熊麗紅

（江西省血液中心，江西 南昌 330077）

為了提高血型檢測(cè)準(zhǔn)確率，保證臨床用血安全，本中心在街頭用紙片法（正定型）對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者進(jìn)行血型初步篩查，再將血標(biāo)本送入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行正、反定型。筆者根據(jù)2009年6萬(wàn)多人份街頭篩查結(jié)果和實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果比較，尋找血型出現(xiàn)異常現(xiàn)象的各種因素，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 樣本來(lái)源 2009年1月～2009年12月江西省血液中心的無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本63045份，均用EDTA-Na2抗凝。

1.2 試劑來(lái)源 正定型試劑為長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司和北京金豪制藥股份有限公司；反定型試劑為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司和北京金豪北京金豪制藥股份有限公司。

1.3 儀器 HIMILTON STAR2000全自動(dòng)加樣儀 （瑞士），RT-340酶標(biāo)儀（瑞士），Thermo Star溫控孵育振蕩儀（瑞士），Labofuge400e平板式離心機(jī)（瑞士）。

1.4 方法

1.4 .1標(biāo)本檢測(cè) 獻(xiàn)血前對(duì)所有獻(xiàn)血者用紙片法進(jìn)行血型的初步篩查。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，對(duì)血袋針頭血液再次用紙片法進(jìn)行一遍正定型檢測(cè)；用96孔U型微量孔板法（微板法）進(jìn)行一次正定型檢測(cè)和兩次反定型檢測(cè) (實(shí)驗(yàn)室用不同廠家試劑進(jìn)行兩次正定和兩次反定血型)。紙片法：在血型檢定卡標(biāo)記好抗-A和抗-B的位置，分別各滴1滴抗-A和抗-B血清試劑，再各加受檢者血液1滴，混合后立即判斷血型。微板法：用STAR全自動(dòng)儀加樣，反定型在U型板加兩孔標(biāo)本血清各50μl，再各加2～5%的標(biāo)準(zhǔn)A和B紅細(xì)胞試劑50μl；正定型對(duì)標(biāo)本紅細(xì)胞進(jìn)行2%的稀釋后在U型板加兩孔稀釋紅細(xì)胞各50μl，再各加標(biāo)準(zhǔn)抗-A和抗-B試劑50μl。加樣完畢后在孵育振蕩儀上孵育振蕩2min，離心1min后再次孵育振蕩2min，用RT-340酶標(biāo)儀判讀血型。

1.4 .2結(jié)果判斷規(guī)則 只有正反定型相符的血型才能發(fā)放合格報(bào)告，出現(xiàn)血型差錯(cuò)的報(bào)業(yè)務(wù)科處理，出現(xiàn)正反定型不符的標(biāo)本送輸血研究室進(jìn)行確認(rèn)。

2 結(jié)果

2.1 2009年實(shí)驗(yàn)室共檢測(cè)出血型異常29例，占獻(xiàn)血總數(shù)的0.046%。

2.2 29例血型檢測(cè)異常的人員中，有13例為外采人員檢測(cè)血型錯(cuò)誤，占44.8%；16例為正反定血型不符，占55.2%。

2.3 16例正反定血型不符標(biāo)本經(jīng)輸血研究室確認(rèn)后，結(jié)果回饋見(jiàn)表1。

表1 正反定血型不符因素分析

2.4 除上述29例血型異?，F(xiàn)象外，尚有1例標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室重復(fù)檢測(cè)血型未發(fā)現(xiàn)異常，血液被醫(yī)院因血型正反定不符退回，經(jīng)本中心輸血研究室確認(rèn)后為血液中存在冷凝集素。還有1例實(shí)驗(yàn)室正反定無(wú)異常，因Rh(D)陰性送輸血研究室確認(rèn)后發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中存在不規(guī)則抗體。

3 討論

街頭外采人員初篩血型與實(shí)驗(yàn)室重復(fù)檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，血型出現(xiàn)異常的現(xiàn)象有44.8%是初篩出現(xiàn)錯(cuò)誤。造成街頭現(xiàn)場(chǎng)初篩血型檢定錯(cuò)誤的因素比較多，如街頭實(shí)驗(yàn)條件、溫度、濕度等實(shí)驗(yàn)條件比較復(fù)雜；現(xiàn)場(chǎng)獻(xiàn)血人員過(guò)多；抗-A、抗-B血清效價(jià)較低及試劑在運(yùn)輸、保存、使用過(guò)程中其質(zhì)量也可能發(fā)生變化等。

引起血型正反定型不符的原因比較多，除血液中抗原或抗體的減弱或丟失、獲得性抗原存在或抗原改變、假或不規(guī)則抗體凝集反應(yīng)等客觀因素外，實(shí)驗(yàn)方法、人為因素等均可造成。統(tǒng)計(jì)本實(shí)驗(yàn)室2009年所有正反定型不符的結(jié)果顯示有31.25%未找到明確原因，排除人為因素外，可能方法本身也有一定影響。紙片法純手工實(shí)驗(yàn)，要求實(shí)驗(yàn)人員有高度責(zé)任心外，實(shí)驗(yàn)條件也是影響結(jié)果的重要因素；U型微板法檢測(cè)血型快速簡(jiǎn)捷、適于批量檢測(cè)，但也存有一定缺陷，因速度快，需震蕩、離心，可能造成溶血及弱凝集不易發(fā)現(xiàn)，通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)凝塊大小判定血型，跟抗原、抗體效價(jià)高低及加樣量也有關(guān)系?？陀^因素中以血液中存在不規(guī)則抗體為最多，與有關(guān)報(bào)道相一致[1]。

血型鑒定錯(cuò)誤是臨床上出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)主要原因之一，血型正反定型一致是血型鑒定關(guān)鍵所在。而血型鑒定錯(cuò)誤首先是要避免人為因素造成的錯(cuò)誤，除要有一套完整的質(zhì)量體系文件，還需要工作人員有高度的責(zé)任心。各種免疫因素引起的正反定型不符原因比較復(fù)雜，血型的亞型、抗原或抗體減弱不可控制，但部分不規(guī)則抗體通過(guò)O型紅細(xì)胞來(lái)監(jiān)控，對(duì)所有無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查的必要性和可行性還需進(jìn)一步探討。為保證臨床用血安全，血型鑒定必須百分之百準(zhǔn)確，這要求工作人員具備豐富的理論知識(shí)和工作經(jīng)驗(yàn)，合理應(yīng)用各種血清學(xué)檢查技術(shù)進(jìn)行研究分析，隨時(shí)學(xué)習(xí)掌握各種新理論、新技術(shù)才能適應(yīng)現(xiàn)代輸血事業(yè)發(fā)展的需要。

[1]張循善,何秀英,許連慶.血型正反鑒定結(jié)果不符原因分析及解決方法的探討[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2001,36(1):67-68.