孫國(guó)慶，康小紅，劉衛(wèi)星

（內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司研發(fā)中心，內(nèi)蒙古呼和浩特011500）

牛乳中乳鐵蛋白含量變化規(guī)律的研究

孫國(guó)慶，康小紅，劉衛(wèi)星

（內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司研發(fā)中心，內(nèi)蒙古呼和浩特011500）

為了解牛乳中乳鐵蛋白隨著季節(jié)、飼養(yǎng)環(huán)境而變化的規(guī)律，利用毛細(xì)管電泳法分別檢測(cè)從牧場(chǎng)、小區(qū)、奶戶采集牛乳樣中乳鐵蛋白，周期為1年。結(jié)果得出，牧場(chǎng)牛乳含量高于小區(qū)，奶戶牛乳中LF最低，1月份牧場(chǎng)牛乳L(zhǎng)F含量達(dá)最高，為0.16 mg/mg，而奶戶牛乳中LF最低，達(dá)0.08 mg/mg。9月份牧場(chǎng)、小區(qū)和奶戶牛乳L(zhǎng)F含量達(dá)最低，分別達(dá)0.03、0.05和0.06 mg/mL。結(jié)果表明隨著管理水平的提高和氣候的變冷，牛乳中乳鐵蛋白含量逐漸升高，這將有利于改進(jìn)飼養(yǎng)管理?xiàng)l件提供有效的理論參考。

牛乳；乳鐵蛋白；毛細(xì)管電泳法

Abstract:In order to study the contents of bovine milk LF from pasture,district and dairy farmer in during one year.As the results,pasture was higher than district and dairy farmer.Pasture LF contention would reach 0.16 mg/mg,dairy farmer LF would reach 0.08 mg/mg in January.September,pasture,district and dairy farmer were all reached to the minimum,as 0.03、0.05 and 0.06 mg/mL,respectively.It was showed that the content of LFwould increase with the better level of management and the colder climate.

Key words:bovine milk；llactoferrin（LF）；capillary electrophoresis（CE）

牛乳蛋白質(zhì)主要分為酪蛋白和乳清蛋白兩大類(lèi)。牛乳清蛋白主要有提高人體免疫力等活性功能的蛋白組成，含有α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白和其他蛋白。乳鐵蛋白（Lactoferrin，下文簡(jiǎn)稱(chēng)LF）是一種分子量為80 u～100 u的糖蛋白，廣泛存在于乳汁、唾液、淚液等外分泌液或血漿、中性粒細(xì)胞中。牛乳中乳鐵蛋白的含量為0.7 g/L[1-3]。乳鐵蛋白具有廣譜抗菌、抗病毒感染作用，能調(diào)節(jié)體內(nèi)鐵的平衡；調(diào)節(jié)骨髓細(xì)胞的生成，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)；調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體抗病能力；抑制人體腫瘤細(xì)胞的作用；能同多種抗生素及抗真菌制劑協(xié)同作用，更有效地治療疾病[1-3]。據(jù)報(bào)道，牛乳中乳鐵蛋白會(huì)隨奶牛飼養(yǎng)方式、品種、泌乳期及氣溫等因素的影響而發(fā)生一定的變化。牛乳成分的含量變化對(duì)生產(chǎn)產(chǎn)品有決定性作用，如乳鐵蛋白含量高加工保健乳制品。所以了解乳鐵蛋白變化情況，能為生產(chǎn)加工提供理論參考[4-6]。

本文將利用毛細(xì)管電泳法主要研究牛乳中乳鐵蛋白隨不同季節(jié)在不同飼養(yǎng)環(huán)境下變化規(guī)律，從而為調(diào)整生產(chǎn)加工提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 牛乳樣品

選擇3種飼養(yǎng)模式的奶站，每個(gè)奶站選擇同齡泌乳奶牛，并采取5頭奶牛混合樣，周期為12個(gè)月，具體信息見(jiàn)表1。

表1 樣品信息Table 1 Sample information

1.1.2 藥品

Tris、乙二胺四乙酸、β-巰基乙醇、3-嗎啉代丙烷磺酸、尿素、檸檬酸、檸檬酸三鈉、氫氧化鈉：分析純,均來(lái)自SERVA；水：超純水；乳鐵蛋白：Sigma。

1.1.3 試驗(yàn)設(shè)備

P/ACE MDQ高壓毛細(xì)管電泳儀,配有二極管陣列檢測(cè)器：美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司；1875D超聲波清洗機(jī)：美國(guó)Crest公司，VORTEXGEMIE2旋渦混合器：美國(guó)SCIENTIFIC Instruments公司；Z-36HK臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)：德國(guó)Hermle公司。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)條件

檢測(cè)參數(shù)：溫度控制在45℃，使用直徑為75 μm、長(zhǎng)度為600 mm的未涂層石英毛細(xì)管柱，紫外光檢測(cè)器，電動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣壓力為0.2 psi（1 psi=6.895 kPa），工作電壓為20 kV。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

檢測(cè)得到標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。

從圖中看出LF線性回歸方程為y=8×106x-0.0092，r2=0.9993,線性范圍 0.0625 mg/mL～1 mg/mL。

1.2.3 樣品處理和檢測(cè)

把檢測(cè)樣品加入15mL的離心管中，在4000 r/min離心條件下離心10 min。準(zhǔn)確提取樣品40 μL，之后加上樣管中，使用毛細(xì)管電泳儀測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 牛乳中乳鐵蛋白隨季節(jié)變化規(guī)律

經(jīng)過(guò)試驗(yàn)檢測(cè)出乳鐵蛋白含量，見(jiàn)表2和圖2。

表2 乳鐵蛋白檢測(cè)結(jié)果Table 2 The results of detection LFmg/mL

從表2、圖2能看出，牧場(chǎng)牛乳中乳鐵蛋白含量普遍高于小區(qū)和奶戶，而奶戶牛乳中的LF含量最低。這可能與飼養(yǎng)條件有關(guān)，由于牧場(chǎng)飼養(yǎng)比小區(qū)規(guī)?；绎曃癸暳洗钆漭^合理，故牛乳中乳鐵蛋白比小區(qū)高；而小區(qū)又比奶戶飼養(yǎng)科學(xué)所以比奶戶的高；奶戶由于其飼養(yǎng)環(huán)境缺乏科學(xué)性和飼喂飼料的不確定性等因素導(dǎo)致牛乳質(zhì)量顯著低于牧場(chǎng)和小區(qū)。

2.2 牛乳中乳鐵蛋白隨飼養(yǎng)模式變化規(guī)律

從表2、圖2還能看出1月份牧場(chǎng)、小區(qū)、奶戶乳中乳鐵蛋白含量達(dá)到最高，分別為0.16、0.12和0.08mg/mL。這可能由于冬天，天氣較冷飲水量降低，從而蛋白質(zhì)濃度提高所致。而9月份幾乎3種飼養(yǎng)模式的牛乳中LF含量達(dá)到最低，分別為0.06、0.05和0.03 mg/mL。這可能是9月份的天氣正好是雨水較少的炎熱天氣，奶牛飲水量較多，故導(dǎo)致牛奶水分增加乳鐵蛋白含量降低。整體來(lái)看，從1月份到9月份LF含量有逐漸降低現(xiàn)象，而9月份到12月份有逐漸升高現(xiàn)象。該結(jié)果符合Dellamoinica[7]和 Ngkwai hang[8]研究結(jié)果一致。

2.3 牛乳中乳鐵蛋白含量范圍

從2.1和2.2已證明了乳中乳鐵蛋白含量會(huì)隨牛乳的組分會(huì)因飼養(yǎng)方式和氣溫等因素的影響而發(fā)生一定的變化，但由于絕大部分原料乳是來(lái)自不同奶牛的混合牛乳，各種因素平均后差異就會(huì)減少，所以牛乳中乳鐵蛋白含量還是在一定范圍內(nèi)恒定不變，見(jiàn)表3。

表3 牛乳中乳鐵蛋白的濃度范圍Table 3 The range of LF contention in bovine milk

3 結(jié)論

飼料對(duì)牛乳成分含量起決定性作用。如長(zhǎng)期飼料不足，營(yíng)養(yǎng)不全，不僅使產(chǎn)乳量顯著下降，牛乳中非脂固形物含量也會(huì)減少。粗飼料喂給不足，精飼料過(guò)多，精粗飼料比例失調(diào)，會(huì)使牛乳中的含脂率下降；飼料中維生素缺乏，會(huì)直接影響到牛乳中這類(lèi)物質(zhì)的含量[9]。經(jīng)常受日光照射及放牧的牛，產(chǎn)乳量及固形物含量會(huì)增加，乳鐵蛋白含量也較高。

飼養(yǎng)管理模式是影響牛乳鐵蛋白含量的主要因素，隨著管理水平的提高乳中乳鐵蛋白含量也相應(yīng)的增加，而且隨著氣候的變冷乳鐵蛋白含量也逐漸升高。這將有利于改進(jìn)飼養(yǎng)管理?xiàng)l件提供有效的理論依據(jù)，至于相對(duì)應(yīng)產(chǎn)品中變化情況有待于進(jìn)一步研究。

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Study on Variation of Lactoferrin Content in Bovine Milk

SUN Guo-qing，KANG Xiao-hong,LIU Wei-xing
（Inner Mongolia Meng Niu Dairy Industry（Group）Co.Ltd R＆D Center，Huhhot 011500，Inner Mongolia,China）

2010-01-15

孫國(guó)慶（1981—），男（蒙古），研發(fā)員，碩士，主要從事乳制品研究與開(kāi)發(fā)。