蔣建春

克乳痛膠囊揮發(fā)性成分包結(jié)工藝研究

蔣建春

目的考察克乳痛膠囊中丹皮酚及蛇床子揮發(fā)油的最佳提取工藝和環(huán)糊精最佳包合工藝。方法比較飽和溶液合并超聲法和研磨法兩種不同揮發(fā)油包結(jié)方法及其他包結(jié)條件，以揮發(fā)性成分與β-環(huán)糊精之比、包合時間、包合溫度作為考察因素，用正交試驗考察最佳包合工藝，以包合物收得率和揮發(fā)油包合率作為評價包合工藝的指標(biāo)。結(jié)果通過比較采用研磨法制備包合物，最佳包合工藝為：揮發(fā)油加及丹皮酚加4倍量β-環(huán)糊精及適量水，40℃研磨包合6h。結(jié)論該方法包合物的平均得率為90.8%，平均包結(jié)率為75.5%，表明該工藝基本可行。

丹皮酚；蛇床子；揮發(fā)油；包合技術(shù)；正交試驗

克乳痛膠囊由江蘇省中醫(yī)院許芝銀教授根據(jù)多年的臨床實(shí)踐，按照中醫(yī)理論中關(guān)于乳癖的發(fā)病機(jī)制和西醫(yī)體系中乳腺增生病的學(xué)說，從補(bǔ)益肝腎、調(diào)攝沖任為主，行淤化痰、散結(jié)止痛為輔的治療方法入手，自擬處方而成。原方曾為醫(yī)院制劑，經(jīng)藥效學(xué)篩選，最終確定處方組成為鹿角片、蛇床子、何首烏、丹皮、赤芍、郁金、昆布、牡蠣。其藥材來源均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。本試驗進(jìn)行丹皮酚及揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備研究，應(yīng)用包結(jié)技術(shù)可穩(wěn)定丹皮酚及蛇床子揮發(fā)油，提高克乳痛膠囊的穩(wěn)定性，實(shí)驗探討了飽和溶液合并超聲法及研磨法這兩種不同方法及其包結(jié)條件對包結(jié)物得率及包結(jié)率的影響，從而得出最佳工藝，并進(jìn)行3批驗證試驗，確定該工藝的可行性。

1 丹皮酚、蛇床子揮發(fā)油的提取[1]

1.1 丹皮酚的提取

取牡丹皮藥材200g，水蒸氣蒸餾，收集藥材量10倍的蒸餾液，冷藏48h，濾過，得丹皮酚結(jié)晶。

1.2 蛇床子揮發(fā)油的提取

分別稱取蛇床子200g，郁金200g，加6倍量的水，浸泡2.0h，水蒸氣蒸餾6h，冷卻，收集揮發(fā)油。

2 丹皮酚及蛇床子揮發(fā)油的包結(jié)工藝研究[2-5]

2.1 試驗儀器及試劑

β- CD（安徽山河藥用輔料有限公司，純度99.2%）；揮發(fā)油提取器 （南京鑾玉化玻儀器有限公司）；磁力加熱攪拌器（江蘇金壇市大地自動儀器廠）；HT系列臺式數(shù)控超聲波清洗機(jī)（山東濟(jì)寧恒通超聲電子設(shè)備公司）；JM系列膠體磨（廊坊通用機(jī)械制造有限公司）；無水硫酸鈉、無水乙醇均為分析純。

2.2 方法與結(jié)果

2.2.1 飽和溶液合并超聲法

2.2.1.1 實(shí)驗方法

采用正交試驗法，按表1、表2對應(yīng)的因素水平進(jìn)行試驗。每份樣品精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精飽和水溶液中，邊加邊超聲相應(yīng)的時間，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥[1]，即得。

2.2.1.2 評價指標(biāo)[6]

包合物得率：按下式計算

包結(jié)率的測定：參照《中國藥典》2000年一部牡丹皮項下丹皮酚含量測定方法測定包合前與包合后丹皮酚的含量，按下式計算

2.2.1.3 因素水平的選擇

根據(jù)文獻(xiàn)[7]，認(rèn)為揮發(fā)油和β-環(huán)糊精的比例、包合時間、包合溫度為主要因素，根據(jù)實(shí)際條件分別對每個因素設(shè)計出5個水平，進(jìn)行單因素試驗，以優(yōu)選3個水平。篩選出的試驗因素水平結(jié)果見表1。

表1 因素水平表

2.2.1.4 正交試驗安排及結(jié)果[8,9]

見表2～表4。

表2 L9（34）正交試驗表

表3 包合物得率方差分析表

表4 丹皮酚包結(jié)率方差分析表

2.2.1.5 結(jié)論

方差分析表明，3個因素不同水平之間未見顯著性差異，比較不同因素的極差R，其影響程度大小為B＞C＞A，再結(jié)合各因素不同水平之間Ki值，確定最佳的包合工藝為A1B3C2。即揮發(fā)油加8倍量β-環(huán)糊精所制成的飽和溶液，40℃超聲包合1.5h的包結(jié)工藝最佳。

2.2.2 研磨法

2.2.2.1 實(shí)驗方法

采用正交試驗法，優(yōu)選研磨法最佳工藝條件，按表5、表6對應(yīng)的因素水平進(jìn)行試驗。每份樣品精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精飽和水溶液中，邊加邊研磨相應(yīng)的時間，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥，即得。

2.2.2.2 評價指標(biāo)

同2.2.1.2項下評價指標(biāo)。

2.2.2.3 因素水平的選擇

根據(jù)文獻(xiàn)[10]，認(rèn)為揮發(fā)油和β-環(huán)糊精的比例、包合時間、包合溫度為主要因素，根據(jù)實(shí)際條件分別對每個因素設(shè)計出5個水平，進(jìn)行單因素試驗，以優(yōu)選3個水平。篩選出的試驗因素水平結(jié)果見表5。

表5 因素水平表

2.2.2.4 正交試驗安排及結(jié)果[8,9]

見表6～表7。

2.2.2.5 結(jié)論

包結(jié)率方差分析結(jié)果表明，3個因素不同水平之間未見顯著性差異，比較不同因素的極差R，其影響程度大小為B＞C＞A，再結(jié)合各因素不同水平之間Ki值，同時考慮包合物的得率，確定最佳的包合工藝為A2B3C2。即揮發(fā)油及丹皮酚加4倍量β-環(huán)糊精及適量水，40℃研磨包合6h的包結(jié)工藝最佳[6]。

表6 L9（34）正交試驗表

表7 包合物得率方差分析表

表8 丹皮酚包結(jié)率方差分析表

2.3 超聲法與研磨法對包結(jié)物得率及包結(jié)率影響的比較

2.3.1 超聲法最佳包合工藝

精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精（12.8g）飽和水溶液之中，邊加邊超聲，超聲時間1.5h，包合溫度40℃取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃，真空干燥，即得。

2.3.2 研磨法最佳包合工藝

精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精（6.4g）飽和水溶液之中，邊加邊研磨，研磨時間6h，包合溫度40℃，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥，即得。

2.3.3 結(jié)果

見表9。

表9 超聲法及研磨法最佳包合工藝

結(jié)論：根據(jù)以上結(jié)果可見研磨法制備包合物優(yōu)于飽和溶液合并超聲法，再考慮到飽和溶液合并超聲法制備丹皮酚與蛇床子揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物所用β-環(huán)糊精量較大，且目前尚缺乏適應(yīng)生產(chǎn)的超聲設(shè)備，故選擇研磨法制備包合物，以降低β-環(huán)糊精的用量。

2.4 驗證試驗

取丹皮酚結(jié)晶1.0g，加2倍量無水乙醇溶解后與揮發(fā)油1.5mL混勻，分次加入丹皮酚與揮發(fā)油總量4倍量的β-環(huán)糊精混懸液研勻，40℃研磨6h，所得糊狀物與40℃真空干燥24h，無水乙醇洗滌，干燥的包合物，分別按上法測定包合物得率及丹皮酚的包結(jié)率。平行試驗3份，結(jié)果見表10。

表10 丹皮酚等β-環(huán)糊精包合物制備工藝

該包合物的平均得率為90.8%，平均包結(jié)率為75.5%，表明該工藝基本可行。

3 討 論[10,11]

由于實(shí)驗所得研磨法制備包合物優(yōu)于飽和溶液合并超聲法，且飽和溶液合并超聲法制備丹皮酚與蛇床子揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物所用β-環(huán)糊精量較大，且目前超聲設(shè)備限制，故選擇研磨法制備包合物，以降低β-環(huán)糊精的用量根據(jù)。 通過正交試驗篩選出最佳包合工藝，揮發(fā)油加及丹皮酚加4倍量β-環(huán)糊精及適量水，40℃研磨包合6h。驗證實(shí)驗表明本工藝質(zhì)量穩(wěn)定，基本可行。

[1] 林桂濤,徐淑國.β-環(huán)糊精包封中藥揮發(fā)油新方法的探討[J].中國中藥雜志,1992,17(5):283-285.

[2] 劉樹芬,楊曉紅,李曉紅等.蒼木揮發(fā)油-β-環(huán)糊精包合物的研究[J].中國藥學(xué)雜志,1992,27 (11):658-660.

[3] 劉友平,秦春梅,鄢丹.β-環(huán)糊精包合物包合物在中藥學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中草藥,2003,34(7):附4-附7.

[4] 張霄岳,常樹春,畢研更.本草蒜素液β-環(huán)糊精包合物的制備[J].中成藥,2001,23(9):634.

[5] 李正翔,任榮.丹皮酚β-環(huán)糊精包合物的制備[J].中國藥學(xué)雜志, 2004,39(4):305.

[6] 邱嬌英,張慧芳.八角茴香揮發(fā)油的提取與β-環(huán)糊精包合工藝研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2008,29(6):50.

[7] 富志軍,周志新.膠體磨應(yīng)用于肉桂油-β-環(huán)糊精包合物制備工藝條件的實(shí)驗篩選[J].中成藥,1994,16(12):6-7.

[8] 李慧,邊寶林,孟繁蘊(yùn)等.正交試驗法優(yōu)選川芎、當(dāng)歸揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合工藝[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2005,22(6):471-472.

[9] 錢士輝,袁麗紅.正交設(shè)計法優(yōu)選當(dāng)歸等揮發(fā)油β-環(huán)糊精的包合工藝[J].中藥材,1999,22(6):309-400.

[10] 李琰,王鳳林,孫秀華.采用加速試驗法考察揮發(fā)油經(jīng)β-CD包合前后的穩(wěn)定性[J].中國中藥雜志,2005,30(4):305.

[11] 呂鵬.β-環(huán)糊精在中藥新技術(shù)研究中的應(yīng)用[J].天津藥學(xué),2003, 15(6):4.

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