張 旭 蔣桂韜 王向榮 胡 艷 李昊幫 戴求仲

茶多酚(tea ployphenols,TP)又名茶單寧、茶鞣質(zhì),是茶葉中含有的一類以兒茶素類(cate chines)為主體的多羥基酚類化合物的總稱。茶多酚有很強的抗氧化作用,且有抑菌、降血脂、降膽固醇和免疫調(diào)節(jié)等多種功能,可作為飼料添加劑應(yīng)用于畜牧業(yè)生產(chǎn),前景十分廣闊。雞蛋營養(yǎng)豐富,是居民主要消費的畜產(chǎn)品之一,但由于雞蛋的膽固醇含量偏高(每枚雞蛋含 200～300 mg),老人和高膽固醇血癥患者不宜多食。飼糧中添加茶多酚能夠一定程度地提高畜禽生產(chǎn)性能,改善畜產(chǎn)品品質(zhì)[1-2],降低雞蛋中的膽固醇含量[3]。由此,本研究旨在從分析茶多酚對蛋雞生產(chǎn)性能、雞蛋品質(zhì)及蛋中脂肪、膽固醇和丙二醛(MDA)含量的影響入手,對茶多酚在蛋雞飼糧中的適宜添加量進(jìn)行優(yōu)選和分析,為茶多酚在蛋禽養(yǎng)殖和低膽固醇雞蛋生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

茶葉提取物:主要成分為茶多酚,茶多酚含量 ＞98%(杭州禾田生物技術(shù)有限公司)。

膽固醇標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.7%(中國計量科學(xué)研究院)。

微量 MDA測定試劑盒:南京建成生物工程研究所。

1.2 試驗動物與飼糧

試驗選用 56周齡健康羅曼褐蛋雞 384羽,采用單因子完全隨機設(shè)計,將試雞分為 4組,每組 6個重復(fù),每個重復(fù) 16羽。試驗為期 63 d,其中前 7天為預(yù)試期,正試期 56 d。

試驗基礎(chǔ)飼糧參照 NRC(1994)蛋雞的營養(yǎng)需要配制?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表 1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet(air-dry basis) %

1.3 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗 1組為對照組,飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗 2、3、4組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加 100、150和200 mg/kg茶多酚。

試驗蛋雞分上、下 2層階梯籠養(yǎng),各重復(fù)均勻分布于雞舍。自由采食與飲水,自然光照與人工光照相結(jié)合,自然通風(fēng)和橫向負(fù)壓通風(fēng)相結(jié)合。每日清理雞糞和撿蛋各 2次,按常規(guī)程序進(jìn)行雞只免疫和欄舍消毒。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 蛋雞生產(chǎn)性能

試驗期間每天按重復(fù)記錄產(chǎn)蛋總數(shù)、總蛋重、采食量、軟破蛋(軟殼蛋、破殼蛋)數(shù)、次蛋(畸形蛋、薄殼蛋、沙殼蛋)數(shù)和死淘數(shù),以組為單位統(tǒng)計平均蛋重、日產(chǎn)蛋量、產(chǎn)蛋率、合格蛋率、軟破蛋率、次蛋率、死淘率、平均日采食量和料蛋比。

1.4.2 雞蛋品質(zhì)

試驗期間每 7 d從各重復(fù)中抽取雞蛋樣品。每組取 6枚蛋用于測定蛋黃比率、蛋白比率、蛋殼厚度(蛋殼厚度測定儀)、蛋形指數(shù)(游標(biāo)卡尺測量法)、蛋黃顏色(蛋黃比色表)及蛋白高度(蛋白高度測定儀),計算哈夫單位(HU),并另從每組中取6枚蛋于 4℃冷藏 30 d后再次測定雞蛋哈夫單位。HU=100×lg(H-1.7W0.37+7.6),其中 H為蛋白高度(mm),W為蛋重(g)。

1.4.3 蛋黃中粗脂肪和膽固醇含量

每 7 d從各重復(fù)中抽取接近平均蛋重的雞蛋,每組取 6枚蛋用于分析蛋黃中粗脂肪含量(索氏提取法);另取 6枚蛋采用高效液相色譜(Agilent 1200)法測定蛋黃中膽固醇含量,前處理方法參照張蓉真等[4]的直接萃取法,準(zhǔn)確吸取蛋黃稀釋液1.0 mL于 10 mL離心管中,加入 1.0 mL 95%乙醇,用漩渦振蕩器混勻后,加入 2.5 mL乙醚,再次混勻后加入 2.5 mL石油醚,振蕩混勻,用離心機3 000 r/min離心 5 min,將上層萃取液取出在低于45℃條件下用氮氣吹干,加 2.0 mL無水乙醇溶解,用 0.22μm有機微孔濾膜過濾后進(jìn)樣,色譜條件如下。

色譜柱:ZORBAX Eclipse XDB-C18,4.6 mm×150 mm,5μm;流動相:乙腈 -異丙醇(4∶1,V/V);流速 :0.8 mL/min;柱溫:35 ℃;檢測波長:210 nm;進(jìn)樣量:10μL。

1.4.4 蛋黃中 MDA含量

蛋黃中 MDA含量采用 MDA試劑盒分析。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

結(jié)果以平均值 ±標(biāo)準(zhǔn)差表示,用 SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析,差異顯著者用 LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié) 果

2.1 茶多酚對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

各試驗組蛋雞生產(chǎn)性能見表 2,各組的平均日采食量、產(chǎn)蛋率、日產(chǎn)蛋量、料蛋比、死淘率、軟破蛋率和次蛋率均差異不顯著(P＞0.05),其中以試驗 2組的產(chǎn)蛋量最高,料蛋比最低。添加茶多酚的 3個試驗組的平均蛋重分別較對照組高 2.48%(P＜0.05)、0.53%(P＞0.05)和 0.18%(P＞0.05)。

表2 茶多酚對蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of tea polyphenols on performance of laying hens

2.2 茶多酚對蛋品質(zhì)的影響

茶多酚對蛋品質(zhì)的影響見表 3,各組的蛋黃比率、蛋白比率、蛋殼厚度、蛋形指數(shù)、蛋黃顏色和哈夫單位均差異不顯著(P＞0.05),其中 3個茶多酚試驗組的蛋形指數(shù)和蛋黃顏色均在一定程度上高于對照組。將蛋在 4℃貯藏 1個月后,與對照組比較,添加茶多酚的 3個試驗組蛋的哈夫單位值降低很少,分別較對照組高 7.13%(P＜0.01)、6.65%(P＜0.01)和 5.65%(P＜0.05)。

表3 茶多酚對蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of tea polyphenols on egg quality

2.3 茶多酚對蛋黃中粗脂肪、膽固醇和 MDA含量的影響

由表 4可知,添加茶多酚的 3個試驗組蛋黃中粗脂肪含量分別較對照組低 1.79%(P＞0.05)、2.04%(P＞0.05)和 1.07%(P＞0.05);添加茶多酚的 3個試驗組蛋黃中膽固醇和 MDA含量顯著降低,膽固醇含量(mg/蛋黃)分別較對照組低36.83%(P＜0.01)、37.46%(P＜0.01)和41.65%(P＜0.01),MDA含量分別較對照組低18.40%(P＜0.05)、19.76%(P＜0.05)和31.76%(P＜0.01)。

表4 茶多酚對蛋黃中粗脂肪、膽固醇和 MDA含量的影響Table 4 Effects of tea polyphenols on the contents of crude fat,cholesterol and MDA in yolks

3 討 論

3.1 茶多酚對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

本研究與前人研究結(jié)果不盡相同,Biswas等[5]在飼糧中添加 0.3%的綠茶粉(飼糧中茶多酚含量約 600 mg/kg)使蛋雞采食量顯著下降,平均蛋重顯著降低,與本研究結(jié)果不同的原因可能是茶多酚的來源和添加量不同。王人悅[6]的試驗表明茶多酚能夠顯著增加平均蛋重,顯著降低料蛋比,與本試驗結(jié)果具有一致性,其原因可能與茶多酚能夠提高蛋雞對營養(yǎng)物質(zhì)的利用率、改善蛋雞營養(yǎng)狀況、增強免疫力和減少應(yīng)激等因素有關(guān)。樓洪興等[7]在飼糧中添加 100、220和 400 mg/kg茶多酚使軟破蛋率顯著下降,而本試驗中茶多酚的添加對軟破蛋率和次蛋率均無顯著影響,此差異可能與試驗用茶多酚純度、飼糧組成、蛋雞周齡等因素有關(guān)。

3.2 茶多酚對蛋品質(zhì)的影響

茶多酚能夠延緩貯藏過程中哈夫單位的下降,在貯藏 1個月后添加茶多酚試驗組的哈夫單位顯著高于對照組。由于哈夫單位能夠反映蛋白的狀況和蛋的新鮮程度[8],說明茶多酚能夠延緩雞蛋蛋白品質(zhì)的下降,利于蛋的保鮮。影響蛋哈夫單位的因素有貯藏時間和溫度、蛋雞年齡、應(yīng)激、營養(yǎng)、維生素(維生素 C和維生素 E)的補充、疾病、藥物等[9-11],在環(huán)境和條件相同的情況下,營養(yǎng)和外源物質(zhì)的補充是影響哈夫單位的關(guān)鍵因素。茶多酚是具有清除自由基能力的抗氧化劑,自由基會對蛋白質(zhì)造成損傷,導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性和功能喪失[12],飼糧中添加茶多酚延緩蛋哈夫單位下降的主要原因可能就與其抗氧化作用有關(guān)。

3.3 茶多酚對蛋黃中粗脂肪、膽固醇和 MDA含量的影響

本研究在飼糧中添加 100～200 mg/kg茶多酚對蛋黃中粗脂肪含量無顯著影響,但能夠顯著降低蛋黃中的膽固醇含量,降低幅度達(dá) 36.83%～41.65%。茶多酚的降膽固醇作用,在一些研究試驗中也得到證實,尹靖東等[13]在飼糧中加入0.005‰～0.040‰的茶多酚可使蛋黃中膽固醇降低 6.22%～16.02%,其他研究人員也有過相似的報道[5,14]?？梢钥闯?隨著茶多酚在飼糧中用量的增大,蛋黃膽固醇的下降幅度有增大趨勢。由本研究結(jié)果可知,飼糧中添加茶多酚可用來生產(chǎn)低膽固醇雞蛋,綜合考慮成本、生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和降低膽固醇效果等因素,100 mg/kg為生產(chǎn)低膽固醇雞蛋的最佳添加量。

茶多酚的降膽固醇機理尚未完全清楚,雖然有研究表明茶多酚能夠降低高血脂人群血液中的膽固醇含量[15]和高脂膳食肥胖小鼠血漿中的膽固醇含量[16],但并不能顯著降低蛋雞血清中的膽固醇含量[14,17],這說明茶多酚在蛋雞體內(nèi)并不是單純地促使血液中的膽固醇分解或排泄掉,而很可能是主要通過減少膽固醇的合成來降低蛋中的膽固醇含量的。對蛋雞來說,肝臟和卵巢是合成膽固醇的主要場所[18],肝臟的合成速度最快,蛋黃中膽固醇主要來源于肝臟中的極低密度脂蛋白(VLDL)和卵黃蛋白原(VTG),蛋黃中膽固醇含量主要取決于 VLDL進(jìn)入卵母細(xì)胞的數(shù)量[19],茶多酚很可能是通過影響肝臟中脂蛋白的合成來影響蛋黃中膽固醇含量的,其機制還需試驗進(jìn)一步驗證。

本研究結(jié)果表明,飼糧中添加茶多酚能夠顯著降低蛋黃中 MDA含量,這與尹靖東等[20]的試驗結(jié)果一致。茶多酚的抗氧化作用與其具有清除體內(nèi)自由基的作用有關(guān)[21],其能夠減少蛋黃中脂質(zhì)過氧化物的形成,增加蛋黃中脂質(zhì)的穩(wěn)定性,有利于延長蛋的貨架期,本研究中茶多酚延緩雞蛋在貯藏過程中哈夫單位的下降也可證實此點。

4 結(jié) 論

①飼糧中添加 100～200 mg/kg茶多酚對蛋雞的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)無不良影響,并能夠顯著延緩蛋在貯藏過程中哈夫單位的下降。

②飼糧中添加 100～200 mg/kg茶多酚能夠使蛋黃中膽固醇含量下降 36.83%～41.65%,使蛋黃中 MDA含量降低 18.40%～31.76%。

③飼糧中添加茶多酚可用來生產(chǎn)低膽固醇雞蛋,100 mg/kg為生產(chǎn)低膽固醇雞蛋的最佳添加量。

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