐵蛋白含量的影響

祁瀟哲，王 靜，周 催，許 超，車會蓮*

(中國農(nóng)業(yè)大學食品科學與營養(yǎng)工程學院，北京 100083)

目的：飼喂SD大鼠轉人乳鐵蛋白全乳粉90d，監(jiān)測其對大鼠營養(yǎng)狀況以及生理、血液生化指標的影響，從而評價轉人乳鐵蛋白全乳粉在較長期喂養(yǎng)實驗動物時對其血清鐵、血清鐵蛋白含量的影響。方法：參考中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準《轉基因植物及其產(chǎn)品食用安全檢測——大鼠 90天喂養(yǎng)實驗》(NY/T 1102—2006)進行。將140只SD大鼠按體質量隨機分為7組，每組20只，雌雄各半，分別為：常規(guī)飼料對照組，轉基因奶粉低、中、高劑量組和非轉基因奶粉低、中、高劑量組。90d后，觀察各組實驗動物體質量、食物利用率以及血生化指標。結果: 轉人乳鐵蛋白全乳粉經(jīng)過90d喂養(yǎng)實驗動物后，各組動物生長發(fā)育良好，含轉人乳鐵蛋白全乳粉與不含轉人乳鐵蛋白全乳粉組相比，大鼠的體質量與食物利用率、總進食量均無顯著差異(P≥0.05)，在較長期喂養(yǎng)過程中未觀察到含轉人乳鐵蛋白全乳粉對大鼠產(chǎn)生不良作用，含轉人乳鐵蛋白全乳粉可顯著增加血清鐵和鐵蛋白水平(P≤0.05)。結論：SD大鼠較長期食用轉人乳鐵蛋白全乳粉未出現(xiàn)安全問題，且可以提高實驗動物機體鐵的營養(yǎng)狀況。

轉人乳鐵蛋白全乳粉；血清鐵；血清鐵蛋白

轉基因食品逐漸走上了人們的餐桌，其安全性也成為了人們關注的焦點。到目前為止，國內(nèi)外對轉基因動物性食品安全性的研究并不多，我國目前還沒有對轉基因動物性食品進行安全性評價的標準。隨著現(xiàn)代轉基因技術的發(fā)展，轉基因動物性食品必將會同轉基因植物性食品一樣被人們所接受。

乳鐵蛋白存在于人體的乳汁、唾液、淚液、膽汁、血漿、黏膜以及生殖器的分泌物中[1]，它具有廣譜抗菌性、抗病毒活性[2]、抗氧化作用，能提高腸道細胞對鐵離子的吸收、調(diào)節(jié)機體免疫、調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系、保護腸道和抗感染的功能。目前大多數(shù)乳鐵蛋白相關的研究是以牛乳鐵蛋白作為研究對象，而有研究表明人乳鐵蛋白的受體不能結合牛乳鐵蛋白[3]。Lonnerdal等[4]的研究表明通過攝入人乳鐵蛋白能夠起到與補鐵同樣的作用，證明人乳鐵蛋白提供的鐵可以很好的被人吸收。

鐵作為人體必需營養(yǎng)素可以改變機體的氧化還原狀態(tài)[5]，促進T淋巴細胞的分化增殖能力[6]。人體缺鐵時，機體免疫力下降[7]。機體內(nèi)的鐵有一部分以鐵蛋白的形式儲備，血清鐵蛋白是反映體內(nèi)鐵貯備的一個特異性指標，通過測定人血清鐵蛋白含量，可估計體內(nèi)鐵貯量[6]。機體鐵貯備減少時血清鐵蛋白濃度也相應降低，兩者呈高度正相關[7]。

本研究通過動物實驗，研究SD大鼠較長期食用轉人乳鐵蛋白全乳粉后血清鐵和鐵蛋白的變化，擬通過該奶粉對機體血清鐵和鐵蛋白含量的影響，來推測其對機體鐵營養(yǎng)狀況的影響。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

含轉人乳鐵蛋白全乳粉[8](人乳鐵蛋白含量(13.03± 6.22)mg/g)，及其不含轉人乳鐵蛋白全乳粉 中國農(nóng)業(yè)大學生物學院研制并贈送；初斷乳SD大鼠、基礎飼料北京維通利華實驗動物技術有限公司。

大鼠血清鐵試劑盒、大鼠鐵蛋白試劑盒 上海麥莎生物科技有限公司。

7020型全自動生化分析儀 日本日立公司；MNT型組織切片機 美國Slee公司；MODEL BX51TF顯微鏡日本Olympus公司；JA1003電子天平 上海越平科學儀器有限公司；HEMAVET HV950FS血細胞計數(shù)儀 美國Drew Scientific 公司。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物

選取初斷乳SD大鼠[9]140只(140～160g)，適應性喂養(yǎng)3d后，將實驗動物按體質量隨機分成7組，每組20只，雌雄各半。

1.2.2 分組情況

空白對照組(C組)：飼喂基礎日糧；N1組：飼喂添加質量分數(shù)7.5%不含轉人乳鐵蛋白全乳粉的飼料；N2組：飼喂添加15%不含轉人乳鐵蛋白全乳粉的飼料；N3組：飼喂添加30%不含轉人乳鐵蛋白全乳粉的飼料；T1組：飼喂添加7.5%含轉人乳鐵蛋白全乳粉的飼料；T2組：飼喂添加15%含轉人乳鐵蛋白全乳粉的飼料；T3組：飼喂添加30%含轉人乳鐵蛋白全乳粉的飼料。

1.2.3 日糧組成

將兩種奶粉分別按照質量分數(shù)7.5%、15%和30%的比例添加到基礎飼料中，主要營養(yǎng)成分水平達到《實驗動物全價營養(yǎng)飼料》GB14924—2001水平，60Co輻射滅菌，使日糧達到清潔級。

1.2.4 飼養(yǎng)條件

同組同性別SD大鼠兩只一籠喂養(yǎng)，自由進食和飲水。SPF級環(huán)境，環(huán)境溫度21～25℃，相對濕度40%～60%。

1.2.5 指標檢測

1.2.5.1 外觀、體質量、進食量

每日觀察并記錄實驗動物的活動情況、生長發(fā)育、毛色、攝食及排泄情況，中毒癥狀、出現(xiàn)時間及死亡情況。每周記錄實驗動物進食量一次，每周測體質量一次，計算總進食量，總體質量增加與食物利用率。

1.2.5.2 血生化指標

在實驗開始后第45天和實驗開始后第90天，禁食12h后，內(nèi)眥采血，分離血清后應用如下方法測定鐵蛋白、鐵的生化指標。按試劑盒說明書操作。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS軟件的Dunnett方法對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，P≤0.05為顯著性差異。數(shù)據(jù)以平均值±標準差的形式表示[10-12]。

2 結果與分析

2.1 日常狀況

在90d的實驗周期中，各組實驗動物狀態(tài)良好，均未發(fā)現(xiàn)任何明顯的中毒癥狀，無死亡情況發(fā)生。

2.2 含轉人乳鐵蛋白全乳粉對實驗動物體質量與進食量的影響

表1 轉人乳鐵蛋白全乳粉對大鼠體質量與進食量的影響(末期，90d)Table 1 Effect of transferred human lactoferrin milk powder on rats weight and food intake at the late stage (90d)

由表1可知，添加含轉人乳鐵蛋白全乳粉(末期，90d)的各組實驗動物的體質量和進食量與空白對照組無顯著性差異(P≥0.05)；添加含轉人乳鐵蛋白全乳粉的各組實驗動物的體質量和進食量與添加同等劑量不含轉基因成分的奶粉組相比均無顯著性差異(P≥0.05)。

2.3 含轉人乳鐵蛋白全乳粉對大鼠血液生化指標的影響

表2 轉人乳鐵蛋白全乳粉對大鼠血生化指標的影響(中期，45d)Table 2 Effect of transferred human lactoferrin milk powder on rats blood biochemistry in the middle stage (45 d)

由表2可知，添加含轉人乳鐵蛋白全乳粉中期(45d)各組的血生化指標值與空白對照組無顯著性差異(P≥0.05)；添加含轉人乳鐵蛋白全乳粉的各組的血生化指標值與添加同等劑量不含轉基因成分的奶粉組無顯著性差異(P≥0.05)。

表3 轉人乳鐵蛋白全乳粉對大鼠血生化指標的影響(末期，90d)Table 3 Effect of transferred human lactoferrin milk powder on rats blood biochemistry at the late stage (90 d)

由表3可知，添加轉人乳鐵蛋白(末期，90d)，轉人乳鐵蛋白低劑量組、非轉人乳鐵蛋白各組與空白對照組間無顯著性差異(P≥0.05)。轉人乳鐵蛋白中、高劑量組血清鐵和鐵蛋白含量與空白對照相比有顯著提高。

3 結 論

動物實驗是經(jīng)典而可靠的用于新型食品安全性評價的手段[13]，有研究表明，轉基因食品喂養(yǎng)的家畜的營養(yǎng)素攝入率、生理健康水平、生育水平、產(chǎn)奶量、乳汁質量等與用非轉基因食品喂養(yǎng)的動物無差異[14]。本實驗中的轉人乳鐵蛋白全乳粉已進行了模擬胃腸道實驗、急性毒性實驗等食用安全性研究，結果均未出現(xiàn)任何實驗動物中毒表現(xiàn)和死亡癥狀。MacKenzie等[15]的研究也證明轉基因玉米在90d喂養(yǎng)過程中并未對大鼠造成不良影響，1507號轉基因玉米與非轉基因玉米有著同樣的安全性與營養(yǎng)性。He等[16]對轉基因玉米的研究也得出了相同的結果，這些研究成果與本實驗研究結果一致。

本研究在較長期喂養(yǎng)過程中未觀察到該含轉人乳鐵蛋白全乳粉對大鼠產(chǎn)生不良作用，含轉人乳鐵蛋白全乳粉可顯著增加血清鐵和鐵蛋白水平(P≤0.05)。提示較長期食用轉人乳鐵蛋白全乳粉可以改善實驗動物機體鐵的營養(yǎng)狀況。如果轉人乳鐵蛋白全乳粉的安全性和鐵營養(yǎng)狀況得到進一步證實將會彌補奶粉、乳汁等乳類食品中鐵含量較低的不足，并可用于改善食用者的鐵營養(yǎng)狀況，使乳類食品的營養(yǎng)更加均衡和全面。

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Effect of Transferred Human Lactoferrin Milk Powder on Serum iron and Ferritin in Rats

QI Xiao-zhe，WANG Jing，ZHOU Cui，XU Chao，CHE Hui-lian*
(College of Food Science and Nutritional Engineering, China Agricultural University, Beijing 100083, China)

Objective: Feed on SD rats for 90 days with transferred human lactoferrin whole milk powder and their nutrition, physiological status, and biochemical indicators were investigated, thus to evaluate the influence of transferred human lactoferrin milk powder on rats serum iron and ferritin. Methods: The study refers to the People s Republic of China Agriculture Industry Standard Transgenic plants and products food safety testing (NY/T 1102—2006). A total of 140 SD rats were divided into 7 groups, including control group, transgenic low-dose group, transgenic middle-dose group, transgenic high-dose group, non-transgenic low-dose group, non-transgenic middle-dose group, and non-transgenic high-dose group. Male and female were equally distributed. The weight, feed efficiency, and blood biochemical indicators during 90 days of feeding were measured. Results: SD rats fed on transferred human lactoferrin whole milk powder for 90 days were healthy, and compared with non-transgenic group, transgenic group did not show significant difference. Transgenic milk powder can increase the serum iron and ferritin in rats noticeably, and no adverse effects were observed during the study. Conclusion: Transferred human lactoferrin whole milk powder can increase the serum iron and ferritin in rats.

Transferred human lactoferrin milk powder；serum iron；ferritin

R151.2；TS252.1

A

1002-6630(2010)23-0340-04

2010-03-18

國家轉基因生物新品種培育重大專項(2008ZX08011-006)

祁瀟哲(1989—)，女，本科生，研究方向為食品質量與安全。E-mail：qixiaozhe0706030224@126.com

*通信作者：車會蓮(1977—)，女，副教授，博士，研究方向為營養(yǎng)與食品安全。E-mail：chehuilian@cau.edu.cn