燈銀腦通膠囊是中藥制劑,臨床用于腦動(dòng)脈硬化癥及其所引起的腦供血不足、腦梗塞、腦力衰退、老年性癡呆以及中風(fēng)后遺癥等。曾有文獻(xiàn)報(bào)道,燈銀腦通膠囊治療腦梗死后遺癥療效滿意[1],并對衰老小鼠有促智作用[2]。為進(jìn)一步了解燈銀腦通膠囊對大腦功能的影響,本實(shí)驗(yàn)主要研究其對單胺類神經(jīng)神經(jīng)遞質(zhì)的影響。
1.1 動(dòng)物 ICR小鼠,體重20±2g,雌雄各半,由云南省天然藥物藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供,動(dòng)物合格證編號為:滇實(shí)動(dòng)證第00205號。
1.2 試藥 燈銀腦通膠囊(昆明制藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn),批號:020316);健腦膠囊(江西廣豐制藥廠,批號:2001062)D-半乳糖(上海試劑二廠,批號:990102);其余化學(xué)試劑均為AR級。
附表 燈銀腦通膠囊對衰老模型小老鼠腦組織單胺類遞質(zhì)量的影響(X±SD)
2.1 分組與給藥、衰老模型建立 小鼠每天眼球后注射D-半乳糖0.12mg·g-1,連續(xù)給藥一個(gè)月,制備衰老模型[3]。正常對照組小鼠注射等量注射用水,同時(shí)按分組給予相應(yīng)藥物,對照組和模型組給予等量溶劑。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠隨機(jī)分為6個(gè)組。①空白對照組,灌胃給予NS(0.9%氯化鈉)②造模對照組,灌胃NS。③陽性藥對照組,動(dòng)物造模并灌胃給予健腦膠囊溶液(0.5g·kg-1·d-1)。④~⑥組為燈銀腦通膠囊低、中、高劑量組,分別灌胃給予0.5g·kg-1·d-1、1 g·kg-1·d-1、2 g·kg-1·d-1的燈銀腦通膠囊(用藥量分別為臨床2、5和10倍的成人劑量)。各組小鼠灌胃容積均為10ml·kg-1,每日一次,連續(xù)兩周。
2.2 單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量測定方法 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道方法測定腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)(5-羥色胺、去甲腎上腺素、多巴胺)(按下順序操作,并計(jì)算):取小鼠全腦,稱重后加10倍體積的冷酸性正丁醇,組織勻漿器勻漿,勻漿液離心(2000rpm)500分鐘,取上清液2.5ml置于內(nèi)含0.1NHCL1ml和正庚烷5ml的具塞離心管中,置旋渦混勻器上充分混勻,離心(2500rpm)5分鐘,從下層水相中分別取0.5ml和0.4ml,前者用于測定去甲腎上腺素和多巴胺,后者用于測定5-羥色胺,其中每個(gè)樣品均需要做樣品管與內(nèi)標(biāo)管(樣品+標(biāo)準(zhǔn)品),每批實(shí)驗(yàn)需做一個(gè)空白管(瑩光滅火管)和外標(biāo)管(只含標(biāo)準(zhǔn)品)。
2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析方法 采用SPSS10.0軟件包處理,采用方差分析法進(jìn)行分析。
燈銀腦通膠囊對衰老小鼠腦組織內(nèi)單胺類遞質(zhì)含量的影響結(jié)果詳見附表1。結(jié)果顯示,燈銀腦通膠囊能明顯提高衰老模型小鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量。
抑郁癥的生物學(xué)基礎(chǔ)是單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺(5-HT)和/或去甲腎上腺素(NE)的缺乏,5-HT參與情感、睡眠、警覺、記憶、食欲和性功能的調(diào)節(jié),與人類的行為有密切關(guān)系,是導(dǎo)致抑郁癥發(fā)病的重要神經(jīng)遞質(zhì)。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果,燈銀腦通膠囊能顯著提高衰老模型小鼠腦內(nèi)NA、DA、5-HT等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量。這說明燈銀腦通膠囊可能具有抗抑郁作用,但其抗抑郁的作用和機(jī)制還有待于臨床試驗(yàn)進(jìn)一步的研究。