張儉偉 馬生友 董君艷 穆洪云 謝偉東

犬傳染性肝炎的診療及營養(yǎng)解決方案

張儉偉 馬生友 董君艷 穆洪云 謝偉東

犬傳染性肝炎是由犬傳染性肝炎病毒（ICHV)引起的急性敗血性傳染病。ICHV又稱為Ⅰ型犬腺病毒(CAV-Ⅰ)主要引起犬的急性肝炎,以肝小葉中心壞死、肝實質(zhì)細胞和皮質(zhì)細胞核內(nèi)出現(xiàn)包涵體及出血時間延長為特征。臨床診斷以血液生化指標和B超探查結(jié)果為依據(jù)，確診需要進行分子生物學(xué)特異性檢測。目前對本病尚無特效治療藥物，對癥治療、支持療法，并結(jié)合營養(yǎng)解決方案能取得較好效果。

癥 狀

犬傳染性肝炎多發(fā)于6月齡以內(nèi)的犬，尤以未免疫疫苗或免疫不完全的犬為主，免疫力低下的老年犬也多見，多呈地方流行性。臨床表現(xiàn)為體溫升高，精神沉郁，全身無力，行動遲緩。消化機能紊亂，出現(xiàn)食欲減退，嘔吐，糞便起初干燥繼而稀軟、色淡，尿液顏色變暗等癥狀。有的患犬表現(xiàn)為口、鼻出血，可視粘膜黃染，肝區(qū)觸診疼痛等?；謴?fù)期患犬常見單側(cè)間質(zhì)性角膜炎和角膜水腫。

診 斷

一、B超檢測

犬前腹部剃毛，取仰臥位或左側(cè)位。涂布耦合劑后，探頭置于劍狀軟骨附近的腹中線上，與體長軸平行，或向前方稍傾斜，通過變換探頭角度對整個肝臟進行檢查。為減少胃內(nèi)氣體對檢查結(jié)果的干擾，需將探頭置于肋間進行檢查，該方法對于肝區(qū)細微的檢查也很有用。正常肝組織回聲呈現(xiàn)松散的細小光點、質(zhì)地均勻、中等回聲。門靜脈可通過亮的強回聲管壁鑒別之。其他靜脈分支也可見，顯示為無回聲線狀或環(huán)形區(qū)，散在于肝區(qū)內(nèi)。膽囊顯示為一大的梨形無回聲結(jié)構(gòu)，位于肝的右側(cè)。有時其內(nèi)部呈現(xiàn)粒狀沉積，尤其是禁食動物。

傳染性肝炎患犬B超探查肝表面回聲不均，出現(xiàn)強回聲(圖1)。肝內(nèi)靜脈增粗，血管壁回聲減弱等（圖2）。

二、 X線檢查

通常從X線平片上可獲得肝臟的大小輪廓。肝臟的確定位置與呼吸、位置姿勢和體形結(jié)構(gòu)有關(guān)，吸氣時更靠后。右側(cè)位時，因左肝葉向尾側(cè)移動，因此在X線片上的投影較左側(cè)位時大一些。斜位時，肝的后腹緣明顯變圓，青年犬肝臟也比老齡犬顯得大些?；既腦線平片可表現(xiàn)為肝區(qū)增大等異樣影像。

三、血液生化檢查

空腹，前肢靜脈采血5ml，置于肝素管內(nèi)，12000轉(zhuǎn)離心5分鐘，取血清置于美國IDEXX全自動干式生化儀進行檢測。結(jié)果表明，谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、堿性磷酸酶等數(shù)值明顯高于正常參考范圍。（表1）

表1 患犬血液生化檢測結(jié)果

四、PCR檢測

采集患犬糞便樣品，按照常規(guī)方法提取病毒DNA。

根據(jù)Genbank中CAV-Ⅰ的序列，參考已建立的檢測方法，合成了一對引物，其序列為：P1 5`CGCGCTGAACATTACTACCTTGTC 3`；P2 5`CTTCGTGTCCGCTTCATG 3`。50μl反應(yīng)體系為:10×PCR緩沖液5μl，2.5mmol/L dNTP 4μl，25mmol/L MgCl2 3μl，24μmol的CAV-Ⅰ上游引物及下游引物各1μ l，提取的DNA樣品2μl，Taq酶1U，補加去離子水至50μl。PCR反應(yīng)條件為96℃ 180s，96℃ 30s，56℃ 30s，72℃ 80s，30個循環(huán)。

PCR產(chǎn)物用1%瓊脂糖凝膠（含0.5mg/l EB）進行電泳檢測，電泳結(jié)束后，置于凝膠成像系統(tǒng)上拍照，參照DL 2000 Marker分析產(chǎn)物長度。結(jié)果出現(xiàn)497bp的特異性條帶（圖3），表明患犬感染了CAV-Ⅰ。

M. DL2000 marker；（一）CAV-Ⅰ陽性對照（本實驗室分離鑒定）；（二）樣品；（三）陰性對照

五、鑒別診斷

犬瘟熱發(fā)病初期的癥狀與本病極其相似，但呈雙相熱，且無肝細胞損害的臨床病理變化；黃曲霉素中毒有攝入被黃曲霉毒素污染的食物史；鉤端螺旋體病，有腎損害的尿沉渣及尿素氮的變化，無白細胞減少和肝功能變化；丙酮芐羥香豆素中毒癥狀與此很相似，但無白細胞減少和體溫升高的變化。

治 療

一、常規(guī)治療

本病的治療原則是抗病毒、保肝利膽。在發(fā)病初期皮下注射大劑量的傳染性肝炎高免血清、肌注a-2b型干擾素；靜脈滴注如下藥物：10%葡萄糖、維生素B1、維生素B6、利巴韋林、ATP、輔酶A等；促進膽汁排出，應(yīng)用硫酸鎂、人工鹽或硫酸鈉；增強肝臟的解毒功能，可口服葡醛酸鈉或谷氨酸、高免卵黃抗體、免疫多糖膏等。歐美市場上常用的有效藥物為肝炎散劑，目前國內(nèi)市場也開始應(yīng)用該藥。

二、針灸療法

從中醫(yī)角度講，由于肝膽濕熱，外感濕熱之邪郁結(jié)于肝膽，肝疏泄失常、膽汁不循腸道。治療原則以清熱、利膽、疏肝、理氣為主。體針取穴肝俞、脾俞、陽陵泉、陰陵泉、三陰交，配穴取外關(guān)、中脘、曲池。水針取穴后三里、三陰交、期門、脾俞，穴內(nèi)注射丹參、肌苷。對慢性肝炎可采取激光療法，取穴足三里、中脘、關(guān)元、肝俞，穴位交替照射20分鐘～25分鐘。

三、營養(yǎng)解決方案

氧化應(yīng)激導(dǎo)致枯否氏（Kuppfer）細胞產(chǎn)生了的大量自由基影響了免疫應(yīng)答，最終導(dǎo)致肝細胞死亡。對于慢性肝炎病例,自由基還激活了星狀細胞, 最終導(dǎo)致肝組織纖維化, 肝硬化。臨床上和市場上常用的處方糧中添加的抗氧化劑主要有：GSH、硫辛酸、生育酚(V-E)、維生素C、鋅、膽紅素、CoQ10、SAMe以及西利馬林等。S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）轉(zhuǎn)換成甲硫氨酸過程中釋放大量ATP，由于犬體內(nèi)缺乏某種酶, S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）無法正常轉(zhuǎn)換成甲硫氨酸，所以需要食物補充。

體 會

肝臟是體內(nèi)最大的消化腺，參與糖、蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、激素的代謝，具有解毒，分泌和排泄膽汁，制造凝血因子、調(diào)節(jié)血容量等重要功能，胚胎時期肝臟還有造血功能。肝臟具有較強的代償能力，臨床出現(xiàn)肝病征兆時，肝臟損害已達到相當程度。對于急性病例，治療重點是保護肝臟功能，促進肝臟細胞的再生過程；當急性肝病轉(zhuǎn)為慢性時，治療的重點則變?yōu)榫S持肝臟的代謝能力，控制和預(yù)防并發(fā)癥，防止病情繼續(xù)惡化。

營養(yǎng)解決方案要根據(jù)不同的發(fā)病階段而定。肝臟疾病的飲食管理目標是：提供足夠的能量和營養(yǎng)素來滿足機體需求，防止營養(yǎng)不良；防止銅蓄積和使用抗氧化劑來預(yù)防肝臟進一步損傷，促進肝細胞再生，預(yù)防并發(fā)癥。對于急性肝病患犬，要保證其日糧中蛋白質(zhì)含量，否則會導(dǎo)致蛋白質(zhì)分解代謝產(chǎn)生內(nèi)源性氨，還會降低肝細胞修復(fù)時蛋白質(zhì)的利用率。食物中還應(yīng)該含有足量的抗氧化劑，比如維生E、維生素C以及硒等。當患犬血漿中膽汁酸含量維持在較高水平時，可給予熊去氧膽酸作為肝保護劑。

干擾素系統(tǒng)是目前所知的發(fā)揮作用最快的第一病毒防御體系，可在幾分鐘內(nèi)使動物機體處于抗病毒狀態(tài)，并且動物機體在1周～3周時間內(nèi)對病毒的重復(fù)感染有抵抗作用。干擾素的抗病毒效應(yīng)是通過與靶細胞受體結(jié)合，誘導(dǎo)抗病毒蛋白(AVP)間接發(fā)揮作用，對病毒起抑制作用而非殺滅作用。

Vetplus公司生產(chǎn)的SAMYLIN(r)（肝炎散劑），主要成份為S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）、水飛薊素、維生素E、維生素C等，因其藥粉由腸衣包裹形成SAMe微粉顆粒，同時有膠囊外包裝，可以和食物攪拌后食用，不受胃酸的破壞，具有藥效高、使用方便，適口性好等優(yōu)點，在臨床上已得到廣泛應(yīng)用。

（作者單位：張儉偉、馬生友 ，法國皇家寵物食品公司，200000；董君艷、穆洪云 、謝偉東，公安部南京警犬研究所犬病醫(yī)院，210012）

（編輯：李 冰）