謝俊，黃英

重組轉(zhuǎn)鐵蛋白的研究進(jìn)展

謝俊，黃英

轉(zhuǎn)鐵蛋白家族存在于脊椎和無脊椎動(dòng)物中。該家族蛋白是由血清轉(zhuǎn)鐵蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、乳轉(zhuǎn)鐵蛋白、黑色素轉(zhuǎn)鐵蛋白、碳酸酐酶抑制因子等構(gòu)成[1]。血清轉(zhuǎn)鐵蛋白（serum transferrin）在人、羅猴、狗、貓、兔、荷蘭豬、小鼠、大鼠、奶牛、綿羊、山羊、馬、火雞、鴨、海龜和響尾蛇中均有存在，主要由肝細(xì)胞合成，分布在膽汁、羊水、腦脊液、淋巴液、初乳和乳汁中，但血漿中含量最高（2.5 g/L），占血漿總蛋白的 4%，從血漿蛋白質(zhì)的含量看，列第四位。由于轉(zhuǎn)鐵蛋白具有鐵的轉(zhuǎn)運(yùn)，抗菌活性，免疫調(diào)節(jié)活性等多種生物功能，并且轉(zhuǎn)鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（transferrin receptor，TfR）在藥物中轉(zhuǎn)運(yùn)方面也有特殊功能，其在臨床上的應(yīng)用越來越多，因此，人轉(zhuǎn)鐵蛋白（human transferrin，hTF）的臨床應(yīng)用及重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白的研究已成為近年來生物工程技術(shù)研究領(lǐng)域的一個(gè)新熱點(diǎn)。

1 人轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)構(gòu)和功能

1.1 人轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)構(gòu)

人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因的大小為 33.5 Kb，包含 17 個(gè)外顯子和 16 個(gè)內(nèi)含子，mRNA 長(zhǎng) 2318 bp，基因定位于3q21-qter[2]。hTF 是一種非血紅素結(jié)合鐵的 β-球蛋白，由679 個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，分子量為 79 （kD），含有 19 個(gè)分子內(nèi)二硫鍵和三個(gè)分子外糖鏈（其中兩個(gè)聚糖通過與 413和 611 位 Asn 的酰胺基相連，另外一個(gè)聚糖與 42 位 Ser的 O 相連）[3]。hTF 分子形成 N 端（336 個(gè)氨基酸）和C 端（343 個(gè)氨基酸）2 個(gè)結(jié)構(gòu)域，這 2 個(gè)結(jié)構(gòu)域有 42%的同源性。每個(gè)結(jié)構(gòu)域含有一個(gè)三價(jià)鐵離子結(jié)合位點(diǎn)，可逆地結(jié)合和釋放鐵離子。

1.2 人轉(zhuǎn)鐵蛋白的生物學(xué)功能

血清轉(zhuǎn)鐵蛋白其主要生理功能是負(fù)責(zé)運(yùn)載由消化管吸收的鐵和由紅細(xì)胞降解釋放的鐵，并以 TF-Fe3+的復(fù)合物形式進(jìn)入骨髓中，供成熟紅細(xì)胞的生成或輸送到機(jī)體的其他需鐵部位[4]。TF 也具有抗菌的活性。機(jī)體內(nèi)自由鐵含量過高會(huì)促進(jìn)病原物的生長(zhǎng)，轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合自由鐵可作為一種減少細(xì)菌病原體感染的手段[5]。TF 還可作為生長(zhǎng)因子，幾乎所有細(xì)胞株在無血清培養(yǎng)時(shí)，都需要人血清 TF 和胰島素的存在，并且不同類型的細(xì)胞對(duì) TF 結(jié)合物的反應(yīng)不同，結(jié)果會(huì)分化成不同的細(xì)胞[6]。自由鐵離子和其簡(jiǎn)單的配合物能催化 ·OH 的形成而使細(xì)胞具有毒性，但 TF 因能與游離鐵形成穩(wěn)定的鐵—轉(zhuǎn)鐵蛋白配合物，故具有清除有害的游離鐵離子，抑制自由基所產(chǎn)生的細(xì)胞毒性作用。TF 還具有免疫調(diào)節(jié)活性。阻斷 TF 介導(dǎo)的鐵攝取能有效抑制淋巴細(xì)胞增殖。并且 Yun 等[7]還證實(shí)：在各種誘導(dǎo)物如脂多糖、肽多糖、病毒作用下，家蠶的轉(zhuǎn)鐵蛋白 mRNA 表達(dá)量顯著增加，說明家蠶的免疫反應(yīng)與轉(zhuǎn)鐵蛋白有關(guān)。

2 人轉(zhuǎn)鐵蛋白在臨床上的治療應(yīng)用

2.1 疾病診斷

人體中鐵缺乏或者鐵超負(fù)荷都會(huì)產(chǎn)生疾病，如患者血漿中缺乏轉(zhuǎn)鐵蛋白，就會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)小細(xì)胞低色素性貧血和肝、脾、胰腺等臟器中大量鐵蓄積。因此，在臨床診斷中，檢測(cè)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體和鐵蛋白是缺鐵性貧血和慢性疾病引起的貧血（ACD）的鑒別診斷的指標(biāo)之一；在慢性肝疾病及營(yíng)養(yǎng)不良時(shí)轉(zhuǎn)鐵蛋白下降，轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測(cè)也可以作為營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的一項(xiàng)指標(biāo)。另外，測(cè)定尿轉(zhuǎn)鐵蛋白排泄率的變化可以更早地反映 II 型糖尿病患者的早期腎損害，而血清轉(zhuǎn)鐵蛋白的降低也可用來診斷腎臟病變的嚴(yán)重程度。

2.2 疾病治療

由于轉(zhuǎn)鐵蛋白具有多種生物學(xué)功能，在一些臨床疾病的治療中應(yīng)用廣泛。當(dāng)機(jī)體缺乏轉(zhuǎn)鐵蛋白時(shí)，會(huì)出現(xiàn)貧血；鐵超負(fù)荷，生長(zhǎng)滯后和高感染的危險(xiǎn)，而通過注入脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白（apo-Tf）可有效地治療缺乏轉(zhuǎn)鐵蛋白貧血癥[5]。在缺血性疾病搶救和治療過程中，醫(yī)學(xué)家們逐漸發(fā)現(xiàn)，缺血所引發(fā)的組織損傷是疾病致死的主要原因，但組織造成損傷的主要因素，不是缺血本身，而是恢復(fù)血液供應(yīng)后，由于過量的自由基攻擊重新獲得血液供應(yīng)的組織內(nèi)的這部分細(xì)胞所造成的；而自由鐵離子能催化氧自由基形成，提高氧自由基的濃度。脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白可與自由鐵離子結(jié)合，降低氧自由基的濃度，減少組織的氧化還原損傷。因此，在疾病搶救和治療過程中注入脫鐵蛋白對(duì)缺血性再灌注損傷有很好的促進(jìn)作用[7]。同樣在放射治療過程中轉(zhuǎn)鐵蛋白含量減少，自由鐵離子濃度增高，注入脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合鐵離子也可以降低氧化損傷[8]。在患者骨髓移植或者化療治療血液腫瘤過程中，由于體內(nèi)高濃度的自由鐵離子，影響了正常血清對(duì)條件致病菌的抑制作用，很容易導(dǎo)致細(xì)菌感染而使患者死亡，而注入脫鐵蛋白可降低自由鐵離子濃度，則可恢復(fù)血清對(duì)病原菌的抗性[9]。

2.3 腫瘤治療

研究發(fā)現(xiàn)，在許多增生細(xì)胞表面，幼紅細(xì)胞以及很多的腫瘤細(xì)胞上都發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（TfR），并在白血病患者的細(xì)胞，轉(zhuǎn)移率高的贅生細(xì)胞和許多腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)了TfR 過表達(dá)的現(xiàn)象。因此 TfR 成為了很好的腫瘤靶向標(biāo)記[10-11]。謝偉玲等[12]將轉(zhuǎn)鐵蛋白與苯甲酸酰肼結(jié)合形成靶向藥物，通過甲基噻唑基四唑（MTT）法檢測(cè)其對(duì)乳腺癌細(xì)胞和正常乳腺細(xì)胞的殺傷效果。研究結(jié)果還顯示轉(zhuǎn)鐵蛋白與苯甲酸酰肼結(jié)合的藥物對(duì)乳腺癌細(xì)胞的殺傷效果是正常細(xì)胞的 286 倍。因此，科學(xué)家利用轉(zhuǎn)鐵蛋白作為載體直接運(yùn)輸小分子量的藥物和毒物蛋白，或者通過脂質(zhì)體把藥物連接在抗轉(zhuǎn)鐵蛋白的抗體上，使帶有藥物和毒物蛋白的轉(zhuǎn)鐵蛋白與腫瘤細(xì)胞上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體結(jié)合，將藥物運(yùn)輸?shù)教囟ǖ哪[瘤部位，達(dá)到特異性殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。然而，轉(zhuǎn)鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體復(fù)合物代謝循環(huán)較快，每次循環(huán)大約 4 ～5 min，影響了藥物運(yùn)輸?shù)男?。并且結(jié)合鐵離子的 TF 與TfR 結(jié)合進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，釋放鐵離子成為脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白（apo-TF）回到細(xì)胞表面。但如果 apo-TF 與 TfR 親和力低不能繼續(xù)參與代謝，而每個(gè)轉(zhuǎn)鐵蛋白分子限制在 4 ～5 min 的循環(huán)過程，這就給轉(zhuǎn)鐵蛋白與細(xì)胞毒物綴合物的運(yùn)輸帶來了困難。Yoon 等[13]用基因工程改造轉(zhuǎn)鐵蛋白的受體，增加轉(zhuǎn)鐵蛋白在細(xì)胞內(nèi)停留時(shí)間，降低鐵離子的釋放速率，來提高轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞毒物的效率，以增強(qiáng)殺傷腫瘤細(xì)胞的治療效果。所以，利用基因工程、免疫、組織化學(xué)等技術(shù)修飾轉(zhuǎn)鐵蛋白或者轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體，使其高效特異地?cái)y帶藥物、細(xì)胞毒物、基因片段等，將為癌癥治療帶來新的曙光。

3 重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白的研究

轉(zhuǎn)鐵蛋白參與免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，具有抗菌、殺菌、自我保護(hù)的抗病性能，是抑制細(xì)菌繁殖的重要因子；近年來還發(fā)現(xiàn) TF 是細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所必需的生長(zhǎng)因子，所以在無血清細(xì)胞培養(yǎng)液中 TF 是必需的成分以確保細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖；并且轉(zhuǎn)鐵蛋白或者轉(zhuǎn)鐵蛋白受體介導(dǎo)的藥物傳遞對(duì)糖尿病及腫瘤等疾病有很好的臨床效果；同時(shí)，轉(zhuǎn)鐵蛋白還具有防止貧血、促進(jìn)雙歧桿菌的生長(zhǎng)、抑制腸道致病菌和病毒體內(nèi)自由基的生成、緩解類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和抗衰老等生理功能，被廣泛應(yīng)用于食品、藥品、化妝品和醫(yī)藥領(lǐng)域中。因此，轉(zhuǎn)鐵蛋白已經(jīng)成為國(guó)際上競(jìng)相研發(fā)的生物制品。但目前 TF的獲取主要來自獻(xiàn)血者的血漿之中。可血源的供應(yīng)困難，以及有感染肝炎病毒和艾滋病病毒等的危險(xiǎn)，限制了通過血漿來大量獲得 TF 蛋白的可能。利用基因工程技術(shù)讓人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因在宿主中高效表達(dá)，既能大量獲得重組轉(zhuǎn)鐵蛋白，又能克服從血清中獲取的 TF 攜帶有傳染性的致病菌的危險(xiǎn)。由于人轉(zhuǎn)鐵蛋白的治療和保健功能，因而對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白的研究在急劇升溫，它已經(jīng)成為新世紀(jì)生命科學(xué)發(fā)展的最大熱點(diǎn)。王峰和黃璐圓[14]以人胎肝 cDNA 為模板，利用 PCR 方法克隆人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因；通過與基因組序列對(duì)比分析基因組結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因與猩猩、猴子、兔子和老鼠的轉(zhuǎn)鐵蛋白氨基酸相似率分別為 94%、91%、78%、73%。近些年來，重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白表達(dá)系統(tǒng)的研究主要有以下幾個(gè)方面：

3.1 大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)

de Smit 等[15]用僅在 28 ℃ 可表達(dá) hTF 質(zhì)粒的啟動(dòng)子，替換了常規(guī)的 42 ℃ 下表達(dá)的溫敏型質(zhì)粒的啟動(dòng)子，使得培養(yǎng)液的溫度不必升高到 42 ℃。雖然 42 ℃ 可以激活許多蛋白酶的活性但也可促進(jìn)蛋白質(zhì)的降解。因此，在 28 ℃培養(yǎng)液中有利于提高蛋白質(zhì)的合成。同時(shí)將 28 ℃ 溫敏型的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入蛋白酶缺陷型的大腸桿菌株內(nèi)生產(chǎn) rhTF，這樣很好地避免了菌株自身對(duì) rhTF 的降解作用。通過這兩種方法的改進(jìn)，使轉(zhuǎn)鐵蛋白的表達(dá)量達(dá) 60 mg/L。但是由于細(xì)菌不含有粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及高爾基體，不能把 N 聚糖連到肽鏈上，所以該重組的人轉(zhuǎn)鐵蛋白不具有生物活性；盡管Hoefkens 等[16]通過分離、復(fù)性實(shí)驗(yàn)證實(shí)：復(fù)性后的重組轉(zhuǎn)鐵蛋白與標(biāo)準(zhǔn)品具有一樣的組成，并且純度高，具備結(jié)合鐵離子的功能，但復(fù)性的產(chǎn)率只有 5%。因此，由于包涵體具有不易溶解以及表達(dá)無活性的 hTF 復(fù)性成有活性的 hTF產(chǎn)率低等缺點(diǎn)，不能應(yīng)用大腸桿菌大規(guī)模的表達(dá) hTF。

3.2 酵母表達(dá)系統(tǒng)

由于酵母表達(dá)系統(tǒng)培養(yǎng)條件普通，生長(zhǎng)繁殖速度迅速，而且酵母表達(dá)的轉(zhuǎn)鐵蛋白 N 端純化簡(jiǎn)單，成本小，還可完全去除血清；因此，酵母可作為 hTF 很好的表達(dá)系統(tǒng)。Mason 等[17]構(gòu)建以甲醇氧化酶為啟動(dòng)子的 hTF/2N cDNA載體，用甲醇酵母表達(dá)轉(zhuǎn)鐵蛋白的 N 端，在甲醇的誘導(dǎo)下，搖瓶的培養(yǎng)液中檢測(cè)到其表達(dá)量為 150 ～ 240 mg/L。雖然表達(dá)量比較理想，但僅表達(dá)有功能的人轉(zhuǎn)鐵蛋白的 N 末端，全長(zhǎng)蛋白的表達(dá)并未成功，而且質(zhì)譜法檢測(cè)出 N 末端含有1 ～ 2 個(gè)人轉(zhuǎn)鐵蛋白中并不存在的己糖。Sargent 等[18]通過敲除兩個(gè)與 N 相連的糖基位點(diǎn)，從啤酒酵母中純化出全長(zhǎng)的轉(zhuǎn)鐵蛋白，表達(dá)量達(dá)到 1.5 mg/ml，已達(dá)到了商業(yè)化生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)，但是這種純化所需的微孔及膜抗原非常昂貴。

3.3 細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)

黑腹果蠅 S2 細(xì)胞的特點(diǎn)在于它能自發(fā)地把數(shù)百種轉(zhuǎn)染過的質(zhì)粒拷貝整合到自身基因組上。隨著整合基因數(shù)量的擴(kuò)增，穩(wěn)定整合多克隆質(zhì)粒的細(xì)胞其表達(dá)始終能保持較高的水平，卻不會(huì)殺死細(xì)胞。Lim 和 Cha[19]構(gòu)建以果蠅金屬硫蛋白為啟動(dòng)子的重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白質(zhì)粒，用不同濃度的誘導(dǎo)物—硫酸銅，在不同的 S2 細(xì)胞濃度下檢測(cè)重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白的表達(dá)量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)物濃度越高，細(xì)胞濃度越大，表達(dá)量越高；在 S2 細(xì)胞培養(yǎng) 72 h 后到達(dá)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，誘導(dǎo)物硫酸銅濃度為 700 μmol/L 時(shí)，轉(zhuǎn)鐵蛋白表達(dá)量最高為62 μg/ml。Mason 等[20]利用倉(cāng)鼠嬰腎細(xì)胞生產(chǎn)轉(zhuǎn)鐵蛋白的氨基端片段，培養(yǎng)液中轉(zhuǎn)鐵蛋白的氨基端片段濃度由最初的10 ～ 15 μg/ml 提升到 55 ～ 120 μg/ml，但用免疫血清替代物吸附分離轉(zhuǎn)鐵蛋白的氨基端片段，從培養(yǎng)液中只回收了80% 的表達(dá)量。因此，盡管細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)可表達(dá)有活性的重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白，但由于表達(dá)量低并且成本過高，限制了其商業(yè)化的應(yīng)用。

3.4 動(dòng)植物表達(dá)系統(tǒng)

3.4.1 植物表達(dá)系統(tǒng) Zhang 等[21]用成熟的 hTF 蛋白的氨基酸序列逆翻譯為水稻基因偏好的密碼子的 DNA 序列（與野生型的 hTF 核苷酸序列相比 GC 含量由 50% 提高到 65%）。然后構(gòu)建含有種子存儲(chǔ)蛋白的啟動(dòng)子序列（Gt1）、Gt1 信號(hào)肽、合成的 hTF，終止序列的線性的人重組轉(zhuǎn)鐵蛋白（rhTF）表達(dá)載體，采用電轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)入水稻的愈傷組織，結(jié)果在轉(zhuǎn)基因水稻后代的種子中檢測(cè)到了 rhTF，表達(dá)量為種子干重的 1%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了 Farran 等[22]提議的植物中表達(dá)重組蛋白可以進(jìn)入商業(yè)化應(yīng)用的臨界線—種子干重的 0.01%。并且通過鹽緩沖液萃取及陰離子交換色譜純化，重組轉(zhuǎn)鐵蛋白的純度達(dá)到 95% 以上，不但結(jié)構(gòu)上和天然人轉(zhuǎn)鐵蛋白相似，在可逆結(jié)合鐵離子及促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化的功能方面也基本相同。因此，現(xiàn)已有利用水稻表達(dá)重組轉(zhuǎn)鐵蛋白這種既安全且成本低的方法進(jìn)行產(chǎn)品開發(fā)。

3.4.2 動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研制 動(dòng)物乳腺作為外分泌器官，由于乳汁不會(huì)進(jìn)入體內(nèi)循環(huán)，而是隨乳汁分泌而排出動(dòng)物體外，故不會(huì)影響轉(zhuǎn)基因動(dòng)物本身生理代謝反應(yīng)；動(dòng)物乳腺組織還具備一整套對(duì)蛋白進(jìn)行修飾和加工，如糖基化、羧化、磷酸化以及分子組裝修飾加工的能力，具有穩(wěn)定的生物活性；而且從奶牛中提取產(chǎn)品，操作比較簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本較低。因此，利用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用、保健蛋白受到了生物科學(xué)家、醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界的高度重視。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究所自 20 世紀(jì) 90 年代初期就開展了乳腺生物反應(yīng)器研究工作，構(gòu)建了在乳腺中能高效、特異表達(dá)重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因的載體，不僅獲得了整合并表達(dá)人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因的轉(zhuǎn)基因小鼠，之后應(yīng)用催乳素轉(zhuǎn)基因小鼠與人轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠交配，得到雙重雜合子的轉(zhuǎn)基因小鼠，結(jié)果TF 轉(zhuǎn)基因小鼠乳汁中人轉(zhuǎn)鐵蛋白表達(dá)水平明顯提高[23]。近年來，該研究所又建立了大動(dòng)物（牛/羊）生物反應(yīng)器研制重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白的技術(shù)平臺(tái)，并運(yùn)用體細(xì)胞核移植克隆技術(shù)，獲得了數(shù)頭轉(zhuǎn)有人轉(zhuǎn)鐵蛋白（TF）的轉(zhuǎn)基因克隆牛。圖 1 中顯示了轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研制的基本技術(shù)路線；表 1 中總結(jié)了 rhTF 在不同表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)情況。

圖 1 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研制的基本技術(shù)路線

表 1 rhTF 在不同表達(dá)系統(tǒng)中的比較

4 展望

目前已經(jīng)利用大腸桿菌，酵母，動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)了人的重組轉(zhuǎn)鐵蛋白，但總體來說蛋白產(chǎn)量低，生物活性差，不具備商業(yè)應(yīng)用價(jià)值。而動(dòng)植物表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有很好的生物活性，并且成本低，易規(guī)?；?。因此，構(gòu)建轉(zhuǎn)鐵蛋白的載體，制備轉(zhuǎn)鐵蛋白的克隆大動(dòng)物（牛、羊）獲得高表達(dá)量、有活性的轉(zhuǎn)鐵蛋白將是解決轉(zhuǎn)鐵蛋白來源困難的有效途徑。雖然現(xiàn)在存在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物外源基因隨機(jī)整合，表達(dá)不很穩(wěn)定；轉(zhuǎn)基因動(dòng)物克隆效率低；生物產(chǎn)品純化回收效率不理想等問題，但我們相信，隨著轉(zhuǎn)染技術(shù)，定點(diǎn)整合技術(shù)，克隆技術(shù)及生物分離技術(shù)的進(jìn)步，這些問題將迎刃而解，這將對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白及其他藥用蛋白的開發(fā)有重要意義。利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物—乳腺生物反應(yīng)器來生產(chǎn)大量有活性的藥用蛋白，基因藥物將是基因工程技術(shù)發(fā)展的一個(gè)趨勢(shì)，具有廣闊的應(yīng)用及市場(chǎng)前景，也對(duì)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)做出不可估量的貢獻(xiàn)。

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作者單位：200025 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（謝?。?00040 上海市兒童醫(yī)院上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所（黃英）

通訊作者：黃英，Email：hying23@163.com

收稿日期：2010-08-13

DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.06.011