譚萍,張清均
(重慶開縣鎮(zhèn)安鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,重慶開縣 405416)
近年來,豬瘟在美洲、亞洲、歐洲等國家和地區(qū)呈現復發(fā)的趨勢,一些宣布已消滅豬瘟的國家(如法國、荷蘭、德國、比利時等)又見豬瘟復發(fā)的報道。在我國,豬瘟流行呈現典型豬瘟和非典型豬瘟共存、持續(xù)感染與隱性感染共存、免疫耐受和帶毒綜合征共存等現象。豬瘟新的流行形式給全世界養(yǎng)豬業(yè)提出了新的挑戰(zhàn),免疫接種仍是防制豬瘟的重要措施,疫苗對預防豬瘟起重大作用。因而通過加大免疫力度防控豬瘟的發(fā)生,為了檢測豬瘟免疫效果,制定合理的免疫程序,為各級動物防疫主管部門和養(yǎng)豬場場主制定豬瘟免疫計劃提供依據。
(一)預防為主是控制豬瘟的主導思想豬瘟的預防必須是在加強飼養(yǎng)管理的基礎上建立健全衛(wèi)生防疫制度。要嚴格執(zhí)行各項預防措施,定期消毒,嚴防病原傳入。要購買質量可靠的疫苗,注意運輸過程和使用前疫苗的保存,因為高溫和溫差變化大易使疫苗失效,已過期或已失效的疫苗不要使用;防疫注射要做到頭頭免疫,在疫情流行的豬場最好能做到“一豬一針”,如不能,至少得做到“一欄一針”。
(二)做好偽狂犬病等的控制與凈化豬場存在免疫抑制性病原如偽狂犬病病毒、豬呼吸與繁殖綜合征病毒等時,容易造成豬瘟免疫的失敗。如要在豬群中進行偽狂犬病免疫接種時,注意豬瘟免疫在前,偽狂犬病免疫在后,一般采用豬瘟免疫至少1周以后再進行偽狂犬病的免疫。
(三)緊急免疫一旦發(fā)生豬瘟,為減少損失可用加倍劑量的活苗進行緊急接種。
(四)隔離或淘汰帶毒母豬可用豬瘟診斷試劑盒或活體扁桃體熒光抗體等方法檢出豬瘟帶毒母豬。對檢出的帶毒母豬進行隔離,加強免疫或淘汰。在豬群中開展免疫監(jiān)測時,如發(fā)現經準確免疫或多次免疫而抗體水平仍然低下的母豬,應予以撲殺。
(五)防止混合感染或繼發(fā)感染豬瘟的發(fā)生常會混合感染或繼發(fā)感染其他疾病,在臨床上應全面考慮,特別是細菌性疾病,常增加豬群的死亡率??捎每股赜枰苑乐?,有條件的可做藥敏試驗篩選有效的抗生素,如不能,應輪換用藥,常用的有環(huán)丙沙星和恩諾沙星等廣譜抗菌藥物。
在我國,由于庭院式飼養(yǎng)還占有很大比例,規(guī)模化豬場規(guī)范程度差,各豬場技術水平不高和防疫設施不健全,長此以往便形成了CSF帶毒母豬持續(xù)感染,為CSF的水平傳播和垂直傳播提供了前提條件,而CSF帶毒母豬持續(xù)感染,可以產下經胎盤感染的仔豬,這種豬如果存活則成為持續(xù)感染者,并對豬瘟疫苗的免疫形成免疫耐受。
(一)免疫程序不合理隨著生產的發(fā)展和集約化程度的提高,原有的豬瘟免疫程序已不能解決生產問題。往往加大免疫劑量而沒有根據豬群抗體水平制定免疫程序,造成母源抗體干擾等免疫失敗。
(二)免疫劑量不足豬瘟疫苗的劑量與疫苗的保護性密切相關,當接種疫苗劑量少、疫苗抗原含量不足時,可造成豬瘟免疫不足,給免疫不足豬攻擊豬瘟強毒,強毒能在豬體內繁殖,成為帶毒豬,呈現亞臨床感染。
(三)疫苗質量與操作不正確生產中應用的豬瘟凍干疫苗是經過效檢合格后出廠的,但運輸和保存溫度過高,疫苗失真空,疫苗超過有效期,稀釋液不合格及疫苗稀釋后不能盡快用完,常常影響疫苗的質量。另外,注射疫苗時消毒不嚴格,接種劑量不準確,接種部位和方法不當,都會造成疫苗免疫效果降低。
(四)母豬持續(xù)感染帶毒妊娠母豬感染豬瘟病毒以后,常不表現臨床癥狀,可經胎盤感染仔豬,造成這些仔豬持續(xù)感染,產生免疫耐受性,往往出現免疫失敗的現象。
(五)其他疾病等因素的免疫干擾 當豬群中存在偽狂犬病、豬呼吸與繁殖綜合征等免疫抑制病原以及飼料霉變時,均可造成豬群免疫抑制,從而造成豬瘟的免疫失敗。
(六)毒株變異與疫苗保護性盡管豬瘟病毒只有一個血清型,但豬瘟兔化弱毒與流行毒株在保護性抗原上有程度不同的差異,這種差異影響豬瘟兔化弱毒疫苗的免疫保護力,但加大免疫劑量可獲得免疫保護。
對豬瘟抗體產生影響的因素很多,包括疫苗種類、免疫劑量、免疫抑制性疾病、環(huán)境因素個體差異等,其中免疫劑量和疫苗類型尤其重要。
目前,在我國由于制造工藝的不同,利用豬瘟兔化弱毒株生產的常用豬瘟疫苗有:豬瘟淋脾苗、豬瘟細胞苗以及新型疫苗。
1.豬瘟淋脾苗,是豬瘟兔化弱毒株接種成年家兔,無菌收獲含毒量高的淋巴結、脾臟制備而成的疫苗。其特點是免疫原性強,免疫效果最好;免疫后抗體產生快,持續(xù)時間長;淋脾苗中含有某些免疫相關因子,起到免疫增強作用;可用于緊急預防接種,效果好于細胞苗;使用計量相對較小,一般是1~2頭份;但由于用活體動物生產,生產量非常少,所以成本高。
2.豬瘟細胞苗,豬瘟兔化弱毒株接種犢牛睪丸細胞培養(yǎng),收獲細胞培養(yǎng)物,冷凍干燥制成的疫苗。其特點是免疫后抗體產生慢于組織苗;一般使用劑量相對較大,2~4頭份,甚至更多;細胞生產,生產量大,價格便宜;可用于超前免疫。乳兔苗禁止與菌苗同時注射。該疫苗要在-15℃以下避光保存,有效期為12個月。細胞苗大小豬都可使用。注射4 d后即可產生免疫力,注射后免疫期可達12個月。該疫苗宜在-15℃以下保存,有效期為l8個月。注射前應了解當地確無疫病流行。斷奶前仔豬可接種4頭份疫苗,以防母源抗體干擾。
豬瘟脾淋苗稀釋后,應放在冷藏容器內,嚴禁結冰,如氣溫在15℃以下,6 h內要用完;如氣溫在15℃~27℃,應在3 h內用完。豬瘟細胞苗隨用隨稀釋,稀釋后的疫苗應放冷暗處。并限2 h內用完。以上三種疫苗使用時按瓶簽注明頭份用無菌生理鹽水按每頭份1 ml稀釋,肌肉或皮下注射。注射以上三種疫苗后,均可能有少數豬在1~2 d內發(fā)生反應.但3 d后即可恢復正常。注苗后如出現過敏反應,應及時注射抗過敏藥物,如腎上腺素等。疫苗注射的時間最好是進食后2 h或進食前。豬瘟脾淋苗建議在加強免疫(如商品豬的第二次免疫和母豬的常規(guī)免疫接種)時.或者在緊急接種時使用。豬瘟細胞苗建議在首次免疫或乳前免疫(超免)時使用。豬瘟疫苗與藍耳病疫苗免疫至少要間隔一周以上時間。
我國現用的豬瘟兔化弱毒疫苗對預防目前流行的CSFV是完全有效的。用不同劑量的C株苗免疫豬,證實免疫劑量與保護水平密切相關。劑量不足時,攻毒后不能阻止強毒在體內復制和帶毒。免疫劑量提高到80~ 100PD (約 320~ 400 RID,RID為兔體反應量),攻毒后能制止亞臨床感染,所有耐過豬均不帶毒。
3.新型的豬瘟疫苗。
(1)豬瘟病毒基因缺失型弱毒疫苗?;蛉笔б呙缡怯没蚬こ碳夹g將強毒株毒力相關基因切除構建的活疫苗。病毒編碼的基因可以刪除,當某些與病毒復制無關的毒力基因缺失突變后,病毒毒力喪失,同時還保持著良好的免疫原性,該類疫苗安全性好,不易返祖;其免疫接種與強毒感染相似,肌體可對病毒的多種抗原產生免疫應答,免疫期長,免疫力堅實,尤其適用于局部接種,誘導產生黏膜免疫力,因而是較理想的疫苗。
(2)豬瘟病毒亞單位疫苗?;蚬こ讨亟M亞單位疫苗是用DNA重組技術,將編碼病毒原微生物保護性抗原的基因導人原核細胞或真核細胞,使其在受體細胞中高效表達,分泌保護性抗原肽鏈,然后再提取保護性抗原肽鏈,加入佐劑而制成的。這種抗原是病毒粒子的一部分,不含有核酸,因此非常安全,但是亞單位疫苗的免疫原性通常較低,需要佐劑合用,或偶聯到適當的載體上應用,從完整病毒粒子上制備具有免疫原性的亞單位疫苗,往往過程復雜,成本較高,而采用基因工程方法,克隆得到編碼病毒保護性抗原基因,在體外對其進行改造和修飾后,重新轉移到異源生物宿主體內或培養(yǎng)細胞中,可使病毒蛋白獲得大量表達,利用真核細胞高效表達系統(tǒng)來表達豬瘟病毒免疫原蛋白,并以此作為抗原可獲得豬瘟病毒亞單位疫苗。
(3)豬瘟病毒活載體重組疫苗?;蚬こ讨亟M活載體疫苗是用基因工程技術將保護性抗原基因(目的基因)轉移到載體中使之表達的活疫苗。病毒基因組的某一核苷酸序列被切除、突變或在該區(qū)域內插入外源性基因片段,而不影響病毒復制,這一序列稱為病毒的復制非必須區(qū)。利用基因工程的方法將復制非必須區(qū)克隆出來,體外改造后再將異源性病毒的保護性抗原基因及啟動子調控序列插入其中,通過體內同源重組技術獲得重組病毒,利用該組病毒接種動物,不僅可以誘導肌體產生針對異源性病毒的特異性免疫反應,而且能夠使宿主獲得針對載體病毒的免疫力。
(4)豬瘟病毒核酸疫苗。核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗,由編碼能引起保護性免疫反應的病原體抗原的基因片段和載體構建而成。其被導入機體的方式主要是直接肌肉注射,或用基因將配有原核復制組件和真核表達調控組件的粒為載體,將免疫原基因插入該質粒中,用裸核酸接種動物即可產生免疫保護。
豬瘟病毒核酸疫苗經臨床觀察證明,可以抵抗強毒攻擊,但是會出現40℃以上的高燒,免疫后可以檢測出輕微的T、B細胞反應。余興龍等分別構建了包含豬瘟病毒E2基因的重組表達質粒,并且證明它們對豬有較好的保護作用。
(5)豬瘟病毒全長感染性cDNA標記疫苗。全長cDNA標記疫苗是在分子水平上,將具有選擇性標記的基因,替換或克隆到致弱病毒全長cDWA中,獲得了重組病毒,以重組病毒接種動物后,可以區(qū)分抗體來自于自然感染還是標記疫苗免疫,從而鑒別出感染豬群和免疫豬群。
1.超前免疫。在進行超前免疫時一定要真正做到仔豬不吃初乳,實現完全意義上的“超前” 免疫,如果做不到這點,最后的效果還不如20日齡以后免疫。超前免疫一般使用豬瘟弱毒細胞苗免疫。不建議使用組織苗,但有的淋脾苗上也有超前免疫的說明。所以這就要看疫苗使說明書了。
2.豬瘟疫苗的選擇。對于飼養(yǎng)管理條件較好、無疫病流行的豬場,使用豬瘟細胞苗和組織苗的免疫效果相當。但對于一直使用細胞苗免疫的豬場。如果飼養(yǎng)環(huán)境、管理條件較差,CSF免疫抗體水平參差不齊,效價不高,又有散發(fā)性CSF存在,可考慮用組織苗替代細胞苗進行CSF免疫。以提高豬群整體CSF抗體水平。
3.豬瘟疫苗的免疫劑量。豬瘟淋脾組織苗免疫劑量應以不低于150RID為宜。豬瘟細胞苗劑量應以不低于750RID為宜。不必要盲目的再加大免疫劑量,造成養(yǎng)豬生產上的經費投入。
4.豬瘟疫苗的免疫時間最好要通過對免疫抗體的監(jiān)測做出決定,但多數人們采用:仔豬22~25日齡首免,60~70日齡二免。種母豬在斷奶后配種前免疫,種公豬每年免疫2次。
5.加強疫苗的運輸、保存和使用等環(huán)節(jié)上的管理這是確保疫苗使用有效性不可忽視的環(huán)節(jié)。
6.選用信譽度高的疫苗生產廠家生產的疫苗這是防止CSF免疫失敗的前提。CSF的防治是一項綜合性的系統(tǒng)工程,防治或消滅CSF不僅要堅持合理的免疫原則,還要制定對CSF的定期監(jiān)測制度。隨時淘汰CSF持續(xù)感染豬是CSF凈化的有效手段;提高豬的福利待遇, 防止其它疫病的感染也是防止CSF發(fā)生的輔助手段。
無論是過去還是現在,豬瘟疫苗對豬瘟的預防、控制及凈化起到了不可替代的作用。就疫苗的發(fā)展方向來說,滅活苗的使用已經成為歷史,弱毒苗雖然仍在使用,但如果要消滅豬瘟,弱毒苗應該禁止使用;重組疫苗雖然已經取得了很多成功,但要達到臨床應用還有很多工作要做;亞單位標記疫苗因能區(qū)分疫苗接種豬和野毒感染豬有強大的優(yōu)勢,如在臨床上推廣和應用可以對最終消滅豬瘟助一臂之力,但必須有與之相配套的鑒別診斷方法才能顯示其威力,在臨床上使用和推廣。
(略)