梁 英 任成財 姜 寧 滕占才 畢洪梅 金 迪

(1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，大慶 163319;2.哈爾濱青禾科技有限公司，哈爾濱 150078)

黃芩黃酮對肉仔雞生長性能和免疫功能的影響

梁 英1任成財2姜 寧1滕占才1畢洪梅1金 迪1

(1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，大慶 163319;2.哈爾濱青禾科技有限公司，哈爾濱 150078)

本試驗旨在探討黃芩黃酮對肉仔雞生長性能和免疫功能的影響。選擇500只1日齡的愛拔益加(AA)肉仔雞，隨機分為5個處理，每個處理5個重復(fù)，每個重復(fù)20只雞，各組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0(對照組)、5、10、15、20 mg/kg黃芩黃酮，試驗期為 49 d。分別在 21、35、49日齡測定各組生長性能、免疫器官指數(shù)和免疫球蛋白含量。結(jié)果表明:1)10 mg/kg添加組在試驗期內(nèi)對肉仔雞平均體重有較大提高(P＞0.05)，5 mg/kg添加組顯著提高了平均日采食量(P＜0.05)，全期料重比和平均日增重未受影響。2)21日齡時，試驗組脾臟指數(shù)顯著高于對照組(P＜0.05)，5和10 mg/kg添加組法氏囊指數(shù)顯著高于對照組(P＜0.05);35日齡時，5和10 mg/kg添加組脾臟指數(shù)也顯著高于對照組(P＜0.05);49日齡時10 mg/kg添加組胸腺指數(shù)顯著高于對照組(P＜0.05)。3)全期10 mg/kg添加組免疫球蛋白A的含量最高(P＞0.05)，35日齡時，5、10、15 mg/kg添加組免疫球蛋白G(IgG)的含量顯著高于對照組(P＜0.05)，49日齡時各試驗組IgG的含量均顯著高于對照組(P＜0.05)。由此可知，飼糧中添加適量的黃芩黃酮在一定程度上可以提高肉仔雞的生長性能，促進免疫器官的發(fā)育并提高免疫功能，其中以10 mg/kg的添加量效果較好。

黃芩黃酮;肉仔雞;生長性能;免疫功能

在長期的畜牧業(yè)生產(chǎn)中，因抗生素等藥物的普遍使用而產(chǎn)生的抗藥性和藥物殘留已嚴重危害人類健康，并造成環(huán)境破壞。因此，研究綠色、無公害并能夠提高畜禽免疫功能和營養(yǎng)素利用率的添加劑，生產(chǎn)綠色、安全的畜產(chǎn)品，已成為21世紀(jì)全球高效、低耗、少污染養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的必然趨勢。中草藥是我國特有的中醫(yī)藥理論和實踐的產(chǎn)物，其資源豐富，且歷史悠久。黃芩(Scutellaria baicalensis)是常用中草藥，其資源豐富，易栽培，主要有效成分為黃芩黃酮(flavonoids fromScutellaria baicalensis)。以往的研究多只集中在黃芩黃酮成分的抗氧化、清除自由基、抗病毒及抗腫瘤等作用方面［1－2］，而將其作為一種綠色天然植物源的添加劑，并在動物生產(chǎn)上應(yīng)用的研究鮮有報道。本試驗擬在肉仔雞基礎(chǔ)飼糧中添加黃芩黃酮，通過測定肉仔雞的生長性能、免疫器官指數(shù)和免疫球蛋白含量，探討黃芩黃酮對肉仔雞生長性能和免疫功能的影響，為黃芩黃酮在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用及開發(fā)新型綠色飼料添加劑，生產(chǎn)安全、無公害家禽產(chǎn)品提供數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

黃芩黃酮:從黃芩中提取，為本實驗室自制。高效液相色譜測定4種主要黃酮總含量為97.52%，其中黃芩苷89.19%、漢黃芩苷 3.29%、黃芩素3.71%、漢黃芩素1.33%。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧組成

選用體重相近1日齡健康的愛拔益加(AA)肉仔雞500只，采用單因素試驗設(shè)計，隨機分成5個處理，每個處理5個重復(fù)，每個重復(fù)20只，公母各占1/2。各組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0(對照組)、5、10、15、20 mg/kg 黃芩黃酮。試驗預(yù)試期3 d，正試期46 d。基礎(chǔ)飼糧是根據(jù)美國 NRC(1994)推薦的肉仔雞營養(yǎng)需要配制的玉米－豆粕型基礎(chǔ)飼料，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %

1.3 飼養(yǎng)管理

前3周采用平養(yǎng)，3周后采用籠養(yǎng)。雛雞自由采食，自由飲水，舍內(nèi)光照、溫度和濕度嚴格按照常規(guī)飼養(yǎng)管理要求進行，育雛期輔以人工保溫，按免疫程序?qū)﹄u雛進行新城疫及法氏囊免疫。每日換食換水前進行食槽和飲水器殺菌消毒。試驗期間詳細記錄各組飼料消耗及雞只健康狀況。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長性能指標(biāo)

試驗雞分別在21日齡、35日齡和49日齡以重復(fù)為單位空腹12 h后稱重。記錄雞的死亡數(shù)，及時結(jié)算飼糧，以便將死亡雞的飼糧消耗剔除。

記錄各組雞的健康狀況和各階段的采食量，并觀察雞群的變化。計算平均日采食量(ADFI)、平均體重(BW)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 器官指數(shù)和免疫球蛋白含量

試驗雞于21日齡、35日齡和49日齡時無菌采樣，每組隨機取3只，稱重后處死。屠宰時采血，制備血清，樣品于－20℃保存，待測有關(guān)指標(biāo)。摘取胸腺、脾臟、法氏囊，剔除脂肪后稱鮮重。血清中的免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)采用免疫透射比濁法進行測定，試劑盒購自濰坊3V生物工程有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與處理

采用SAS 9.0和DPS v7.05統(tǒng)計軟件對各數(shù)據(jù)進行方差分析和多重比較，試驗數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧中添加不同水平的黃芩黃酮對肉仔雞生長性能的影響

由表2可知，21日齡、35日齡和49日齡時，與對照組相比，各試驗組平均體重差異均不顯著(P＞0.05)，但各試驗組平均體重均高于對照組，且以10 mg/kg添加組最高，分別比對照組提高了6.15%、2.44%和 6.44%。平均日采食量最高的是5 mg/kg添加組，比對照組高出7.21%(P＜0.05)，平均日采食量最低的是15 mg/kg添加組，比對照組低5.42%(P＞0.05)。平均日增重最高的是10 mg/kg添加組，比對照組高出 2.99%(P＞0.05)。料重比最低的是10 mg/kg添加組，比對照組低 3.63%(P＞0.05)。

2.2 飼糧中添加不同水平的黃芩黃酮對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響

所有屠宰的肉仔雞免疫器官外觀未見異常。由表3可知，21日齡和35日齡時，各試驗組胸腺指數(shù)均高于對照組，但差異不顯著(P＞0.05)，各試驗組之間的差異也不顯著(P＞0.05)。各日齡階段胸腺指數(shù)最高的均是10 mg/kg添加組;49日齡時，10 mg/kg添加組胸腺指數(shù)與其他各組差異顯著(P＜0.05)，其他各組間差異不顯著(P＞0.05)。

表2 飼糧中黃芩黃酮水平對肉仔雞生長性能的影響Table 2 Effects of dietary flavonoids from Scutellaria baicalensis levels on growth performance of broilers

21日齡時，各試驗組脾臟指數(shù)均顯著高于對照組(P＜0.05)，各試驗組間顯著不差異(P＞0.05);35日齡時，5和10 mg/kg添加組的脾臟指數(shù)較高，分別比對照組提高了20.00%和21.82%(P＜0.05);49日齡時，各試驗組脾臟指數(shù)均高于對照組，但差異不顯著(P＞0.05)，各試驗組間脾臟指數(shù)也差異不顯著(P＞0.05)。

21日齡時，與對照組相比5和10 mg/kg添加組法氏囊指數(shù)顯著升高(P＜0.05)，其他試驗組略有升高，但差異不顯著(P＞0.05)。在35日齡和49日齡時，各試驗組與對照組相比法氏囊指數(shù)差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 飼糧中添加不同水平的黃芩黃酮對肉仔雞血清免疫球蛋白指標(biāo)的影響

由表4可見，隨著黃芩黃酮含量的增加，肉仔雞免疫球蛋白含量有先增加，后降低的趨勢。10 mg/kg添加組對全期免疫球蛋白含量影響最大。全期各試驗組IgA的含量與對照組相比均有提高，其中10 mg/kg添加組效果最好，但差異不顯著(P＞0.05)。

在21日齡時，各試驗組IgG的含量與對照組相比差異不顯著(P＞0.05)，在 35日齡時，5、10、15 mg/kg添加組IgG的含量與對照組相比差異顯著升高(P＜0.05)，49日齡時各試驗組對IgG的含量均顯著高于對照組(P＜0.05)。

肉仔雞生長各期各試驗組IgM的含量有升高的趨勢，但各組間均差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

3.1 飼糧中添加不同水平的黃芩黃酮對肉仔雞生長性能的影響

李同洲等［3］研究表明，基礎(chǔ)飼糧中添加0.05%的黃芩甙能夠改善斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，提高日增重，降低料重比，還可以降低血液中血糖含量，改善動物機體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收代謝，促進營養(yǎng)平衡。Chen等［4］報道，黃芩甙能夠通過抑制蛋白激酶松弛血管平滑肌，增加血液流動速度和養(yǎng)分供給。劉紅南等［5］研究表明，沙棘葉總黃酮在提高蛋白質(zhì)利用率的同時，對肉仔雞前期的肌肉生長有顯著的促進作用，可能機制是促進了肉雞幼雛十二指腸的發(fā)育。王國杰等［6］在飼糧中添加大豆黃酮飼喂肉雞，胸肌和腿肌分別提高6.5%和7.2%，表明大豆黃酮能促進肌肉蛋白質(zhì)沉積。朱建平等［7］對AA肉雞的試驗表明，添加3 mg/kg大豆黃酮，使42日齡肉雞胸肌肉重增加了8%。大豆黃酮既能提高生長激素(GH)水平，也能促進生長激素受體(GH-R)的發(fā)育，從而使胰島素樣生長因子－1(IGF-1)水平明顯提高。IGF-1對肌肉組織的增長具有強大的作用，最終導(dǎo)致動物生長加速。植物黃酮通過增強機體的免疫力，提高腸道內(nèi)有益菌群的數(shù)量，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)容易被吸收利用，可能是其改善動物的生長性能的機制之一。本試驗結(jié)果表明，黃芩黃酮添加劑量為10 mg/kg時，平均日增重最高、料重比最少，說明適宜的黃芩黃酮添加量對肉仔雞的生長性能有一定的促進作用。但AA肉雞49日齡時體重總體上有些偏低，可能因為本試驗是在炎熱的夏季進行，在此生長期內(nèi)，除1～7日齡外，多數(shù)時間的養(yǎng)殖環(huán)境溫度超過了肉雞適宜溫度范圍，易使肉雞發(fā)生熱應(yīng)激，從而造成肉雞的平均日采食量處于低水平，導(dǎo)致肉雞49日齡時平均體重偏低。

表3 飼糧中黃芩黃酮水平對肉仔雞胸腺、脾臟、法氏囊指數(shù)的影響Table 3 Effects of dietary flavonoids from Scutellaria baicalensis levels on thymus，spleen and bursa of Fabricius indices of broilers %

表4 飼糧中黃芩黃酮水平對肉仔雞血清IgA、IgG和IgM的影響Table 4 Effects of dietary flavonoids from Scutellaria baicalensis levels on IgA，IgG and IgMin serum of broilers g/L

3.2 飼糧中添加不同水平的黃芩黃酮對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響

胸腺、脾臟和法氏囊是禽類的重要免疫器官，禽類的許多傳染病往往會侵害這3個免疫器官，使其腫大或萎縮，脾臟、胸腺指數(shù)也是反映機體免疫器官發(fā)育的指標(biāo)。胸腺是免疫系統(tǒng)的重要器官，參與機體的非特異性免疫功能，對細胞免疫以及體液免疫都有重要的調(diào)節(jié)作用。法氏囊是禽類特有的中樞免疫器官，是B細胞分化成熟的場所。法氏囊指數(shù)是法氏囊生長發(fā)育程度的一個指標(biāo)，代表了機體免疫狀態(tài)。脾臟是機體最大的外周免疫器官，是機體細胞免疫和體液免疫的中心，是產(chǎn)生致敏淋巴細胞和抗體的重要場所。王洪武等［8］研究表明，淫羊藿總黃酮可以增加免疫低下小鼠的體質(zhì)量，雖對脾臟質(zhì)量無明顯增加作用，但可明顯增加脾臟細胞絕對數(shù)量和每克脾臟組織的細胞相對數(shù)量，提示淫羊藿總黃酮對免疫低下小鼠細胞免疫功能具有顯著的恢復(fù)作用，同時對體液免疫也具有增強作用。

本試驗結(jié)果表明，在1～21日齡，與對照組相比，5和10 mg/kg添加組胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)較高，除胸腺指數(shù)外，其他2項與對照組相比有顯著差異，但這2項在試驗組之間差異不顯著，這說明黃芩黃酮的添加促進了肉仔雞的免疫反應(yīng)。在21～49日齡，從總體上看，10 mg/kg添加組的各項指數(shù)最高，各項指標(biāo)均好于其他試驗組，且21～35日齡的效果比1～21日齡和35～49日齡好。本試驗也證明，各試驗組與對照組相比，黃芩黃酮可以促進各免疫器官指數(shù)的增加，這種影響說明黃芩黃酮對促進免疫器官的發(fā)育有積極作用，其原因有待于進一步研究。

3.3 飼糧中添加不同水平的黃芩黃酮對肉仔雞免疫球蛋白指標(biāo)的影響

IgA、IgG、IgM 是禽類的3種免疫球蛋白，這3種免疫球蛋白是體液免疫系統(tǒng)功能和狀態(tài)的最重要標(biāo)志。IgA分血清型和分泌型2種，血清型IgA可介導(dǎo)調(diào)理吞噬ADCC(抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒)作用;分泌型IgA(SIgA)是機體黏膜防御系統(tǒng)的主要成分，覆蓋在鼻、咽、氣管、腸和膀胱黏膜的表面，它能抑制微生物在呼吸道上皮附著，減緩病毒繁殖，是黏膜重要屏障，對某些病毒、細菌和一般抗原具有抗體活性，是防止病原體入侵機體的第一道防線。外來抗原進入呼吸道或消化道，局部免疫系統(tǒng)受到刺激后，無需中央免疫系統(tǒng)的參與，自身就可進行免疫應(yīng)答，產(chǎn)生分泌型抗體，即SIgA。已有研究證明，呼吸道分泌液中SIgA含量的高低直接影響呼吸道黏膜對病原體的抵抗力，二者呈正相關(guān)。本試驗表明，雖然黃芩黃酮添加組對IgA含量影響與對照組比較差異不顯著，但是各添加組血清IgA含量比對照組都有所提高。

IgG是動物受到抗原刺激后，體內(nèi)產(chǎn)生的能與抗原特異性相互作用的一類球蛋白，是機體主動免疫產(chǎn)生的主要抗體，動物機體抗感染的主要因素，在體內(nèi)發(fā)揮抗菌、抗病毒、抗毒素等免疫學(xué)活性，在體液免疫中極其重要，同時它還參與抗腫瘤、抗寄生蟲和一些變態(tài)反應(yīng)等多種免疫過程。蔡仙德等［9］研究發(fā)現(xiàn)，黃芩苷可以提高小鼠血清溶血素和脾臟B細胞分泌溶血素的含量，并可明顯增加小鼠血清血凝素抗體的含量，即黃芩苷可以明顯提高小鼠血清IgM和B細胞分泌IgM的水平，對血清IgM含量的影響呈濃度依賴性，并可顯著增加血清IgG的含量，體內(nèi)用藥還可增強機體的體液免疫功能。Friesen等［10］研究也表明，飼喂黃芩甙飼糧的試驗豬，血液中IgG水平有所提高。這一結(jié)果說明在飼糧中添加黃芩黃酮能夠很好地發(fā)揮抗菌和抗病毒的作用。本次試驗結(jié)果表明，在35日齡和49日齡時，各試驗組IgG水平與對照組相比有顯著的提高。

IgM的含量僅次于IgG的含量，但其分子量在免疫球蛋白中是最大的，IgM產(chǎn)生時間很早，所以檢測IgM含量可用于早期診斷。IgM調(diào)理和殺菌作用都要比IgG強，但作用范圍小、半衰期也短，因此主要在感染早期具有免疫先鋒的作用。動物體血清中的抗體水平高低為評估其免疫狀況的重要指標(biāo)之一。試驗證明，黃酮可以提高機體的體液免疫水平，并能提高血清免疫球蛋白水平。本試驗表明，黃芩黃酮添加組IgM與對照組比較差異不顯著，但均高于對照組，說明黃芩黃酮對IgM含量的影響有一定的積極意義，其中以10 mg/kg添加組效果較好。

綜上所述，黃芩黃酮對肉仔雞生長性能及免疫機能具有一定的促進作用，可以作為一種較好的抗生素替代品、免疫增強劑和代謝調(diào)控劑。因此，將黃芩甙開發(fā)為新型的“綠色飼料添加劑”具有廣闊的應(yīng)用前景，但對其詳細的作用機理還有待于進一步的深入研究。

4 結(jié)論

①飼糧中適量添加黃芩黃酮可促進肉仔雞的生長，提高平均體重和日增重，降低料重比。

②飼糧中添加適量黃芩黃酮對肉仔雞的免疫功能有較大的影響，可以促進免疫器官指數(shù)的增加，對免疫器官的發(fā)育有積極作用，可增強機體的免疫功能。

③本試驗的肉仔雞飼糧中黃芩黃酮的適宜添加量為10 mg/kg。

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Author，LIANG Ying，professor，E-mail:liangying-64@163.com

(編輯 武海龍)

Effect of Flavonoids fromScutellaria baicalensison G row th Performance and Immune Function of Broilers

LIANG Ying1REN Chengcai2JIANG Ning1TENG Zhancai1BIHongmei1JIN Di1
(1.Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing163319，China;2.Harbin Qinghe Technology Co.，Ltd.，Haerbin150078，China)

This experimentwas conducted to investigate the effects of flavonoids fromScutellaria baicalensison growth performance and immune functions of broilers.Five hundred one-day-old Arbor Acres broilerswere random ly divided into 5 treatments with 5 replicates in each treatment and 20 broilers in each replicate.The basal dietswere supplemented with 0(control group)，5(EG5)，10(EG10)，15(EG15)and 20(EG20)mg/kg flavonoids fromScutellaria baicalensis，respectively.Grow th performance，immune organ indices and immunoglobulin contentwere determ ined in different periods.The experiment lasted for49 days.The results showed as follows:1)BW of broilers in EG10 was the highest among the 5 treatments(P＞0.05);ADFIof broilers was significantly increased in EG5(P＜0.05);supplementation of flavonoids fromScutellaria baicalensishad no effect on the F/G and ADG during the whole experimental period.2)At21 days of age，spleen index of broilers in the experimental groupswere significantly higher than that in control group(P＜0.05)，and fabricius index of broilers in EG5 and EG10 was significantly higher than that in control group(P＜0.05);at 35 days of age，spleen index of broilers in EG5 and EG10 was significantly higher than that in control group(P＜0.05);at 49 days of age，thymus index of broilers in EG10 was significantly higher than that in control group.3)The IgA content of broilers in EG10 was the highest during the whole experimental period(P＞0.05);at35 days of age，the IgG content of broilers in EG5，EG10 and EG15 was significantly higher than that in control group(P＜0.05)，and at 49 days of age，IgG content of all experimental groups was significantly higher than that in control group(P＜0.05).In conclusion，supplementation of proper amount of flavonoids fromScutellaria baicalensisto the diet can improve growth performance and enhance immune organ growth and function of broilers;and 10 mg/kg group had the best effect among the five groups.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2011，23(8):1409-1414］

flavonoids fromScutellaria baicalensis;broiler;growth performance;immune function

S831

A

1006-267X(2011)08-1409-06

10.3969/j.issn.1006-267x.2011.08.021

2011－03－01

黑龍江省墾區(qū)科研資助項目(HNK10A-08-06);黑龍江省教育廳科研資助項目(11513071)

梁 英(1964—)，女，黑龍江賓縣人，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事中草藥有效成分提取分離與應(yīng)用研究。E-mail:liangying-64@163.com