魏 民

(濮陽市油田總醫(yī)院,河南濮陽 457000)

研究發(fā)現(xiàn),微轉(zhuǎn)移可能是造成腫瘤轉(zhuǎn)移的重要原因之一。CD44V6可參與癌細(xì)胞與基質(zhì)的黏附及淋巴細(xì)胞歸巢,從而有利于癌細(xì)胞的擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移。E-鈣黏附素(E-cadherin)已被認(rèn)為在上皮源性惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移中起重要作用。2003年 9月 ～2008年12月,我們采用免疫組化法檢測(cè)了胃癌組織中的CD44V6和 E-cadherin,探討二者在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 198例胃癌患者,男 128例、女 70例,年齡 23～76歲；TNM分期 Ⅰ期 65例,Ⅱ期 44例,Ⅲ期 55例,Ⅳ期 34例?；颊咝g(shù)前均未行放化療,收集其手術(shù)切除癌組織及癌旁正常胃組織。

1.2 方法

1.2.1 CD44V6、E-cadherin檢測(cè)方法 采用免疫組化 SP法,按試劑盒說明書操作。結(jié)果判斷:CD44V6、E-cadherin胃癌細(xì)胞膜呈現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。染色程度:無著色為 0分,淺黃色 1分,棕黃色為 2分,棕褐色 3分；陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù):≤10%為 0分,～50%為 1分,～75%為 2分,＞75%為 3分。兩項(xiàng)相乘≥4判為陽性,＜4為陰性。

1.2.2 胃癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移檢測(cè) 采用免疫組化 SP法對(duì)胃癌常規(guī)病理檢查陰性的淋巴結(jié)進(jìn)行檢測(cè),以單克隆抗體細(xì)胞角蛋白(AE1/AE3)作為標(biāo)記,AE1/AE3只定位于轉(zhuǎn)移的胃癌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi),DAB顯色后呈棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。在淋巴結(jié)組織中發(fā)現(xiàn)陽性細(xì)胞判為胃癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。率的比較用 χ2檢驗(yàn),相關(guān)關(guān)系采用 Pearson相關(guān)分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CD44V6、E-cadherin表達(dá)及其與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 胃癌組織中 CD44V6、E-cadherin的陽性率分別為 78.79%(156/198)、55.05%(109/198),正常胃黏膜組織中分別為 0、100%。兩者相比,P均 ＜0.05。CD44V6、E-cadherin表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系見表1。由表可見,CD44V6與胃癌生長(zhǎng)方式、浸潤(rùn)程度及 TNM分期顯著相關(guān)(P均＜0.05),E-cadherin與胃癌分化程度、浸潤(rùn)程度及TNM分期顯著相關(guān)(P均 ＜0.05)。二者在胃癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.462,P＜0.01)。

2.2 CD44V6、E-cadherin表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的關(guān)系 胃癌患者中,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 108例,淋巴微轉(zhuǎn)移 64例。CD44V6表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(r=0.573,P＜0.05),而與淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)(r=-0.329,P＜0.05)。E-cadherin與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移均呈負(fù)相關(guān) (r分別為 -0.496、-0.407,P均 ＜0.05)。

3 討論

CD44基因位于11號(hào)染色體短臂,有 20個(gè)高度保守的外顯子。CD44V6是含外顯子 6的變異體,其表達(dá)可改變癌細(xì)胞表面黏附分子的構(gòu)成和功能,有助于癌細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)移潛能。研究認(rèn)為,CD44V6在胃癌中的表達(dá)對(duì)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移至淋巴結(jié)起著重要作用。范開席等[1]研究認(rèn)為,CD44V6的異常表達(dá)開始于胃癌早期,且貫穿于胃癌的整個(gè)浸潤(rùn)過程,其陽性率與淋巴轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。周東輝等[2]研究表明,CD44V6表達(dá)分析有助于檢測(cè)區(qū)域淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示,CD44V6在胃癌中的陽性率為 78.79%,且與胃癌生長(zhǎng)方式、浸潤(rùn)程度及 TNM分期有關(guān),表明 CD44V6陽性者更具有侵襲性和轉(zhuǎn)移性,預(yù)后差。本研究中 CD44V6表達(dá)與微轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān),而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),提示 CD44V6在胃癌轉(zhuǎn)移的不同狀態(tài)下可能起不同作用。我們認(rèn)為,在發(fā)生淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移狀態(tài)時(shí),可能存在某種抵抗 CD44V6發(fā)揮作用的因素或機(jī)制,而在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤形成時(shí) CD44V6開始起主導(dǎo)作用,但具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

表1 CD 44 V 6、E-cadherin表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

E-cadherin存在于各類上皮細(xì)胞膜上,介導(dǎo)同種細(xì)胞間緊密連接,維持組織結(jié)構(gòu)完整性,建立與保持上皮細(xì)胞極性的鈣依賴性黏附分子。E-cadherin基因被認(rèn)為是一種轉(zhuǎn)移抑制基因,其低表達(dá)說明腫瘤存在發(fā)生轉(zhuǎn)移的潛在危險(xiǎn)。本研究發(fā)現(xiàn),胃癌組織中 E-cadherin陰性。E-cadherin表達(dá)下降或缺失,細(xì)胞間的相互黏附力下降,使細(xì)胞易于分散并向外周浸潤(rùn)性生長(zhǎng)。這已在甲狀腺乳頭狀癌、膀胱癌、前列腺癌和膽囊癌等研究中得到證實(shí)[3,4]。本研究結(jié)果顯示,E-cadherin在胃癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān),且與胃癌分化程度、臨床分期、浸潤(rùn)深度顯著相關(guān),提示 E-cadherin在抑制腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移方面發(fā)揮重要作用[5,6]。

本研究發(fā)現(xiàn),CD44V6與 E-cadherin存在著一定的依從性,即隨著胃癌組織中 CD44V6表達(dá)的增高,E-cadherin有低表達(dá)的趨勢(shì)。這提示在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中,CD44V6與 E-cadherin具有反向協(xié)同作用,前者的激活和后者的失活共同促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。

[1]范開席,仲偉霞,孫蘭萍,等.胃癌中 p16、CD44V6的表達(dá)及其相關(guān)性的研究[J].實(shí)用腫瘤雜志,2000,15(6):391-393.

[2]周東輝,馬志敏,馮懿正,等.CD44V6在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].實(shí)用腫瘤雜志,2000,15(5):326-328.

[3]Naito A,Lease H,Kuzushina T,et al.Clinical significance of E-cadherin expression in thyroid neoplasms[J].J Surg Oneol,2001,76(3):176-180.

[4]谷化平,劉艷茹,尚培中.nm23 H1和 E-eadherin基因蛋白在膽囊癌組織中的表達(dá)[J].中國(guó)現(xiàn)代普通外科進(jìn)展雜志,2002,5(1):29-31.

[5]Chen HC,Chu RY,Hsu PN,et al.Loss of E-cadherin expression correlates with poor differentiation and invasion into adjacent organs in gastric adenocarcinomas[J].Cancer Lett,2003,201(1):97-106.

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