王晶娟，張貴君，楊 舒

（北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院中藥鑒定教研室，北京 100102）

變應(yīng)性鼻炎（AR）屬中醫(yī)學(xué)“鼻鼽”范疇，鼻康噴霧劑是由山豆根等中藥組方而成，具有清熱化濕，宣肺解表，芳香開竅等功效，主要用于治療AR。從現(xiàn)代藥理來(lái)看，鼻康噴霧劑具有抗炎、抗過(guò)敏和免疫調(diào)節(jié)作用。本實(shí)驗(yàn)從小鼠耳廓二甲苯致炎的影響、對(duì)大鼠蛋清足跖腫脹的影響和對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響3個(gè)經(jīng)典模型探討鼻康噴霧劑的抗炎作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ICR品系小鼠，體質(zhì)量18～22 g，動(dòng)物許可證編號(hào)：陜醫(yī)動(dòng)證字08-004號(hào)，SD品系大鼠，體質(zhì)量120～180 g，動(dòng)物許可證編號(hào)：陜醫(yī)動(dòng)證字08-005號(hào)。

以上動(dòng)物購(gòu)買后在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)2 d后用于正式實(shí)驗(yàn)。條件：清潔級(jí)，室溫：22～25℃，相對(duì)濕度：65%，12 h明暗交替照明，自由進(jìn)食、飲水。

1.2 藥物與試劑 鼻康噴霧劑，規(guī)格：10 mL/瓶，（北京宏泰康達(dá)醫(yī)藥科技有限公司）；醋酸潑尼松片，規(guī)格：5 mg/片，（浙江仙琚制藥有限公司，批號(hào)：051186）；0.9%氯化鈉注射液，規(guī)格：500 mL/瓶，（陜西華山制藥有限公司，批號(hào)：05101201）；二甲苯（化學(xué)純），規(guī)格：500mL/瓶，（西安化學(xué)試劑廠，批號(hào)：840613）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 鼻康噴霧劑對(duì)小鼠耳廓二甲苯致炎的影響

2.1.1 分組與給藥 ICR品系小鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22g，隨機(jī)分為5組，每組10只。第1組為空白對(duì)照組，給等容量生理鹽水；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，予醋酸潑尼松片0.005 g/kg；第3組為小劑量組，鼻康噴霧劑0.35 g/kg；第4組為中劑量組，予鼻康噴霧劑0.70 g/kg；第 5組為大劑量組，予鼻康噴霧劑1.4 g/kg。灌胃給藥，1次/d，連續(xù)3 d。

2.1.2 指標(biāo)測(cè)定 末次給藥后1 h，各組小鼠右耳涂抹二甲苯0.05 mL/只，左耳作對(duì)照，15 min后處死動(dòng)物，用直徑8 mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下，分別稱重，以左、右耳片質(zhì)量之差為腫脹度，比較各組腫脹度的差異。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，用組間t檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[1]。

2.2 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠蛋清足跖腫脹的影響

2.2.1 分組與給藥 SD大鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量120～180 g，隨機(jī)分為5組，每組10只。第1組為空白對(duì)照組，給等容量生理鹽水；第2組為陽(yáng)性對(duì)照組，醋酸潑尼松片0.005 g/kg；第3組為小劑量組，鼻康噴霧劑0.25 g/kg；第4組為中劑量組，鼻康噴霧劑0.5 g/kg；第5組為大劑量組，鼻康噴霧劑1.0 g/kg。灌胃給藥，1次/d，連續(xù)3 d。

2.2.2 指標(biāo)測(cè)定 末次給藥后1 h，各組動(dòng)物右后足跖皮下注射100%蛋清0.05 mL/只，分別測(cè)定致炎前和致炎后1、2、4、6 h右后足跖容積。以致炎前后容積之差值作為腫脹度，比較各組腫脹度的差異。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，用組間t檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[2]。

2.3 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響

2.3.1 分組與給藥 分組方法和給藥劑量同2.2.1。灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7 d。

2.3.2 指標(biāo)測(cè)定 給藥前各組大鼠乙醚麻醉，無(wú)菌條件下分別于左右大腿根部皮下植入50 mg滅菌棉球，術(shù)后當(dāng)日開始灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7 d。第8天處死大鼠，將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出，剔除脂肪組織，放入烘箱70℃烘干，稱質(zhì)量。將稱得的質(zhì)量減去棉球原質(zhì)量既得肉芽腫質(zhì)量，比較各組肉芽腫質(zhì)量，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，正態(tài)分布資料組間比較采用單因素方差分析，偏態(tài)資料組間比較采用秩和檢驗(yàn)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 鼻康噴霧劑對(duì)小鼠耳廓二甲苯致炎的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。鼻康噴霧劑大、中、小劑量組小鼠耳廓腫脹度與空白對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鼻康噴霧劑可明顯減輕小鼠耳廓腫脹度。

表1 鼻康噴霧劑對(duì)小鼠耳廓二甲苯致炎的影響 (±s)Tab.1 The effect of NHSA on the auricular swelling in mice(±s)

表1 鼻康噴霧劑對(duì)小鼠耳廓二甲苯致炎的影響 (±s)Tab.1 The effect of NHSA on the auricular swelling in mice(±s)

注：與空白對(duì)照組比較：*P<0.05，**P<0.01。

組別空白對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組大劑量組中劑量組小劑量組劑量20 mL/kg 0.005 g/kg 1.40 g/kg 0.70 g/kg 0.35 g/kg n 1010101010腫脹度（mg）12.05±1.524.06±1.08**3.42±3.32**5.95±2.04**10.30±1.75*

3.2 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠蛋清足跖腫脹的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。鼻康噴霧劑大、中、小劑量組在致炎后2 h大鼠右后足跖腫脹度明顯減小，4～6 h時(shí)作用最為明顯，與空白對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05 或 P＜0.01）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鼻康噴霧劑可減輕蛋清所致的大鼠右后足跖腫脹度。

3.3 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。鼻康噴霧劑大、中、小劑量組大鼠肉芽腫質(zhì)量與空白對(duì)照組比較明顯減?。≒＜0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鼻康噴霧劑對(duì)大鼠棉球肉芽組織增生有抑制作用。

表2 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠蛋清足跖腫脹的影響(±s)Tab.2 The effect of NHSA on rat paw edema(±s)mL

表2 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠蛋清足跖腫脹的影響(±s)Tab.2 The effect of NHSA on rat paw edema(±s)mL

注：與空白對(duì)照組相比較：*P＜0.05，**P＜0.010。

組別 n劑量 致炎后右后足跖腫脹度差值空白對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組大劑量組中劑量組小劑量組10 mL/kg 0.005 g/kg 1.0 g/kg 0.5 g/kg 0.25 g/kg 1010101010致炎前(mL)1.32±0.121.36±0.091.43±0.131.41±0.101.38±0.161 h 0.99±0.220.91±0.340.89±0.241.01±0.191.12±0.232 h 1.10±0.290.94±0.350.75±0.19*0.77±0.18*0.91±0.204 h 1.04±0.260.71±0.31**0.66±0.22**0.72±0.17**0.78±0.20**6 h 0.80±0.200.40±0.16**0.45±0.13**0.50±0.21**0.65±0.23

表3 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響(±s)Tab.3 The effect of NHSA on Cotton Ball Granuloma in rats(±s)

表3 鼻康噴霧劑對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響(±s)Tab.3 The effect of NHSA on Cotton Ball Granuloma in rats(±s)

注：與空白對(duì)照組相比較：*P<0.05。

組別空白對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組大劑量組中劑量組小劑量組劑量10mL/kg 0.005 g/kg 1.0 g/kg 0.5 g/kg 0.25 g/kg n 1010101010肉芽腫質(zhì)量(mg/100g體質(zhì)量)224.99±83.09136.74±46.61*144.61±25.82*163.78±21.49*210.42±69.60

4 討論

小鼠耳廓二甲苯致炎、大鼠蛋清足跖腫脹、大鼠棉球肉芽腫的動(dòng)物模型為經(jīng)典的炎癥模型，也是藥物抗炎作用最基本的評(píng)價(jià)方法。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出鼻康噴霧劑能夠減輕二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度、減輕蛋清所致的大鼠右后足跖腫脹度、對(duì)大鼠棉球肉芽組織增生有抑制作用，充分說(shuō)明其具有抗炎的作用。

[1] 徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:911-914.

[2] 陳 奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社,1994:71-310.