李雪蘭,鐘曉敏
(廣西醫(yī)科大學(xué)第七附屬醫(yī)院梧州市工人醫(yī)院,廣西 梧州 543001)
沙眼衣原體感染對精子頂體完整率的影響
李雪蘭,鐘曉敏
(廣西醫(yī)科大學(xué)第七附屬醫(yī)院梧州市工人醫(yī)院,廣西 梧州 543001)
目的探討精液沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,CT)感染對精子頂體的影響。方法收集100例精液標(biāo)本,其中CT陽性70例,CT陰性30例,采用精子頂體染色法檢測精子頂體完整率。結(jié)果CT陽性組和CT陰性組比較精子頂體完整率比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論CT感染導(dǎo)致精子頂體完整率明顯降低而使男性生育力下降。
沙眼衣原體;精子頂體完整率;男性不育
衣原體可導(dǎo)致多種生殖道疾病,其感染率已超過淋病,在全球成為居于首位的性傳播疾病,且與男性不育密切相關(guān)[1]。本文主要探討沙眼衣原體感染對精子頂體完整率的影響。
1.1 臨床資料 CT陽性組:本組70例,來自我院不育門診,為婚后同居兩年以上,有正常性生活,未采用任何避孕措施,睪丸、副睪、內(nèi)分泌、染色體等檢查無異常;精液沙眼衣原體檢測陽性,年齡25~45歲,其配偶檢查無異常。CT陰性組:本組30例,有正常生育史,身體健康,精液沙眼衣原體檢測陰性,精液常規(guī)正常的自愿捐精者,年齡25~45歲。
1.2 標(biāo)本采集 嚴(yán)格按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]采集精液標(biāo)本。
1.3 儀器和方法
1.3.1精子頂體完整率檢測 嚴(yán)格按《男科診斷學(xué)》[3]操作。取液化精液推片,95%乙醇固定10 min,自然干燥,用瑞–吉氏(10:1)混合液加等量pH 6.9磷酸鹽緩沖液,染色10 min,自來水沖洗,再把染片置于95%乙醇中浸2~5 s,脫掉片膜上的浮色,待自然干燥后,用光學(xué)樹脂封片,置于油鏡下鏡檢。計數(shù)200條精子進(jìn)行精子頂體完整率分類。精子頂體完整率根據(jù)頂體的外形和損傷情況,將精子頂體分為4種類型,并計算頂體完整率。Ⅰ型:頂體完整,精子外形正常。著色均勻,頂體邊緣整齊,有時可見清晰的赤道板。Ⅱ型:頂體輕微膨脹,精子質(zhì)膜(頂體膜)疏松膨大。Ⅲ型:頂體破壞,精子質(zhì)膜嚴(yán)重膨脹受損,著色淺,邊緣不整齊。Ⅳ型:頂體全部脫落,精子核裸露。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型均為頂體不完整。頂體完整率(%)的計算:頂體完整率=(頂體完整的精子數(shù)/精子總數(shù))×100%。Olympus顯微鏡觀察。
1.3.2 沙眼衣原體檢測 采用FQ-PCR法進(jìn)行沙眼衣原體定性檢測。診斷試劑盒和定性標(biāo)準(zhǔn)品由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供,檢測程序嚴(yán)格按說明書進(jìn)行,檢測儀器為DA-7600 FQ-PCR儀。
1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計處理,各組間采用單向方差分析,計量資料結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示。P<0.01為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
70例CT陽性組檢測結(jié)果精子頂體完整率為(78.36±8.36)%;30例CT陰性組精子頂體完整率為(88.12±3.65)%。結(jié)果顯示兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。
表1 70例CT陽性組和30例CT陰性組精子頂體完整率結(jié)果比較(±s,%)
表1 70例CT陽性組和30例CT陰性組精子頂體完整率結(jié)果比較(±s,%)
精子頂體完整率CT陽性組CT陰性組PⅠ型Ⅱ型Ⅲ型Ⅳ型78.36±8.36 11.99±5.03 4.88±3.65 5.33±1.36 88.12±3.65 9.34±3.23 2.35±2.06 1.33±1.02<0.01<0.01<0.01<0.01
精子頂體內(nèi)富含蛋白水解酶(頂體酶),在精子進(jìn)入卵子透明帶過程中,頂體酶起主要作用,幫助精子穿過卵細(xì)胞表面透明帶和放射冠,與卵細(xì)胞結(jié)合。頂體酶也能降低宮頸黏液的黏度,提高精子穿透宮頸黏液的能力。精子頂體完整率間接反映頂體酶的狀況,頂體完整率是反映頂體缺陷與否的重要指標(biāo)[4]。檢測頂體完整率有助于預(yù)示精子的受精能力。精子頂體缺陷與男性不育密切相關(guān)。
男性CT的感染率約為24%[5]。精液CT感染導(dǎo)致精子頂體完整率明顯降低的可能機(jī)制是:CT感染泌尿生殖系統(tǒng),CT的原體不僅可以吸附在精子表面,影響精子活力,而且可穿入精子頭、體、尾各部,在精子內(nèi)部形成始體并大量繁殖,直接造成精子膜和頂體的破壞[6],致使精子形態(tài)異常率增高。CT感染可刺激睪丸生精細(xì)胞、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子-α(TNF-α)[7],TNF-α升高后使活性氧化物質(zhì)(ROS)增高[8],過量的ROS可使精子線粒體內(nèi)、外膜上的不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng),使膜的脂質(zhì)排列松散,內(nèi)膜脊減少,使ATP合成降低。通過誘發(fā)白細(xì)胞增加影響精子形態(tài)[9]。大部分患者的精子形態(tài)異常都是由于頂體異常所致[10]。本文結(jié)果顯示,CT感染對精子頂體完整率的影響主要以頂體輕微膨脹,精子質(zhì)膜(頂體膜)疏松膨大的Ⅱ型為主。CT陽性組與CT陰性組精子頂體完整率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。說明精液CT感染導(dǎo)致精子頂體完整率明顯降低。
由此可見,CT感染導(dǎo)致精子頂體完整率明顯降低,精子頂體完整率明顯降低可使男性生育力下降而致不育。
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R374+.1
A
1003—6350(2011)08—130—02
李雪蘭(1972—),女,廣西梧州市人,主管檢驗師。
2011-03-02)