牛繼國，董 峰，呼永華，梅 澍，趙瑞萍，包曉玲，曾賢伍，李文燕

（1.甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅醫(yī)藥編輯部，甘肅 蘭州 730000）

神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）在肺癌中的表達及其價值

牛繼國1，董 峰1，呼永華1，梅 澍1，趙瑞萍1，包曉玲2，曾賢伍1，李文燕1

（1.甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅醫(yī)藥編輯部，甘肅 蘭州 730000）

目的探討腫瘤標(biāo)志物神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）在肺癌中的表達及其在肺癌診療過程中的臨床應(yīng)用價值。方法采用電化學(xué)發(fā)光免疫（ECLIA）技術(shù)分別對39例體檢健康者（對照組）和196例肺癌患者（肺癌組）的血清標(biāo)本進行NSE的含量檢測，分析其在肺癌中的表達及與其相關(guān)因素的關(guān)系。結(jié)果對照組血清中的NSE水平均在正常參考值范圍內(nèi)，肺癌組與對照組相比NSE水平明顯升高，且對比有顯著性差異（P＜0.01）；NSE診斷效能的ROC分析顯示曲線下面積為0.810，P＜0.001，95%可信區(qū)間為0.745～0.874。NSE在3種病理類型肺癌中的陽性率情況為：最高為小細胞肺癌56.6%，其次是鱗癌43.8%和腺癌27.0%，經(jīng)比較其有顯著性差異（P＜0.05及P＜0.01）。表達水平與變量相關(guān)因素的逐步直線回歸分析顯示NSE只與小細胞肺癌有直線相關(guān)關(guān)系。結(jié)論對肺癌患者進行血清NSE檢測有助于對不同病理類型肺癌的鑒別，尤其對小細胞肺癌的確診及對肺癌病程的推斷和預(yù)后等具有一定的臨床價值，對于臨床治療方案的制訂與調(diào)整具有指導(dǎo)意義。

肺癌；NSE；表達；ROC；相關(guān)因素

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器與材料 瑞士羅氏公司的2010型電化學(xué)發(fā)光檢測儀；安徽中佳公司生產(chǎn)的KDC-2046低速冷凍離心機。

1.1.2 試劑 為瑞士羅氏公司2010型電化學(xué)發(fā)光檢測儀專用試劑，包括NSE檢測藥盒、清洗液（ISE Cleaning Solution）；系統(tǒng)試劑（PROCELL）；定標(biāo)夜；質(zhì)控試劑（PreciControl Tumor Marker）。

1.2 研究對象

1.2.1 對照組 采用電化學(xué)發(fā)光免疫（ECLIA）技術(shù)檢測已排除腫瘤的體檢健康者39例，其中男性19例，女性20例，平均年齡為（46.7±6.6）歲。

1.2.2 肺癌組 196例肺癌患者均為我院2005年12月～2008年5月期間的住院患者，有明確的病理學(xué)診斷，其中男性130例，女性 66 例，平均年齡為（56.5±9.5）歲。其均為初診患者，未經(jīng)手術(shù)、化療等任何治療，后經(jīng)CT及支氣管鏡等檢查確診并經(jīng)病理學(xué)分析證實為腺癌63例（Ⅱa期3例、Ⅱb期4例、Ⅲa期13例、Ⅲb期19例、Ⅳ期24例），鱗癌80例（Ⅱa期13例、Ⅱb期11例、Ⅲa期12例、Ⅲb期26例、Ⅳ期18例），小細胞肺癌53例（Ⅱa期5例、Ⅱb期9例、Ⅲa期6例、Ⅲb期14例、Ⅳ期19例）。

1.3 檢測方法

（1）取被檢查者清晨空腹靜脈血4 ml，待凝固后以3000轉(zhuǎn)/分離心分離血清，2 h內(nèi)測定其NSE水平值，嚴格按照瑞士羅氏公司2010型電化學(xué)發(fā)光檢測儀及試劑盒說明書操作規(guī)程進行檢測。

（2）測定方法。由瑞士羅氏公司生產(chǎn)的2010型電化學(xué)發(fā)光檢測儀（Elecsys 2010）全自動完成。

（3）檢測值判斷標(biāo)準(zhǔn)。檢驗正常值判斷標(biāo)準(zhǔn)為0～16.3 ng/ml，若超出上述臨界值或正常范圍則為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計分析。NSE在肺癌組與對照組中含量的比較因其數(shù)據(jù)為偏態(tài)分布，故運用百分位數(shù)及秩和檢驗；其在不同病理類型肺癌中的陽性率表達與分布采用卡方檢驗；對影響其檢測水平的相關(guān)因素分析通過數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化后滿足回歸的前提條件線性、獨立、正態(tài)、等方差，以納入標(biāo)準(zhǔn)0.05，移除標(biāo)準(zhǔn)0.10選進自變量，采用多元線性逐步回歸分析，以NSE作為因變量，將臨床中可能影響其檢測水平的11個因素，即性別X1，年齡X2；病理類型：肺腺癌X3、肺鱗癌X4、小細胞肺癌 X5、TX6、NX7；轉(zhuǎn)移部位：肺轉(zhuǎn)移 X8、骨轉(zhuǎn)移 X9、肝轉(zhuǎn)移X10、腦轉(zhuǎn)移X11作為自變量，進行多元線性逐步回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 肺癌組與對照組血清中NSE的檢測結(jié)果比較（見表1）

表1結(jié)果表明，對照組血清中的NSE水平均在正常范圍內(nèi)，肺癌組血清中NSE在3個百分位數(shù)的值均明顯高于對照組，且比較有顯著性差異（P＜0.01）。

2.2 NSE診斷效能的ROC分析（見圖1）

表1 肺癌組和對照組血清中NSE檢測結(jié)果的比較

圖1 NSE診斷效能的ROC分析

NSE診斷效能的ROC分析如圖1所示，曲線下面積為0.810，P＜0.001，95%可信區(qū)間為 0.745～0.874。

2.3 不同病理類型中NSE檢測陽性率的比較（見表2）

表2 不同病理類型中NSE檢測陽性率的比較

將表2結(jié)果用更直觀的柱狀圖標(biāo)示（見圖2）。

圖2 不同病理類型中NSE檢測陽性率比較的柱狀圖

從圖2可以直觀地看出NSE在這3種病理類型肺癌中的陽性率，其比較具有顯著性差異（P＜0.05 及 P＜0.01）。

2.4 影響肺癌腫瘤標(biāo)志物表達的相關(guān)因素分析（見表3）

各項指標(biāo)影響因素的多元線性逐步回歸分析結(jié)果如表3所示。

表3 各項指標(biāo)影響因素的多元線性逐步回歸分析結(jié)果

各項指標(biāo)影響因素的多元線性逐步回歸分析結(jié)果顯示：NSE當(dāng)選進和剔除變量，復(fù)相關(guān)系數(shù)R=0.642，認為NSE的檢測水平與小細胞肺癌之間有直線相關(guān)關(guān)系。其他變量如年齡；肺腺癌、肺鱗癌；分期因素T、N；肺轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移均未能進入變量方程，說明其對NSE檢測水平表達的影響不具有相關(guān)性。

3 討論

腫瘤標(biāo)志物在肺癌的輔助診斷、病理分型、分期、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及預(yù)后等方面的作用日益被人們認識，在肺癌的輔助診斷中，血清 CEA、NSE、CYFRA21-1、SCC-Ag、TPA、SF、CA125 和降鈣素等的檢測均被逐漸應(yīng)用到臨床研究中[3]。腫瘤標(biāo)志物在腫瘤臨床診斷中的作用及意義逐漸被人們揭示，已成為腫瘤臨床診斷的重要參考指標(biāo)之一。通過多年的研究和醫(yī)學(xué)實踐，認為目前臨床使用腫瘤標(biāo)志物診斷腫瘤的關(guān)鍵在于合理應(yīng)用及正確評價[4]。

神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是由2個r亞單位組成的糖酵解酶，存在于正常神經(jīng)細胞和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞內(nèi)，神經(jīng)內(nèi)分泌細胞和神經(jīng)源性腫瘤中含有大量的NSE，其含量是正常肺組織中的3～35倍。小細胞肺癌（SCLC）是一種起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細胞的腫瘤，具有明顯的神經(jīng)內(nèi)分泌（neuroendocrine，NE）分化特征。多數(shù)研究現(xiàn)已證實，部分NSCLC亦伴有NE分化，同時在生物學(xué)行為上與其他NSCLC有很大差別，具有類似SCLC的生物學(xué)特性，對化療比較敏感，具有更強的腫瘤侵襲特性[5]，這可能是NSE在NSCLC中為何異常表達的重要原因。NSE不僅在SCLC中明顯升高，在一些NSCLC中也有明顯升高，總陽性率達50%左右[6]，因此NSE是肺癌的重要標(biāo)志物。有研究顯示，NSE敏感性為55.0%～57.7%，被確認為是SCLC的首選標(biāo)記物[7]。本研究也顯示NSE在肺癌中有較高的表達，肺癌組在3個百分位數(shù)的值均明顯高于對照組，且越是晚期其含量越高，有些患者竟高于370 ng/ml以上，且比較有顯著性差異。NSE在肺癌中的陽性率為41.8%，其中在SCLC中的陽性率為56.6%，明顯高于鱗癌組（43.8%）與腺癌組（27.0%），故認為 NSE 具有較明顯的病理傾向性，因此，有效地檢測NSE在肺癌患者血清中的表達有助于對SCLC的診斷及其與NSCLC的鑒別，并且對SCLC有較大的診斷價值。

ROC曲線是一種全面、準(zhǔn)確評價診斷試劑的非常有效的方法[2]。通過計算ROC曲線下面積，可判斷腫瘤標(biāo)志物的診斷效率。本研究中 NSE 的 ROC 曲線下面積為 0.810，P＜0.001，95%可信區(qū)間為0.745～0.874。說明NSE對肺癌的診斷效能較好，完全可以作為肺癌，尤其是小細胞肺癌的腫瘤標(biāo)志物來運用于臨床。

通過進一步引入不同變量做多元線性逐步回歸分析，證實NSE的表達與肺癌病理類型中小細胞肺癌有較好的直線相關(guān)關(guān)系，說明患者血清中NSE表達越高，患小細胞肺癌的可能性越大，是診斷小細胞肺癌的重要標(biāo)志物。NSE在血清中的高表達，有助于對小細胞肺癌的確診，且對不明病理類型肺癌的病理分型估計及治療方案的制訂也都具有重要的意義。而其他一些因素如肺轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移等按納入標(biāo)準(zhǔn)均未能進入變量方程，也可能與這些病例較少有一定的關(guān)系，今后需更進一步積累病例，做更深入的研究。

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1671-1246（2010）04-0122-03肺癌是當(dāng)今世界各國常見的惡性腫瘤之一，并已成為絕大多數(shù)國家因癌癥死亡的主要類型，被認為是目前對人類健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一[1]。在對腫瘤的研究和臨床實踐中，腫瘤標(biāo)記物在肺癌診斷及治療過程中的價值正日益受到關(guān)注，且已成為腫瘤患者的重要檢查指標(biāo)[2]。本文就神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）在肺癌患者血清中的表達及其臨床應(yīng)用價值進行探討。