郭正兵，崔 香

(江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 句容 212400)

草莓營養(yǎng)豐富，口感好，老少皆宜，市場前景廣闊，栽培面積不斷擴(kuò)大。然而，草莓病毒病的危害可使草莓減產(chǎn)30% ～80%［1］，我國因草莓病毒病每年減產(chǎn)35萬t，直接經(jīng)濟(jì)損失30億元［2］。世界上已知的草莓病毒有20多種，我國常見的有4種，即草莓輕型黃邊病毒 (SMYEV)、草莓斑駁病毒 (SMDV)、草莓皺縮病毒 (SCrV)、草莓鑲脈病毒 (SVBV)，我國草莓主栽區(qū)均存在上述4種病毒［3］。近年來，長江流域草莓植株嚴(yán)重退化主要是病毒引起，大面積植株感染率50%［4］。防治草莓病毒病，提高草莓產(chǎn)量，主要靠應(yīng)用無病毒的草莓苗。目前，美國、日本等發(fā)達(dá)國家全部使用無病毒的草莓苗。要使我國草莓生產(chǎn)穩(wěn)步發(fā)展，生產(chǎn)無病毒的草莓苗非常重要。

目前，雖然尚未找到根治草莓病毒病的有效藥物，但是利用組織培養(yǎng)技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)草莓脫毒苗的快繁生產(chǎn)。近幾年來這一領(lǐng)域的研究已經(jīng)有較多報(bào)道，也建立了一些重要草莓品種的生產(chǎn)技術(shù)體系［5］。但在脫毒苗生產(chǎn)及組培快繁方面，積累的技術(shù)要點(diǎn)更多的是屬于經(jīng)驗(yàn)性的，常常因?yàn)椴葺贩N或研究報(bào)道的不同而存在較大差異。為此，筆者主要就不同品種草莓脫毒試管苗移栽訓(xùn)化的有關(guān)影響因素及田間繁殖表現(xiàn)進(jìn)行了探討，旨在為最終建立簡易高效的草莓脫毒苗的繁育體系，為進(jìn)一步開展相關(guān)研究工作奠定一定基礎(chǔ)，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)于2008－2009年在江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院北校區(qū)草莓生產(chǎn)基地進(jìn)行。當(dāng)?shù)貙儆诒眮啛釒喜考撅L(fēng)氣候區(qū)，溫、光、水協(xié)調(diào)，四季分明。年平均氣溫15.1℃，平均年降水量1 028.6 mm，年日照時(shí)數(shù)2 098.7 h，無霜期225 d。土壤屬于寧鎮(zhèn)丘陵下蜀黃土母質(zhì)發(fā)育的馬肝土，0～20 cm土層有機(jī)質(zhì)含量 16.5 g·kg－1，全氮含量 1.2 g·kg－1，速效磷 8 mg·kg－1，速效鉀 70 mg·kg－1，土壤 pH值6.5。

供試草莓品種為江蘇寧鎮(zhèn)地區(qū)主栽培品種:明寶、豐香和紅頰，均為江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院農(nóng)藝系組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 試管苗的煉苗與移栽

初步煉苗。將培養(yǎng)瓶上的扎口繩或皮筋松開，只去掉外層的聚丙烯膜，保留內(nèi)層的白紙，不要將瓶口包扎物全部去掉，因?yàn)榇藭r(shí)的草莓組培苗莖葉等組織器官表面還沒有長出角質(zhì)層，若暴露于空氣中，極易因失水導(dǎo)致死亡。角質(zhì)層的生長是一個(gè)循序漸進(jìn)的過程，讓組培苗初步接觸空氣，可誘導(dǎo)植株長出角質(zhì)層。2～3 d后移去瓶口包扎物，讓組培苗充分接觸空氣，再過2～3 d后，組培苗對外界環(huán)境已逐漸適應(yīng)，且培養(yǎng)基已開始長出菌類，此時(shí)進(jìn)行組培苗出瓶煉苗移栽。

小心地用鑷子，最好用竹木鑷子，或在鑷子尖部套上橡膠管，夾持組培苗，將苗從瓶中移出，用流水慢慢沖凈植株根部的培養(yǎng)基，注意切勿傷及根部的根毛，更不能用手搓動(dòng)根部。培養(yǎng)基一定要用流水沖洗干凈，否則，易引起根部病菌感染，影響脫毒苗的成活率［5－8］。

移栽。將3個(gè)品種的脫毒試管苗 (生長勢良好，根系狀況相近)分別為2008年5月20日、8月1日和10月25日進(jìn)行3次移栽于大棚內(nèi)，每次移栽依據(jù)品種分3個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)分別設(shè)置3種不同基質(zhì)處理，園土∶泥碳∶河沙∶腐熟廄肥A 1.0∶1.0∶0.5∶0.5(常用復(fù)合配方之一)，B 0∶1.0∶0∶0.5(常用于園藝作物生產(chǎn))，C 1.0∶0∶0∶0.5(常用于園藝作物生產(chǎn))。3種配方基質(zhì)在使用前均先采用50%多菌靈400倍液進(jìn)行處理，3次重復(fù)。大棚遮蓋防蟲網(wǎng)，預(yù)防蚜蟲叮咬幼苗傳播病毒［9］，栽后加強(qiáng)管理。

1.3 脫毒二代苗的培育

2009年3月1日，對明寶、豐香、紅頰3個(gè)品種的一代苗進(jìn)行選優(yōu)，選取生長健壯苗 (3葉1心)作為繁育母株，按常規(guī)繁育方法進(jìn)行大田繁殖，畦寬150 cm，定植于畦的中央。試驗(yàn)依品種分3個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積為667 m2，每小區(qū)內(nèi)根據(jù)種苗種類進(jìn)行分組，分脫毒苗和常規(guī)苗繁育組，定植株數(shù)為300株，其中脫毒苗200株，常規(guī)苗100株，株距為100 cm。對上述品種進(jìn)行比較試驗(yàn)。3個(gè)品種進(jìn)行隔離繁殖，全程防蟲網(wǎng)覆蓋，各小區(qū)肥水管理水平一致。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同移栽時(shí)期對試管苗成活率的影響

在沒有控溫設(shè)備的條件下，移栽時(shí)期是試管苗能否成活的關(guān)鍵因素之一。從表1可以看出，夏季移栽不利于試管苗成活。通過對1 800株試管苗的移栽試驗(yàn)看出，剛剛移出的試管苗特別不耐25℃以上高溫。溫度在15～25℃之間移栽試管苗都可以有較高的成活率。

2.2 不同移栽基質(zhì)對試管苗成活率的影響

從圖1可以看出，在基質(zhì)A中3種試管苗成活率均較高，移栽成活率分別為:明寶91.0%;豐香88.1%;紅頰81.2%;基質(zhì)C中試管苗成活率最低，其中紅頰品種只有38.1%。園土∶泥碳∶河沙∶腐熟廄肥1.0∶1.0∶0.5∶0.5為配方的基質(zhì)不僅能透性較好，而且營養(yǎng)較為充分，適宜作本地區(qū)草莓試管苗的移栽基質(zhì)。

表1 不同移栽期對試管苗成活率的影響

圖1 3種不同基質(zhì)對試管苗成活率的影響

2.3 不同移栽基質(zhì)對試管苗生長的影響

以豐香脫毒苗為例，在試管苗移栽6周后，調(diào)查不同基質(zhì)對試管苗生長發(fā)育的影響。2008年6月1日調(diào)查結(jié)果 (表2)，豐香脫毒在基質(zhì)A中表現(xiàn)最好，根系發(fā)達(dá)、葉大、色濃、植株高，葉片葉綠素含量最高，利于光合作用。在基質(zhì)C中移栽苗生長發(fā)育狀況最差:葉小、色淡，葉綠素含量低，光合效率低。

表2 豐香脫毒苗在不同基質(zhì)中的生長表現(xiàn)

2.4 同一基質(zhì)不同品種試管苗生長發(fā)育的差異

以基質(zhì)A為試驗(yàn)基質(zhì)，于第1次移栽 (4月20日)后第8周，即6月16日對每個(gè)品種隨機(jī)取樣20株，觀察、統(tǒng)計(jì)各品種的形態(tài)指標(biāo)，比較各品種之間的差異。從表3看出3種試管苗移栽之后，植株生長表現(xiàn)出較大的差異:明寶表現(xiàn)最好，各形態(tài)指標(biāo)增長率明顯高于另2個(gè)品種，紅頰表現(xiàn)較差，試管苗移栽后初期出現(xiàn)葉片發(fā)黃、枯萎的現(xiàn)象，后期草莓苗逐漸恢復(fù)，新長出的葉片濃綠，但影響了草莓苗的生長量，植株普遍表現(xiàn)弱小。

表3 不同品種試管苗的生長比較

2.5 無病毒二代苗的培育

2009年5月28日，在每個(gè)小區(qū)隨機(jī)抽樣50株，初步觀察3個(gè)品種的繁殖系數(shù)及對當(dāng)?shù)刂饕牟『Π追鄄『吞烤也〉母腥厩闆r (表4)。

表4 不同品種二代苗的田間表現(xiàn)

3個(gè)品種的繁殖能力存在較大差異:不論是脫毒苗還是常規(guī)苗，3個(gè)品種的繁殖系數(shù)均表現(xiàn)出一定的差異性:明寶和豐香品種的繁殖能力均較強(qiáng)，最強(qiáng)的是明寶品種，脫毒苗繁殖系數(shù)高達(dá)54倍，紅頰品種表現(xiàn)較差，常規(guī)苗的繁殖系數(shù)只有8倍。

脫毒苗和常規(guī)苗繁殖能力的差異:3個(gè)品種脫毒試管苗的繁殖系數(shù)均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常規(guī)苗，分別是常規(guī)苗繁殖系數(shù)的2.5、2.6和3.2倍。紅頰品種在此方面的差異性表現(xiàn)較為明顯。

3個(gè)品種田間抗病性差異:明寶和豐香抗病性較強(qiáng)，尤其是脫毒苗，幾乎不感染病害，常規(guī)苗只對白粉病輕微感染，紅頰種苗在此方面差異最大，脫毒苗只對炭疽病有輕微感染，而常規(guī)苗卻嚴(yán)重感染炭疽病，中度感染白粉病。

3 小結(jié)與討論

試管苗的煉苗時(shí)間以春夏季 (5－6月)和秋季 (9－10月)最為適宜，此時(shí)外界溫度和濕度均較理想，成活率高，管理方便，煉苗后可接著繁殖一代苗，達(dá)到生長快，匍匐莖抽生多，一代苗繁殖量大，能在每2年春季提供更多的二代苗繁育母苗。

對于草莓試管苗移栽技術(shù)研究已有很多報(bào)道，但對于移栽基質(zhì)的選擇，當(dāng)前國內(nèi)外一致認(rèn)為草炭土、蛭石、珍珠巖等是蔬菜花卉理想的育苗基質(zhì)［1］。本試驗(yàn)為了方便技術(shù)的推廣應(yīng)用，用最為常見的泥炭、泥土、河沙和腐熟廄肥配成不同的基質(zhì)。結(jié)果表明，只要保證試管苗移栽的溫度和濕度，將上述4種成份按照一定的比例進(jìn)行組合，均可保證試管苗移栽的成活率。泥炭富含大量營養(yǎng)元素，尤其含有高濃度的速效氮，由于草莓試管苗馴化比較脆弱，對基質(zhì)溶液中高濃度離子反應(yīng)敏感，易造成肥害，生長受到影響;而純泥土的肥力又不足，試管苗的生長差，故將園土和泥炭按1∶1的比例混合，再加0.5份的河沙 (提高通透性)和0.5份的腐熟廄肥 (提高肥力)，極大地提高了試管苗的移栽成活率，并能提高試管苗的質(zhì)量。

組織脫毒苗的繁殖系數(shù)均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常規(guī)苗，二代苗的抗病能力也顯著提高，但在供試的3個(gè)品種中，紅頰對炭疽病較為敏感，抗性較差，本試驗(yàn)中對此品種沒有采取避雨繁殖育苗，故在生產(chǎn)過程中可針對性地采取一些保護(hù)措施，以提高其種苗的繁殖系數(shù)及抗病能力。

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