王 軍,張秀鳳,宋予震,霍 軍

(鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校,河南 鄭州 450011)

訶子為常用中藥之一,為使君子科植物,訶子的干燥果實(shí)又名訶黎勒或隨風(fēng)子。其主要成分為鞣酸[1]。本品長圓形或卵圓形,長 2～4 cm,直徑2～2.5 cm。表面黃棕色或暗棕色,略具光澤,有5～6條縱棱線及不規(guī)則的皺紋,基部有圓形果梗痕。質(zhì)堅(jiān)實(shí)。果肉厚0.2～0.4 cm,黃棕色或黃褐色。果核 1.5～2.5 cm,直徑 1～1.5 cm,淺黃色,粗糙,堅(jiān)硬。無臭,味酸澀后甜?，F(xiàn)代藥理試驗(yàn)證明,訶子具有良好的斂郁澀腸而止瀉、降火利咽、調(diào)和藥性、解毒、抑菌、殺滅或抑制惡性腫瘤細(xì)胞等作用,臨床應(yīng)用廣泛,尤其在民族醫(yī)學(xué)藏藥和蒙藥中最為常用。在藏藥學(xué)經(jīng)典著作《晶珠本草》中,訶子被稱“藏藥之王”。訶子在蒙藥中也是使用頻率最高的藥物[2]。例如訶子的提取物有較強(qiáng)的抑菌作用,臨床上多用于肺部及消化道的感染。訶子在我國資源豐富且具有多方面的藥理活性,在疾病預(yù)防、治療以及飼料添加劑等諸方面都不失為一種應(yīng)用前景廣闊的藥物,具有廣泛的開發(fā)價(jià)值,尤其是在治療水瀉等胃腸道疾病方面有很重要的作用[3],因此對(duì)訶子的作用機(jī)理及臨床應(yīng)用要更進(jìn)一步的研究。

本試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用離體家兔小腸灌流,觀察了訶子提取物導(dǎo)致離體小腸平滑肌收縮力的作用,并初步探討了其作用機(jī)制。

1 材料、試劑和儀器

試驗(yàn)材料:訶子粗提物由鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校提供。試驗(yàn)用家兔購自鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。試驗(yàn)儀器:恒溫水浴鍋、天平、張力換能器、平滑肌離體灌流裝置、生物信號(hào)采集系統(tǒng)、100～1000μL微量移液器。試驗(yàn)試劑 ∶乙酰膽堿(1∶100000)、酚妥拉明、心得安、臺(tái)氏液等。

2 藥液濃度的配置

用天平稱取訶子粗提物1 g置于有刻度的試管中,加入臺(tái)式液9mL,搖勻使之充分溶解,所得相當(dāng)于生藥1 g/mL藥液。

3 試驗(yàn)方法

3.1 標(biāo)本制備 將禁食24 h的兔擊暈,快速剖腹,分別剪下十二指腸、空腸和回腸2～3 cm左右,分別放入38℃臺(tái)式液中輕輕漂洗,取活動(dòng)較有規(guī)律的一段長2～3 cm的腸段,一端固定于浴管底部的小鉤上,另一端用手術(shù)線連接固定于張力換能器的應(yīng)變簧片上。將標(biāo)本浸置于含37℃臺(tái)式液的浴管中。通過調(diào)整使腸管及其連線有一定的緊張度,即有一定的前負(fù)荷,一般前負(fù)荷為1～4 g。腸段勿牽拉過緊或過松,腸段避免與周圍管壁接觸,以免摩擦[4-6],用塑料管將充滿氧氣的氣囊與浴管底部的進(jìn)氣管相連,調(diào)節(jié)塑料管上的螺旋夾,以控制氣流量。

3.2 試驗(yàn)記錄與加藥 待腸管活動(dòng)穩(wěn)定后再用移液器加樣,同時(shí)打下標(biāo)記,以收縮頻率(次/min)幅度和收縮張力(g)為指標(biāo),用生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)通過第3通道紀(jì)錄。采用生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法,所有數(shù)據(jù)用均值標(biāo)準(zhǔn)差(D)表示,各組均值間的差異性用t檢驗(yàn)判斷,P＜0.05表示差異顯著,P＜0.01表示差異極顯著。

4 結(jié)果與分析

4.1 訶子粗提物對(duì)離體小腸平滑肌腸管收縮活動(dòng)的影響 訶子粗提物1.0 g/mL,可使十二指腸、空腸和回腸的收縮幅度減小、張力明顯降低(P＜0.05),緊張性下降,收縮頻率減慢,但無顯著差異(P＞0.05)(見圖 1、圖 2和圖3),試驗(yàn)后灌流離體小腸,腸管逐漸又恢復(fù)至加樣前正常的波峰。

4.2 訶子的粗提物對(duì)十二指腸的作用機(jī)制

4.2.1 十二指腸正常情況下先加入乙酰膽堿阻斷膽堿能M受體,然后再逐漸加入1 g/mL訶子的粗提物并且逐漸加大其劑量,可以得知小劑量時(shí)與單獨(dú)加入1 g/mL訶子的粗提物相比較無明顯差異(P＞0.05),但隨著訶子粗提物劑量的加大差異開始顯著(P＜0.05)(見圖4),表明訶子粗提物對(duì)十二指腸的抑制可能由膽堿能M受體介導(dǎo),但訶子粗提物激活M受體抑制十二指腸的運(yùn)動(dòng)與訶子的濃度相關(guān)。

4.2.2 用酚妥拉明阻斷腎上腺α受體和用心得安 腎上腺β受體后,再加入1 g/mL訶子的粗提物,可以得知與單獨(dú)加入1 g/mL訶子的粗提物相比較,十二指腸張力降低百分率差異極顯著(P＜0.01)(見圖5和圖6)。表明訶子粗提物對(duì)酚妥拉明有拮抗作用,其抑制可能是由腎上腺α受體或腎上腺β受體介導(dǎo)。

5 討論

5.1 訶子含有多種化學(xué)成分,其主要成分為鞣酸,不同炮制工藝對(duì)訶子中鞣酸質(zhì)含量有影響[9]。本試驗(yàn)中訶子的粗提物可以使家兔的十二指腸、空腸和回腸的平滑肌有顯著的抑制活動(dòng),這一結(jié)果與以往的報(bào)道訶子具有良好的斂郁澀腸而止瀉[7]相符,可能是與鞣酸的作用相關(guān)。

5.2 訶子粗提物對(duì)家兔的離體十二指腸、空腸和回腸有明顯抑制作用,可使十二指腸、空腸和回腸的收縮幅度減小、張力明顯降低,緊張性下降,收縮頻率減慢不顯著,表明訶子粗提物可能通過抑制小腸運(yùn)動(dòng)的張力使腸管內(nèi)容物停留時(shí)間延長從而發(fā)揮其止瀉作用的。

5.3 訶子可用于治療消化系統(tǒng)疾病,如栗福星就報(bào)道過訶子對(duì)牛腹瀉的治療。這可能與其抑制小腸的收縮活動(dòng)有關(guān)。小腸是消化吸收的主要場所,其機(jī)械活動(dòng)受到神經(jīng)和體液因素調(diào)節(jié),也受中藥中某些化學(xué)物質(zhì)的調(diào)節(jié)。如β受體激活可使小腸平滑肌舒張,本試驗(yàn)中用膽堿能可以阻斷M受體,酚妥拉明可以阻斷β受體,心得安可以阻斷α受體 ,然后在兔離體十二指腸中加入訶子粗提物的結(jié)果中可推之訶子的作用可能與激活腎上腺α、β受體和膽堿能M受體都有關(guān),但與激活膽堿能M受體與訶子粗提物的濃度相關(guān),從而提示訶子含有抗膽堿能受體成分,但需要在用藥方面應(yīng)考慮其劑量。訶子對(duì)腸管的作用機(jī)制與其劑量的使用方面還有待于進(jìn)一步研究,才能使訶子在開發(fā)應(yīng)用方面有效的利用。

[1]李經(jīng)緯,余瀛鰲,蔡景峰,等.中醫(yī)大辭典[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1987:821.

[2]王金華,孫芳云,杜冠華,等.訶子的藥理作用研究進(jìn)展[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2006,12(6):22-24.

[3]栗福星,劉利勇.巧用訶子治療牛水瀉[J].中國牛業(yè)科學(xué),2007,33(2):5.

[4]寧榴賢,曾凡潘,吳興達(dá),等.磁處理黨參藥液對(duì)小腸平滑肌收縮活動(dòng)影響的研究[J].生物磁學(xué),2004,4(3):6-9.

[5]宋士軍,李芳芳,張麗華,等.何首烏對(duì)家兔小腸平滑肌收縮活動(dòng)和電活動(dòng)的影響[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2007,28(2):85-88.

[6]張麗華,宋士軍,孫英,等.魚腥草對(duì)家兔小腸平滑肌收縮活動(dòng)和電活動(dòng)的影響[J].河北中醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào),2007,22(1):3-5.

[7]蘇孝共,朱光輝,王增壽,等.訶子的炮制研究[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2006,18(5):49-50.