鄭子棟

(河南省食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鄭州 450003)

硫酸氫氯吡格雷為血小板聚集抑制劑，用于預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化血栓的形成，由法國Sanofi－Aventis原研，1998年美國上市，2001年在我國批準(zhǔn)上市，商品名波立維(Plavix)。根據(jù)文獻(xiàn)資料［1，2］，本文采用高效液相色譜法，以手性色譜柱，建立了硫酸氫氯吡格雷片中硫酸氫氯吡格雷的含量測定方法，方法簡便，準(zhǔn)確。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters 2695高效液相色譜儀帶二極管陣列檢測器，ULTRON ES－OVM 手性色譜柱(15 cm ×4mm，5μm)，ELGA Classic超純水器，Sartorius ME235S分析天平。

1.2 試藥及試劑 硫酸氫氯吡格雷對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所)，硫酸氫氯吡格雷片由河南XSK制藥公司提供，批號(hào):010826，010917，010921;乙腈為色譜純，乙酸銨為優(yōu)級(jí)純。

2 色譜條件

ULTRON ES－OVM 手性色譜柱 (15 cm ×4mm，5μm)，以 0.03 mol·L－1的乙酸銨溶液－乙腈(78∶22)為流動(dòng)相，流速:0.8mL·min－1，柱溫:30 ℃，進(jìn)樣量:10μL，檢測波長為230 nm。在上述色譜條件下，硫酸氫氯吡格雷的主峰保留時(shí)間約為 11.5min(見圖1)。

3 方法與結(jié)果

圖1 硫酸氨氯吡格雷的色譜圖

3.1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 取硫酸氫氯吡格雷溶液適量，置10mL量瓶中，制成每mL約含0.1mg的溶液，水浴加熱4 h，高溫破壞后，照上述色譜條件，進(jìn)樣10μL，結(jié)果見圖2，主峰和降解雜質(zhì)峰分離較好。

圖2 硫酸氫氯吡格雷的高溫破壞降解產(chǎn)物色譜圖

3.2 線性關(guān)系測定 精密稱取硫酸氫氯吡格雷對(duì)照品適量，置100mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每mL約含1mg的溶液，作為對(duì)照品貯備液，精密量取上述貯備液2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL、7.0mL，分別置 50mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得 40.8、61.3、81.7、102.1、122.5、142.9 μg·mL－1的對(duì)照品溶液，精密量取 10μL進(jìn)樣，記錄色譜圖。以峰面積(A)與溶液濃度(C)進(jìn)行線性回歸，線性方程為:A=4.6152 ×10－8C －0.00066，r=0.9998。結(jié)果表明，硫酸氫氯吡格雷在 40.8 ～142.9 μg·mL－1濃度范圍內(nèi)，與峰面積呈良好線性關(guān)系。

3.3 精密度試驗(yàn) 取線性關(guān)系測定項(xiàng)下的溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，結(jié)果峰面積的RSD為0.83%(n=5)，精密度良好。

3.4 溶液的穩(wěn)定性 取線性關(guān)系測定項(xiàng)下的溶液，分別于0、1、3、6、9、12 h 進(jìn)樣 10μL，記錄色譜圖。結(jié)果峰面積的RSD為1.1%(n=6)，溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

3.5 回收率試驗(yàn) 分別精密稱取硫酸氫氯吡格雷對(duì)照品約75mg、100mg、125mg(各3 份)，分別置100mL 量瓶中，按處方比例加入微晶纖維素、羥丙纖維素及硬脂酸鎂等輔料，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，精密量取續(xù)濾液10μL照上述色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。另取硫酸氫氯吡格雷對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每mL約含100 μg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算即得。測得平均回收率97.5%，RSD為1.6%(n=9)。

3.6 樣品的測定 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于硫酸氫氯吡格雷100mg)，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，照回收率測定項(xiàng)下的方法分別測定，結(jié)果見表1。

表1 硫酸氫氯吡格雷含量測定結(jié)果(n=3)

4 討論

4.1 本文采用手性色譜柱，能使主成分與雜質(zhì)有效分離，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，滿足測定要求。

4.2 硫酸氫氯吡格雷原料晶型有Ⅰ型與Ⅱ型，Ⅱ型申請(qǐng)專利保護(hù)，本試驗(yàn)所用硫酸氫氯吡格雷片的原料藥為晶型Ⅰ。