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氯胺酮對束縛加懸吊應(yīng)激大鼠腦組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

2011-04-01 10:45陸艷娟楊成君李曉林吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心吉林長春130021
中國老年學(xué)雜志 2011年15期
關(guān)鍵詞:胺類神經(jīng)遞質(zhì)氯胺酮

陸艷娟 楊成君 李曉林 (吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心,吉林 長春 130021)

單胺類神經(jīng)遞質(zhì)是一種功能復(fù)雜的神經(jīng)活性物質(zhì),在應(yīng)激狀態(tài)下其含量異?!?~4〕,目前尚未有關(guān)于麻醉劑氯胺酮對應(yīng)激大鼠不同腦區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量變化影響的報道。

1 材料與方法

1.1 動物與分組 雄性SD大鼠,體重(250±10)g,吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。正常飲食,晝夜飼養(yǎng)48 h。實(shí)驗(yàn)前12~24 h禁食,不限水。取雄性SD大鼠30只隨機(jī)分為:應(yīng)激對照組(S組),將大鼠四肢用繃帶分別固定于鼠板上,頭朝下尾朝上懸掛,經(jīng)股靜脈注射5 ml生理鹽水,在1 h內(nèi)注射完畢;麻醉劑氯胺酮對照組(k1組),1 h內(nèi)經(jīng)股靜脈注入用5 ml生理鹽水稀釋的氯胺酮10 mg/kg;在束縛加懸吊后靜脈注入用5 ml生理鹽水稀釋的氯胺酮10 mg/kg(k2組),束縛加懸吊共6 h〔5〕。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 注射用氯胺酮,北京紫竹藥業(yè)有限公司;5-羥色胺(5-TH),去甲腎上腺素(NE),多巴胺(DA),美國SⅠGMA公司;鄰苯二甲醛,上?;瘜W(xué)試劑公司,L-半胱氨酸,上??颠_(dá)公司。熒光分光光度計RF-5301PC(日本島津公司),電熱三用水箱DS-1型(北京醫(yī)用儀器廠),冷凍離心機(jī)TGL-16G型(上海分析儀器廠)。

1.3 單胺類神經(jīng)遞質(zhì)測定與取材 各組動物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死。迅速取腦組織,分出不同腦區(qū),-80℃保存。用時取出,稱重,于冰冷、酸性正丁醇中制成勻漿,離心分離水相及有機(jī)相。5-HT在堿性條件下與鄰苯二甲醛縮合,形成具有熒光的化合物,NE、DA與氧化劑反應(yīng)生成具有熒光的化合物,上述熒光化合物強(qiáng)度與濃度成直線關(guān)系,即可測定其熒光強(qiáng)度〔6〕。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,數(shù)據(jù)結(jié)果以±s表示,組間比較用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠腦干NE、DA、5-HT含量比較 k2組腦干DA含量明顯高于S組(P<0.01),而NE明顯高于k1組(P<0.01);5-HT含量沒有明顯變化。見表1。組別NE DA 5-HT

表1 各組大鼠腦干NE、DA、5-HT含量(μg/g,±s,n=10)

表1 各組大鼠腦干NE、DA、5-HT含量(μg/g,±s,n=10)

與S組比較:1)P<0.05,2)P<0.01;與 k1組比較:3)P<0.05,4)P<0.01;下表同

S組1.01±0.07 1.53±0.21 6.01±2.58 k1組 0.49±0.082) 1.59±0.31 5.07±1.79 k2組 0.87±0.244) 2.12±0.192)4.34±1.45

2.2 各組大鼠小腦NE、DA、5-HT含量比較 k1組和k2組NE含量明顯高于S組(P<0.01);k2組5-HT含量明顯低于S組和k1組(P<0.01);DA含量沒有明顯變化。見表2。

表2 各組大鼠小腦NE、DA、5-HT含量(μg/g,±s,n=10)

表2 各組大鼠小腦NE、DA、5-HT含量(μg/g,±s,n=10)

組別NE DA 5-HT S組0.24±0.04 1.16±0.17 3.45±0.25 k1組 1.08±0.322) 1.32±0.39 3.46±0.51 k2組 1.29±0.162) 1.18±0.21 1.38±0.192)4)

2.3 各組大鼠皮質(zhì)NE、DA、5-HT含量比較 k1組及k2組皮質(zhì)NE含量都低于S組(P<0.05,P<0.01),DA含量高于S組(P<0.05)。5-HT含量各組比較無明顯差異(P>0.05)。見表3。

表3 各組大鼠皮質(zhì)NE、DA、5-HT含量(μg/g,±s,n=10)

表3 各組大鼠皮質(zhì)NE、DA、5-HT含量(μg/g,±s,n=10)

組別NE DA 5-HT S組4.33±1.94 1.18±0.35 5.43±1.44 k1組 1.08±0.222) 1.31±0.221) 5.17±0.84 k2組 1.78±0.611) 1.88±0.381)3)4.37±2.46

3 討論

近年來,抑郁癥是全球范圍內(nèi)最受關(guān)注的公共衛(wèi)生難題之一,應(yīng)激與抑郁癥的發(fā)病有著密不可分的相關(guān)性〔7〕。應(yīng)激反應(yīng)的重要特征之一是下丘腦-垂體-腎上腺軸激活,主要引起交感神經(jīng)興奮。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)包括NE、DA、5-HT等。應(yīng)激狀態(tài)時檢測腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量變化對研究這類遞質(zhì)的生理、生化功能有重要意義。在正常情況下,單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的分泌保持在一定水平,并且他們之間的比例協(xié)調(diào),從而維持功能穩(wěn)定。隨著應(yīng)激情況出現(xiàn),單胺類神經(jīng)遞質(zhì)也相應(yīng)發(fā)生改變,從而引起一系列功能紊亂癥狀的發(fā)生。當(dāng)個體暴露于應(yīng)激中,腎上腺軸活性增強(qiáng),導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)激素分泌增加,糖皮質(zhì)激素是主要的應(yīng)激激素之一,除能升高血壓外,還能影響腎上腺素α受體的表達(dá),增加兒茶酚胺類作用效果,同時還能通過對中樞神經(jīng)的影響,抑制前列腺素、緩激肽、5-HT等的合成,繼而引起血管收縮效應(yīng)。糖皮質(zhì)激素分泌增加還可以促進(jìn)腎小管的重吸收,增加血容量,從而升高血壓。5-HT在腦內(nèi)分布廣泛,是調(diào)節(jié)人體感覺、思維和行為等各種活動的重要神經(jīng)遞質(zhì),其水平變化與應(yīng)激密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)顯示,不同腦區(qū)的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、DA、5-HT對氯胺酮作用的敏感性不同,氯胺酮組小腦的5-HT明顯低于對照組,而NE含量明顯升高;腦干、皮質(zhì)DA含量升高,說明氯胺酮對腦中樞神經(jīng)產(chǎn)生一定的影響,以改變其神經(jīng)遞質(zhì)的釋放,其作用機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

1 Zhu W,Xie W,Pan T,et al.Comparison of neuroprotective and neu-rorestorative capabilities of rasagiline and selegiline against lactacystin-induced nigrostriatal dopaminergic degeneration〔J〕.J Neurochem,2008;105(5):1970-8.

2 Gonzalez MM,Aston-Jones G.Light deprivation damages monoamine neurons and produces a depressive behavioral phenotype in rats〔J〕.Proc Natl Acad Sci U SA,2008;105(12):4898-903.

3 Jahng JW,Kim NY,Ryu V,et al.Dexamethasone reduces food intake,weight gain and the hypothalamic 5-HT concentration and increases plasma leptin in rats〔J〕.Eur JPharmacol,2008;581(1-2):64-70.

4 Park SS,Schulz EM,Lee D.Disruption of dopamine homeostasis underlines selective neurodegeneration mediated by alpha-synuclein〔J〕.Eur J Neurosci,2007;26(11):3104-12.

5 李曉林,陸艷娟,李曉梅,等.束縛加懸吊應(yīng)激模型大鼠血清、腦組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量變化〔J〕.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)雜志,2008;12(11):1349-51.

6 張 燕,王洪斌,楊海霞,等.熒光分光度法測定大鼠不同腦區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)〔J〕.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2010;41(1):94-6.

7 馬 東,董文心.應(yīng)激與抑郁癥發(fā)病的相關(guān)性及新藥研究進(jìn)展〔J〕.世界臨床藥物,2009;30(9):557-61.

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