王增義 河南省商丘市睢陽(yáng)區(qū)衛(wèi)校（4761002）馮興建 河南中醫(yī)學(xué)院（4500081） 宮洪濤 河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院（450008）

腦力蘇膠囊對(duì)血管性癡呆大鼠行為學(xué)及血液流變學(xué)的影響

王增義 河南省商丘市睢陽(yáng)區(qū)衛(wèi)校（4761002）
馮興建 河南中醫(yī)學(xué)院（4500081） 宮洪濤 河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院（450008）

目的 研究腦力蘇膠囊對(duì)血管性癡呆（VD）大鼠行為學(xué)及血液流變學(xué)的影響。方法 采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性阻斷法（2－VO）進(jìn)行，用Y型水迷宮檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，取血檢測(cè)血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果 水迷宮實(shí)驗(yàn)中，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠存在明顯的學(xué)習(xí)記憶障礙（P＜0.01）；與模型組比較，腦力蘇膠囊組、健腦健腦組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力得到改善且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組比較，腦力蘇膠囊組、健腦膠囊組高、中、低切全血黏度及血漿漿黏度降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與健腦膠囊組比較。腦力蘇膠囊組高、中、低切全血黏度及血漿黏度均比健腦膠囊組低，且中、低切全血黏度及血漿黏度均與健腦膠囊組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 腦力蘇膠囊組能改善模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，且能改善全血黏度及血漿黏度。

腦力蘇膠囊；血管性癡呆；學(xué)習(xí)記憶能力；血液流變學(xué)

血管性癡呆（VD）是指發(fā)生在腦血管病基礎(chǔ)上的以記憶、認(rèn)識(shí)、語(yǔ)言、視空間及人格等方面缺損為主要表現(xiàn)的獲得性智能障礙綜合征。本研究在觀察腦力蘇膠囊對(duì)VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及血液流變學(xué)的變化，以探討其對(duì)VD的作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 材料 ①動(dòng)物 健康、雄性SD大鼠80只，體重（280±20g），鼠齡2～3月，均由鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。單籠飼養(yǎng)，自由攝食與飲水，室溫18～20℃，日光輔助照明，維持每日光照12h。②藥物 腦力蘇膠囊由人參、枸杞子、熟地、靈芝、川芎、南星、冰片等藥物組成，由河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院提供。健腦膠囊（石家莊四藥有限公司）。③試劑 水合氯醛、肝素。④儀器 手術(shù)剪（直、彎）；微動(dòng)脈夾；尼龍線；手術(shù)縫線；縫合針；靜脈采血針；孔巾；手術(shù)固定板；肝素鈉抗凝管；采血針；LG-R-80A型自動(dòng)沖洗血液黏度儀；400R低溫離心機(jī)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 模型制作參照dela Torre等[1]采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性組斷法（2－VO）進(jìn)行，將大鼠經(jīng)腹腔注射10%水合氯醛300mg/kg麻醉，保證手術(shù)期間有自主呼吸，仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上，剪毛，頸部正中切開(kāi)，鈍性分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈（CCA）,套以1號(hào)手術(shù)線雙重結(jié)扎，逐層縫合。手術(shù)后肌肉注射青霉素40萬(wàn)U/只，每日1次，連續(xù)3d預(yù)防感染。模型復(fù)制大鼠1周后按神經(jīng)病學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[2]篩選合格的VD大鼠。將選模成功的63只VD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（JS組）、模型組（M組）、腦力蘇膠囊組（N組）、健腦膠囊組（JN組），每組15只，剩余另行處理。模型判定后即開(kāi)始給藥，腦力蘇膠囊組每天給腦力蘇膠囊1.8g/kg灌胃，連用1周。健腦膠囊治療組每天用健腦膠囊0.6g/kg灌胃，連用1周。模型組、假手術(shù)組給予生理鹽水，連用1周。

1.3 觀察方法 ①水迷宮試驗(yàn) 應(yīng)用 Y 型水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的評(píng)估。Y型水迷宮裝置分為一個(gè)長(zhǎng)臂(長(zhǎng)50cm)和兩個(gè)短臂(長(zhǎng)40cm)，各臂高45cm，寬30cm，長(zhǎng)臂為起始區(qū)，其中一個(gè)短臂為迷路區(qū)(盲端)，上覆有不透明塑料板，形成暗道，另一短臂為安全區(qū)，裝有平臺(tái)(30cm×10cm)，上方有燈光照明。以大鼠自迷宮起始區(qū)游至終點(diǎn)安全臺(tái)所需時(shí)間和途中進(jìn)入盲端的錯(cuò)誤次數(shù)，作為衡量學(xué)習(xí)、獲得鞏固記憶能力的指標(biāo)。每只大鼠于測(cè)試當(dāng)天共游水迷宮10次，測(cè)定學(xué)習(xí)成績(jī)；24h后重復(fù)上述過(guò)程測(cè)定記憶成績(jī)。在造模成功后及給藥1周的時(shí)間點(diǎn)各相應(yīng)大鼠均于處死前行Y型水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)定學(xué)習(xí)、記憶成績(jī)。游全程所用時(shí)間越長(zhǎng)，進(jìn)入暗道的錯(cuò)誤次數(shù)越多，說(shuō)明其學(xué)習(xí)記憶保持能力越差，提示學(xué)習(xí)記憶受損越重。②血液流變學(xué)指標(biāo) 學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試后，水合氯醛300mg/kg麻醉，將大鼠固定于手術(shù)臺(tái)上，觸及心臟搏動(dòng)最強(qiáng)處，于一次性靜脈采血針插入心臟，接肝素抗凝管，送入實(shí)驗(yàn)室。

2 結(jié)果

2.1 行為學(xué)觀測(cè) ①一般行為學(xué)觀測(cè) 造模前各組大鼠毛發(fā)光滑，飲食正常，行動(dòng)敏捷，反應(yīng)良好。造模后，逐漸出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍，嗜睡，飲食減少，豎毛，毛發(fā)稀疏少光澤。給藥后，異常的行為均有所緩解。而模型組大鼠體重減減輕，行動(dòng)遲緩，呆滯，毛發(fā)干枯等加減重。②各組大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)成績(jī)比較 見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)，水迷宮實(shí)驗(yàn)中，各組大鼠進(jìn)入盲端次數(shù)和游完全程呈假手術(shù)組－健腦膠囊組－腦力蘇膠囊組－模型組依次遞增趨勢(shì)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理表明，假手術(shù)組與模型組比較差異顯著（P＜0.01）；與模型組比較，腦力素膠囊治療組、健腦健腦組大鼠學(xué)習(xí)能力得到改善且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。③各組大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)記憶成績(jī)比較 見(jiàn)表2。表2為24h后復(fù)測(cè)結(jié)果，各組大鼠進(jìn)入盲端次數(shù)和游完全程時(shí)間所呈現(xiàn)趨勢(shì)與前相同。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理表明，假手術(shù)組與模型組比較差異顯著（P＜0.01）；與模型組比較，腦力素膠囊治療組、健腦健腦組大鼠記憶能力得到改善且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。④血液流變學(xué)結(jié)果 見(jiàn)表3。與模型組比較，腦力蘇膠囊組、健腦膠囊組高、中、低切全血黏度及血漿漿黏度降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；健腦膠囊組高、中、低切全血黏度及血漿漿黏度也有所降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與健腦膠囊組比較。腦力蘇膠囊組高、中、低切全血黏度及血漿黏度均比健腦膠囊組低，且中、低切全血黏度及血漿黏度均與健腦膠囊組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 各組大鼠游水迷宮實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)成績(jī)比較

表1 各組大鼠游水迷宮實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)成績(jī)比較

注：與JS組比較，**P＜0.01；與N組比較，* P＜0.05；與M組比較，＃P＜0.05；＃＃P＜0.05。下同

組別 n 游完水迷宮時(shí)間 進(jìn)入盲端次數(shù)/3min JS組M組N組JN組16 16 16 16 12.77±2.48* 26.10±2.55** 16.05±2.25# 19.78±3.13## 1.39±0.51* 4.02±2.23** 1.89±0.72# 2.47±0.85##

表2 各組大鼠游水迷宮實(shí)驗(yàn)記憶成績(jī)比較

表2 各組大鼠游水迷宮實(shí)驗(yàn)記憶成績(jī)比較

組別 n 游完水迷宮時(shí)間 進(jìn)入盲端次數(shù)/3min JS組M組N組JN組16 16 16 16 11.54±1.85* 25.83±2.68** 14.09±1.92# 18.79±2.62## 1.15±0.71* 3.61±0.59** 1.69±0.48# 2.23±0.67##

表3 各組大鼠全血黏度及血漿黏度的比較

表3 各組大鼠全血黏度及血漿黏度的比較

注：與M組比較，*P＜0.01,** p＜0.05；與JS組比較，＃P＜0.05,＃＃P＜0.05。與JN組比較，△P＜0.05

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3 討論

本實(shí)驗(yàn)采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性阻斷法（2－VO）制作了比較理想的VD模型，通過(guò)對(duì)各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)腦力蘇膠囊能明顯改善模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

VD的血液流變學(xué)機(jī)制，近年來(lái)已受到國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者的高度重視。全血黏度增高可降低腦血流，而血液流速減慢又可導(dǎo)致血黏度成倍增高，最終導(dǎo)致血栓形成，漸成癡呆。有研究表明VD患者多有血液流變學(xué)指標(biāo)異常，血液呈高凝狀態(tài)，腦血流速度減慢，使腦血流量降低，導(dǎo)致腦灌注進(jìn)一步減少，腦的能量代謝下降，從而導(dǎo)致VD癥狀加重，因此降低血液黏稠度，改善腦循環(huán)，增加腦血流量，促進(jìn)腦組織代謝對(duì)VD的治療極為重要[3]。

歷代醫(yī)家從不同角度對(duì)本病多有論述，多見(jiàn)于“善忘”、“白癡”、“呆病”、“呆癡”等疾病中，并對(duì)其病因病機(jī)進(jìn)行了詳細(xì)分析。清·王清任《醫(yī)林改錯(cuò)》認(rèn)為“高年無(wú)記性者，腦髓漸

空”，清·唐容川《中西醫(yī)匯通醫(yī)經(jīng)精義》認(rèn)為“事物之所以不忘，賴以記性，記在何處，則在腎經(jīng)，益腎生精，化為髓，而藏之于腦中”，陳士鐸在《辨證錄》中亦說(shuō)“人有年老而健忘，近事不記憶……人以為心血之枯，誰(shuí)知是腎水之竭乎？”總之本病病位在腦，涉及腎、肝、心、脾，病因病機(jī)總屬本虛標(biāo)實(shí)之證，其病機(jī)概論有虛（腎）、瘀、痰、火、風(fēng)、毒六端。腎精虧虛為本，貫穿本病始終；痰、瘀、風(fēng)、火、毒為標(biāo)，交互為患，主導(dǎo)著VD的不同病理階段。主導(dǎo)著VD的不同病理階段。痰瘀搏結(jié)是波動(dòng)期的主要病理特征，痰瘀風(fēng)火釀毒導(dǎo)致了病情的急劇下滑。腦力蘇膠囊由人參、枸杞子、熟地、靈芝、川芎、南星、冰片等藥物組成，具有益氣補(bǔ)腎、活血化痰通竅的功效。本方以補(bǔ)為主，以攻為輔，補(bǔ)腎填精藥重，滌痰化瘀量輕，溫腎重補(bǔ)脾輕，滌痰峻化瘀緩。腦力蘇膠囊通過(guò)改善異常的血液流變學(xué)，降低血液黏稠度，緩解血管痙攣，增加腦血流量，促進(jìn)缺血缺氧神經(jīng)細(xì)胞功能的恢復(fù)，這可能是提高患者智能的主要機(jī)制之一。

[1] de la Torre jc, Fortin T, Park GAS,et a1. Chroniccerebrovascular Insufficilency Induces dementia—like deficitsInaged rats. Brain Res.1992,582(2):186-195．

[2] 周文泉,于向東.關(guān)于血管性癡呆研究的思考[J].中醫(yī)雜志,2002,43 (4):299.

[3] Sh im Insop,Ha Y oon,Chung J Y,et al.A ssociation of learn ing and memory impairments with changs in the septohippocampal cholinergic systerm in rats with kaolin-induced hydrocephalus[J]. Neurosur,2003,53(2):416-452.

10.3969/j.issn.1672-2779.2010.10.168

1672-2779（2010）-10-0192-02

2010-03-23）