劉明遠,劉 巖,周 剛,張建華,秦 輝,梁 琳,劉 紅

(佳木斯大學,黑龍江佳木斯 154007)

雜多酸化合物(POMs)是一類前過渡金屬氧陰離子簇,包括多種結(jié)構(gòu)類型 ,如:Keggin結(jié)構(gòu)、Wells-Dawson結(jié)構(gòu)、Silverton結(jié)構(gòu)、Anderson結(jié)構(gòu)、Lindqvist結(jié)構(gòu)及 Waugh結(jié)構(gòu)。由于其結(jié)構(gòu)多樣性及其藥學和材料學科等方面的潛在應用而備受關(guān)注[1]。POMs表現(xiàn)的抗腫瘤活性和抗病毒活性,已引起醫(yī)藥界人士的高度重視。近年來,由于抗生素的不合理使用,細菌耐藥現(xiàn)象不斷出現(xiàn),給臨床治療帶來嚴重困難,研究開發(fā)新型抗菌藥物已成為舉世關(guān)注的熱點。Yamase等發(fā)現(xiàn)夾心型 Keggin結(jié)構(gòu)多鎢酸鹽同β 內(nèi)酰胺抗生素聯(lián)用顯示了協(xié)同抵抗耐青霉素的金黃葡萄球菌(M RSA)的作用[2,3]。關(guān)于夾心型 Keggin結(jié)構(gòu)鎢銻雜多酸 Na9[(Cu(H2O))3SbW9O33]19.5H2O和鎢鉍雜多酸 Na12[(Cu(H2O))3(BiW9O33)2]˙29H2O的抗菌作用研究,迄今未見文獻報道。本研究采用紙片藥敏試驗法和試管二倍稀釋法,將新合成的夾心型 Keggin結(jié)構(gòu)鎢銻雜多酸 Na9[(Cu(H2O))3SbW9O33]19.5H2O和鎢鉍雜多酸 Na12[(Cu(H2O))3(BiW9O33)2]˙ 29H2O進行體外抑菌活性研究,初步探索這兩種雜多酸化合物的抗菌作用,為雜多酸化合物的研究向臨床方向發(fā)展提供基礎性實驗數(shù)據(jù)。

1 實驗部分

1.1 供試化合物

供試化合物為本實驗室合成,并且通過元素分析、紅外光譜和單晶 X-射線衍射確定其晶體結(jié)構(gòu)。

Na9[(Cu(H2O))3SbW9O33]˙19.5H2O縮寫為:SbW9Cu3Na12[(Cu(H2O))3(BiW9O33)2]˙29H2O縮寫為:BiW9Cu3

1.2 受試菌株

金黃色葡萄球菌 ATCC25923,大腸桿菌 ATCC25922,銅綠假單胞菌由佳木斯大學附屬第一醫(yī)院檢驗科周薇薇教授惠贈;白葡萄球菌、檸檬色葡萄球菌、大腸桿菌、腸炎桿菌、枯草桿菌由佳木斯大學基礎醫(yī)學院微生物教研室周剛老師惠贈。

1.3 儀器

F-A2004型電子分析天平(上海恒平科學儀器有限公司 ),PHSJ-4A型雷磁 pH計(上海精科雷磁儀器廠),SZ-97型自動三重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠),V S-1300U型超凈工作臺 (上海嘉鵬科技有限公司),EOC型恒溫培養(yǎng)箱(艾德生儀器有限公司),DA60369型 P1000N微量移液器(GILSON),LDZM-40KCS型立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠)。

1.4 培養(yǎng)基

按文獻方法配置營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,Mueller-Hinton Broth肉湯培養(yǎng)基,M H平板培養(yǎng)基[4]。

1.5 試驗方法

紙片藥敏試驗中,分別用三蒸水配置 SbW9Cu3和BiW9Cu3三 個 濃 度 的 藥 液 (10000μg/mL,7500μg/mL,5000 μg/mL)制作藥敏紙片 ,紙片含藥量分別為 100 μg/片 ,75 μg/片,50 μg/片。選取產(chǎn)生抑菌環(huán)的化合物進行試管二倍稀釋法試驗,測試藥液最高濃度為 5120μ g/mL,最低濃度為1.25 μg/mL。

紙片藥敏試驗以大腸桿菌 ATCC25922和金黃色葡萄球菌 ATCC25923做質(zhì)控;二倍稀釋法試驗以大腸桿菌 ATCC25922做質(zhì)控。藥敏判讀標準根據(jù) CLSI標準(2009年)所載受試藥對質(zhì)控菌的抑菌環(huán)直徑范圍和對質(zhì)控菌的 M IC范圍作為實驗質(zhì)控標準。

2 結(jié)果

2.1 紙片法抑菌結(jié)果

化合物 SbW9Cu3在紙片含藥量為75 μg/片時,對部分試驗菌產(chǎn)生抑菌環(huán),抑菌圖片見圖1,抑菌環(huán)直徑見表1。化合物BiW9Cu3在所設的三個濃度下對試驗菌均無抑菌環(huán)產(chǎn)生。

圖 1 (a),(b),(c),(d)分別為化合物 SbW9Cu3對大腸桿菌、腸炎桿菌、白色葡萄球菌和檸檬色葡萄球菌所產(chǎn)生的抑菌環(huán)(紙片含藥量為75 μ g)片 ,每個平板內(nèi)各設平行組。

2.2 試管二倍稀釋試驗結(jié)果

化合物 SbW9Cu3對試驗菌的 M IC值和 MBC值結(jié)果見表2。

表1 化合物對不同細菌的抑菌環(huán)直徑

表2 化合物 SbW9Cu3對不同細菌的 MIC值和 M BC值

3 討論

本實驗研究了新合成的兩種夾心型 Keggin結(jié)構(gòu)鎢銻/鉍雜多酸的體外抗菌活性,紙片藥敏試驗結(jié)果顯示化合物SbW9Cu3對大腸桿菌、腸炎桿菌、白葡萄球菌和檸檬色葡萄球菌均具有抗菌活性 ,而 BiW9Cu3對試驗菌則沒有活性;進而用試管二倍稀釋法測定了化合物 SbW9Cu3對試驗菌的M IC值和 MBC值。本實驗研究結(jié)果表明雜多酸化合物SbW9Cu3具有體外抗菌活性,而它的同質(zhì)異構(gòu)體 BiW9Cu3則沒有表現(xiàn)出抗菌活性,這說明夾心結(jié)構(gòu)中存在的中心離子Bi,Sb不同化合物的體外抗菌活性也存在顯著差異,因此新型雜多酸化合物的體外抗菌活性研究前景廣闊,有待進一步探索。

[1] 王恩波,胡長文,許林.多酸化學導論 [M].北京:化學工業(yè)出版社,1998,1-3

[2] Tézé A,Hervé G,Eds.α-,β-andγ-Dodecatungstosilicic:Isomers and Related Lacunary Compounds[M].New York:John Wiley and Sons,1990,85-96

[3] Canny J,Tézé A,Thouvenot R,et al.Disubstituted tungstosilicates.1.Synthesis,stability,and structure of the lacunary precursor polyanion of a tungstosilicate γ-SiW10O368-[J].Inorg Chem,1986,25:2114-2119

[4] 洪秀華.臨床微生物學和微生物檢驗實驗指導 [M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003,39-42

[5] 倪語星.抗微生物藥物敏感性試驗規(guī)范 [M].上海:科學技術(shù)出版社,2002,18