陳 彬,丁紅梅,楊興龍,陳 剛

(南通市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所,江蘇南通 226005)

氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定生食水產(chǎn)品中的揮發(fā)性N-亞硝胺

陳 彬,丁紅梅＊,楊興龍,陳 剛

(南通市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所,江蘇南通 226005)

利用二氯甲烷提取腌制生食水產(chǎn)品中的揮發(fā)性 N-亞硝胺,即:N-二甲基亞硝胺 (NDMA)、N-二乙基亞硝胺 (NDEA)、N-亞硝基吡咯烷 (NPYR)、N-二丙基亞硝胺 (NDPA).利用氣質(zhì)聯(lián)用儀采用選擇離子法 (SI M)進(jìn)行定性定量檢測(cè).本檢測(cè)方法前處理簡(jiǎn)單快捷,易于操作,線性相關(guān)系數(shù)分別可達(dá) 0.999 1、0.999 1、0.999 0、0.999 5;線性范圍分別可達(dá) 0～250μg/mL;方法重現(xiàn)性良好,其 RSD可達(dá) 1.49%～1.94%;回收率可達(dá) 90%～105%;靈敏度高,檢測(cè)限分別為 0.04μg/kg、0.025μg/kg、0.05μg/kg、0.01μg/kg.

揮發(fā)性亞硝胺;氣質(zhì)聯(lián)用;選擇離子法

0 引言

亞硝基化合物是一類重要的環(huán)境致癌物,人們已經(jīng)研究的 300多種亞硝基化合物中有 200多種是亞硝胺,其中 90%左右致癌作用已在大量的動(dòng)物試驗(yàn)中得到證實(shí)[1].亞硝胺由于相對(duì)分子質(zhì)量不同,可以表現(xiàn)為蒸氣壓力大小不同,能夠被水蒸氣蒸餾出來并不經(jīng)衍生化直接經(jīng)儀器測(cè)定的為揮發(fā)性亞硝胺,否則稱為非揮發(fā)性亞硝胺[2].我國(guó)制訂了部分亞硝胺檢測(cè)方法和限量標(biāo)準(zhǔn),即GB/T5009.26-2003《食品中 N-亞硝胺類的測(cè)定》和 GB2762-2005《食品中污染物限量》對(duì)海產(chǎn)品和肉制品中的 N-二甲基亞硝胺、N-二乙基亞硝胺做了限量要求.在 GB/T5009.26-2003中方法 1中采用氣相色譜 -熱能分析儀檢測(cè),雖然檢測(cè)靈敏度高,但是儀器檢測(cè)面窄,不適合推廣檢測(cè);方法 2中采用蒸餾法前處理復(fù)雜,耗時(shí)長(zhǎng).目前還見有報(bào)道用 GC/NPD[3],以及 SPME-GC/MS[4]等方法檢測(cè)的,但是一般都前處理復(fù)雜或成本高.本法前處理簡(jiǎn)單,耗時(shí)少,溶劑可以回收重復(fù)利用,成本低,檢測(cè)限能滿足定量要求.

1 試驗(yàn)方法

1.1 試劑

二氯甲烷:分析純,用全玻璃蒸餾裝置重蒸餾;無水硫酸鈉:分析純;N-二甲基亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品、N-二乙基亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品、N-亞硝基吡咯烷標(biāo)準(zhǔn)品、N-二丙基亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品:上海安譜.

1.2 儀器

Agilent 7890A/5975C氣相色譜 -質(zhì)譜儀:美國(guó) Agilent公司,配備 7683B自動(dòng)進(jìn)樣器、增強(qiáng)型化學(xué)工作站;色譜柱:HP—5MS毛細(xì)管色譜柱 (30 m×0.25 mm ×0.25μm);超聲波清洗儀KQ5200DA:常州諾基儀器有限公司.

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取已粉碎并混勻的樣品 20.0 g,加入適量的無水硫酸鈉混勻,用重蒸二氯甲烷超聲提取 3次,每次 40 mL.合并有機(jī)溶劑相,經(jīng)無水硫酸鈉過濾脫水后,在 40℃水浴下抽真空濃縮,定容至 1.0 mL,備用.

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液處理

N-亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)使用液:準(zhǔn)確稱取 4種N-亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品 0.1 g(精確到 0.000 1 g),用二氯甲烷定容至 100 mL,得 N-亞硝胺儲(chǔ)備液,濃度 1 mg/mL.

1.3.3 色譜條件

HP—5MS毛細(xì)管色譜柱;進(jìn)樣口溫度 200℃;分流進(jìn)樣,分流比 5︰1;載氣為氦氣 (純度99.999%),流速 1 mL/min;程序升溫:40℃下保持 1 min,以 9 ℃/min升至 200 ℃,保持 1 min,全部程序時(shí)間 19.7 min,自動(dòng)進(jìn)樣,進(jìn)樣量 1μL.

1.3.4 質(zhì)譜條件

電子轟擊 (EI)離子源;電子倍增器電壓1 301 eV;電離電壓 70 eV;離子源溫度 230℃;四極桿溫度 150℃;接口溫度 250℃;SI M/全掃描(SCAN)采集模式,掃描質(zhì)量范圍:m/z30～150;采樣頻率 2.

2 結(jié)果與討論

2.1 定性

采用保留時(shí)間和MS/SCAN方法來定性.

2.2 定量

標(biāo)樣和樣品溶液同時(shí)上機(jī)測(cè)定,分別進(jìn)樣 1 μL.利用選擇特征離子 N-二甲基亞硝胺:m/z(42、43、74);N-二乙基亞硝胺:m/z(42、56、102);N-亞硝基吡咯烷:m/z(41、68、100);N-二丙基亞硝胺:m/z(70、43、130),采用外標(biāo)法進(jìn)行定量計(jì)算.

標(biāo)準(zhǔn)品的總離子圖及各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量掃描圖見圖 1～圖 5.

圖1 4種亞硝胺混合標(biāo)樣總離子圖

3.3 線性關(guān)系

用重蒸二氯甲烷配制 4種揮發(fā)性 N-亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)溶液系列:0μg/mL、1μg/mL、5μg/mL、50μg/mL、100μg/mL 、250μg/mL,利用定量離子峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線.

表1 4種揮發(fā)性亞硝胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍

2.4 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取 4種生食水產(chǎn)品樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn),分別在樣品中添加 1.00μg/kg和 2.00μg/kg的混合標(biāo)準(zhǔn)品,按照樣品處理方法,經(jīng)過氣質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè),得到的回收率結(jié)果見表2.

表2 回收率試驗(yàn)

2.5 精密度試驗(yàn)

取 4種生食水產(chǎn)品樣品各進(jìn)行 6次樣品處理進(jìn)行測(cè)定.

表3 精密度試驗(yàn) (n=6)

2.6 檢出限

取 10μg/mL的N-亞硝胺的標(biāo)樣,進(jìn)樣量為1μL,測(cè)得信噪比,檢測(cè)限以 3倍噪聲計(jì)算,得到N-亞硝胺的儀器檢測(cè)限;以 20.0 g稱樣量,最后定容體積為 1 mL,進(jìn)樣量 1μL(同標(biāo)樣)計(jì),得本方法的各個(gè) N-亞硝胺檢測(cè)限.

表4 儀器和方法檢出限

2.7 色譜條件的選擇

在試驗(yàn)過程中,用非程序升溫即保持 200℃、3種程序升溫即 40℃下保持 1 min,以9℃/min升至 200℃,保持 1 min;40℃下保持 1 min,以 12℃/min升至 200℃,保持 1 min;40℃下保持 1 min,以 5℃/min升至 200℃,保持 1 min,做對(duì)比試驗(yàn),從分離效果、程序所用時(shí)間,以及樣品進(jìn)入情況 3個(gè)方面選擇了本文采用的程序升溫方案.

3 小結(jié)

本文中所建立的氣相色譜 -質(zhì)譜測(cè)定生食水產(chǎn)品中揮發(fā)性亞硝胺具有前處理簡(jiǎn)單快速,特異性強(qiáng),重現(xiàn)性的 RSD小于 2%,回收率為 90%～110%,線性范圍在 0～250μg/mL之間,方法檢測(cè)限為 0.04μg/kg、0.025μg/kg、0.05μg/kg、0.01μg/kg.該方法可作為應(yīng)急食品安全事件的快速檢測(cè)方法.

[1] 許牡丹,毛跟年.食品安全性與分析檢測(cè)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版杜,2003:23.

[2] 吳永寧.現(xiàn)代食品安全科學(xué) [M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2003:248-259.

[3] 吳烈鉤.氣相色譜檢驗(yàn)方法 [M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000:127-129.

[4] 陶燕飛,黃紅林,張?zhí)抑?等.啤酒中 N-亞硝胺的 SPME-GC-MS分析 [J].分析測(cè)試學(xué)報(bào),2003,19(1):82-84.

DETERM INATION OF VOLATILE N-N ITROSAM INE IN EATING RAW AQUATIC PRODUCTSBY GS-MSMETHOD

CHEN Bin,D ING Hong-mei,YANG Xing-long,CHEN Gang
(Nantong Product Quality Supervision and Inspection Institute,N antong226005,China)

We extracted volatile N-nitrosamines,such asN-nitrosodimethylamine(NDMA),N-nitrosodiethylamine(NDEA),N-nitrosopyrrolidine(NPYR)and N-nitroso-di-n-propylamine(NDPA),from eating raw preserved aquatic products by usingmethylene chloride,and performed qualitative and quantitative determination by selected ion method through GS-MS.The method had the advantages of si mple and quick pre-treatment,easy operation,high linear correlations(up to 0.999 1,0.999 1,0.999 0 and 0.999 5,respectively),wide linear range(up to 0 to 250μg/mL),good reproducibility,highRSD(up to 1.49%to 1.94%),high recovery rate(up to 90%to 105%),high sensntivity,and low detection limits(0.04μg/kg,0.025 μg/kg,0.05μg/kg and 0.01μg/kg,respectively).

volatile N-nitrosamine;GS-MS;selected ion method

TS201.6

B

1673-2383(2010)06-0067-03

2010-08-01

江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局科技項(xiàng)目 (2010ZB011);江蘇省南通市科技項(xiàng)目(S2009003)

陳彬(1978-),男,江蘇如皋人,工程師,長(zhǎng)期從事色譜儀器檢測(cè)工作.

＊通信作者