張 飛 許靜波 沈國順

黃芪多糖(Astragalus polysaccharide，APS)是黃芪的主要活性成分之一，其具有調節(jié)免疫、抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗氧化、抗輻射和抗應激等作用，在臨床上已經用于治療肝炎、腫瘤等疾病。研究表明黃芪多糖抗氧化和衰老作用的機制可能與其提高機體免疫功能，清除自由基及抗脂質過氧化有關。正常機體內自由基的產生和清除保持著動態(tài)平衡，超氧化物歧化酶(SOD)是機體重要的抗氧化系統(tǒng)成員之一，能清除超氧陰離子自由基(AOR)，保護細胞免受損傷，檢測SOD的活性和脂質過氧化物丙二醛(MDA)的含量反映了機體清除自由基的能力及細胞受損的嚴重程度。一氧化氮（NO）是由機體內多種細胞產生的一種多功能介質，作為內源性舒張因子及神經遞質參與免疫防御，也參與炎癥和免疫介導的組織損傷。本試驗以20日齡斷奶仔豬為研究對象，探討黃芪多糖對早期斷奶仔豬抗氧化性能的影響，為進一步研究黃芪多糖的免疫機制提供相關參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

杜×長×大三元雜交仔豬由沈陽農業(yè)大學實驗種豬場提供；黃芪多糖注射液由哈爾濱市高升獸藥廠提供（生產批號20080720），黃芪多糖含量為10 mg/ml。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗分組

選擇三窩胎次相近、體重相近的杜×長×大三元雜交仔豬24頭，20日齡斷乳，隨機分為4組：對照組、試驗組1、試驗組2、試驗組3。各組仔豬在20日齡、35日齡時分別給藥一次，每次連續(xù)給藥3 d，試驗組1每頭仔豬肌肉注射黃芪多糖2 ml；試驗組2每頭仔豬肌肉注射黃芪多糖4 ml；試驗組3每頭仔豬肌肉注射黃芪多糖6 ml；對照組每頭仔豬肌肉注射生理鹽水2 ml。在仔豬20日齡、35日齡、50日齡時，從仔豬前腔頸靜脈竇各采血一次，分離血清，進行生化指標檢測。

1.2.2 測定指標

血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）測定采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒（批號20080520）。

1.3 數據處理

所有數據采用SPSS11.5軟件進行方差分析，多重比較用鄧肯式法。P＜0.05時確定為差異顯著。所有數據均以“平均值±標準誤”表示。

2 試驗結果與分析

2.1 黃芪多糖對早期斷奶仔豬血清中SOD含量的影響（見表1）

表1 黃芪多糖對早期斷奶仔豬血清中SOD含量的影響(IU/ml)

由表1可知，早期斷奶仔豬血清中SOD含量在35日齡時，試驗2組顯著高于對照組（P＜0.05），其他各組差異不顯著（P＞0.05）；50日齡時，試驗2組顯著高于對照組和試驗3組（P＜0.05），其他各組差異不顯著（P＞0.05）。在 35～50日齡用藥期間，各試驗組，以試驗2組最高，對照組最低。

2.2 黃芪多糖對早期斷奶仔豬血清中MDA含量的影響（見表2）

表2 黃芪多糖對早期斷奶仔豬血清中MDA含量的影響(nmol/ml)

由表2可知，35日齡時，早期斷奶仔豬血清中MDA含量對照組極顯著高于試驗組（P＜0.05），各試驗組間差異不顯著（P＞0.05）；50日齡時，對照組顯著高于試驗2組和試驗3組（P＜0.05），試驗1組顯著高于試驗2組和試驗3組（P＜0.05），對照組與試驗1組差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 黃芪多糖對早期斷奶仔豬血清中NO含量的影響（見表3）

表3 黃芪多糖對早期斷奶仔豬血清中NO含量的影響(μmol/l)

由表3可知，35日齡時，早期斷奶仔豬血清中NO含量對照組顯著高于試驗1組和試驗2組（P＜0.05），各試驗組，以試驗2組最低，試驗3組最高，差異不顯著（P＞0.05）；50日齡時，各組間差異均不顯著（P＞0.05）。

3 討論

動物機體在新陳代謝的過程中，活性氧自由基(O2-)的產生和消除保持著一種動態(tài)平衡，O2-的消除主要依賴于機體完整的抗氧化防御系統(tǒng)的預防性或阻斷性控制。SOD對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用，他能清除超氧陰離子(O2-)，保護細胞免受損傷，其活性的高低間接反映機體清除自由基的能力，MDA是脂質過氧化作用的終產物，其含量的高低間接反映機體受氧自由基攻擊的嚴重程度。

本研究中各試驗組斷奶仔豬血清中SOD含量均高于對照組，其中35～50日齡期間試驗2組最高；35日齡試驗組斷奶仔豬血清中MDA含量顯著低于對照組（P＜0.05）；50日齡，試驗 2、3組顯著低于對照組和試驗1組。這表明黃芪多糖能夠提高機體SOD活性，增強機體清除自由基的能力，減少過氧化作用的發(fā)生，增強機體的抗氧化能力。

近年來，NO作為機體細胞功能的信使分子和效應分子被人們所接受，但在機體內過量生成的NO卻有明顯的細胞毒性。許多試驗結果證實，炎癥期致炎因子刺激誘導型NO合酶(iNOS)，合成大量的NO，促進炎癥反應。當NO濃度過高時，一方面抑制細胞線粒體呼吸機能，進而抑制細胞內ATP和DNA的合成，導致細胞死亡。另一方面，NO極易與氧、超氧陰離子、過氧化氫反應生成NO3-和 NO2-，其中 NO3-在生理pH值時產生較強的細胞毒性和氧化性，NO3-質子化迅速分解成具有高反應性的羥自由基，誘發(fā)生物膜的多種不飽和脂肪酸的脂質過氧化作用，造成細胞損傷。另外，NO在免疫反應中有著十分廣泛而復雜的作用。它通過非特異性殺傷細菌、真菌及寄生蟲和瘤細胞而增強非特異性免疫功能，但NO對特異性免疫功能的影響則較為復雜，一般認為NO的產生常伴有免疫功能的抑制，表現為淋巴細胞有絲分裂減低，淋巴細胞增殖緩慢，抗體產生及多種淋巴因子的分泌受抑制等。適度的NO合酶(NOS)表達有助于宿主抗感染及抗腫瘤，并在免疫反應中起微妙的調節(jié)作用，但NOS的過度表達致NO產生過量時往往促發(fā)免疫病理過程而造成組織損傷。NO的這種非特異性毒性作用直接引起廣泛性組織損傷，器官功能障礙，特異性免疫功能低下，增加機體易感性，使病情不但不能緩解，反而體況更加惡化。NO生成過多成為許多疾病的重要促進因素。

本研究中，早期斷奶應激、環(huán)境應激及飼料變化等可能引起仔豬體內NO合酶(NOS)表達，從而使血清中NO含量升高。35日齡時，各試驗組斷奶仔豬血清中NO含量均低于對照組，試驗2組最低（P＜0.05）。這說明黃芪多糖能有效恢復血清中NO的含量，防止脂質過氧化作用的發(fā)生，保護機體組織不受損傷。

若干篇，刊略，需者可函索）