巫旗生，王曉清，曾亞英，馬 曉，何橫忠

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128）

甲魚(yú)又稱(chēng)團(tuán)魚(yú)，學(xué)名為中華鱉（Trionyx sinensis），是一種名貴食用水產(chǎn)動(dòng)物[1]。甲魚(yú)營(yíng)養(yǎng)豐富，含有蛋白質(zhì)、脂肪、鈣、鐵、動(dòng)物膠、角蛋白及多種維生素，是不可多得的滋補(bǔ)品，甲魚(yú)還可入藥，在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上十分暢銷(xiāo)，深受水產(chǎn)養(yǎng)殖戶歡迎。甲魚(yú)的性別與其生長(zhǎng)速度存在較大的聯(lián)系，雄魚(yú)生長(zhǎng)較雌性快20%以上，且繁殖過(guò)程中，中華鱉的雌、雄配種比例可達(dá)到6∶1，甚至10∶1，因此，在生產(chǎn)上需要有選擇性地繁殖雌鱉或雄鱉。

目前，學(xué)者們已報(bào)道了許多龜鱉目動(dòng)物中存在著溫度影響子代性比的現(xiàn)象（TSD），認(rèn)為孵化溫度是影響鱉、龜、鱷魚(yú)等爬行動(dòng)物性別的主要因子。一部分學(xué)者認(rèn)為中華鱉的雄性孵化率隨溫度上升而降低，另一部分學(xué)者則認(rèn)為中華鱉的雄性孵化率是隨溫度的上升而上升的，且認(rèn)為孵化溫度影響中華鱉的性別[2－6]。對(duì)于中華鱉的性別決定機(jī)制是否由孵化溫度決定的，至今尚無(wú)有力的證據(jù)。因此，本試驗(yàn)研究了孵化溫度對(duì)中華鱉性別決定的影響，以此來(lái)探明中華鱉的性別決定機(jī)制，為我國(guó)的中華鱉良種選育提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

受精中華鱉卵300粒（長(zhǎng)沙鑫煌水產(chǎn)科技有限公司臨湘中華鱉養(yǎng)殖基地），試驗(yàn)分組情況見(jiàn)附表。孵出后的稚鱉前期采用小雜魚(yú)剁碎投喂，后期以投喂稚鱉飼料為主。

附表 不同孵化溫度產(chǎn)生的子代性別比

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 控溫孵化

將中華鱉卵埋在裝滿細(xì)沙的塑料盆中，分別放置于溫度為22、25、28、32和35℃的恒溫孵化箱中孵化。采用在恒溫孵化箱內(nèi)灑水和在孵化盆的細(xì)沙表面噴水的方法來(lái)維持孵化濕度，使其相對(duì)濕度保持約85%。

1.2.2 稚鱉飼養(yǎng)

將不同溫度下孵出的稚鱉放置在同一溫室的不同池子中，池內(nèi)設(shè)有曬被臺(tái)供幼鱉休憩。用恒溫加熱棒加熱，使水溫保持在30℃。在相同條件下采用常規(guī)的飼養(yǎng)管理方法，飼養(yǎng)過(guò)程中需及時(shí)清除剩余餌料，防止殘餌污染水質(zhì)，并定期進(jìn)行消毒。

1.2.3 性別的鑒定

將稚鱉飼養(yǎng)到個(gè)體性別特征較明顯時(shí)，進(jìn)行性別的鑒定[7]。雌鱉尾部較短，不能自然伸出裙邊外或外露很少，體型圓，體高高，背甲呈卵圓形，前后基本一致，腹部中間的軟甲，十字形后肢間距較寬；雄鱉尾部較長(zhǎng)，能自然伸出裙邊外，體型稍長(zhǎng)，體高隆起而薄，背甲呈長(zhǎng)卵圓形，后部較寬，腹部中間的軟甲，曲玉形，后肢間距較寬較窄。

2 結(jié)果與分析

2.1 孵化結(jié)果

不同溫度組孵化積溫變化和孵化率的結(jié)果見(jiàn)圖1、2。

圖1 不同溫度組孵化積溫變化趨勢(shì)

由圖1可見(jiàn)，通過(guò)用恒溫孵化箱對(duì)中華鱉卵進(jìn)行孵化，不同溫度組所需的孵化時(shí)間及孵化積溫各不相同。除22℃組未能進(jìn)行正常孵化外，其他溫度組均能正常孵化。其中，25℃組孵化所用時(shí)間最長(zhǎng)，約87 d；35℃組孵化時(shí)間最短，約41 d。中華鱉卵孵化積溫為 34 440～52 200 ℃·h－1。

圖2 不同溫度組的孵化率

由圖2可見(jiàn)，在不同孵化溫度下，孵化率各不相同。除22℃組的中華鱉卵不能進(jìn)行正常孵化外，在一定溫度范圍內(nèi)孵化率隨溫度升高而增大，最高孵化率達(dá)到了96%。

2.2 性別鑒定結(jié)果

性別鑒定結(jié)果見(jiàn)圖3。

從圖3可見(jiàn)，孵化溫度對(duì)中華鱉性別分化是有明顯影響的，在一定孵化溫度范圍內(nèi)，雄性個(gè)體的孵化比例隨溫度升高而增大，雌性個(gè)體的孵化比例隨溫度升高而降低。其中，25℃組的雄性個(gè)體孵化率最低，為27.27%；雌性個(gè)體孵化率最高，為72.73%。而35℃組的雄性個(gè)體孵化率最高，為67.57%；雌性個(gè)體孵化率最低，為32.43%。

圖3 可進(jìn)行性別鑒定的中華鱉雌雄比例

2.3 顯著性檢驗(yàn)

不同的孵化溫度產(chǎn)生不同的子代性別比，X2檢驗(yàn)結(jié)果顯示，在25、32和35℃孵化溫度下差異顯著，子代性別比與♂∶♀=1∶1的假設(shè)出現(xiàn)偏差；而28和30℃則差異不顯著，符合1∶1假設(shè)。

3 討論

劉筠等認(rèn)為，中華鱉的胚胎發(fā)育適宜溫度范圍為22～36℃[8]。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，中華鱉的孵化溫度為22℃，其胚胎不能正常發(fā)育。本試驗(yàn)證明了孵化溫度影響中華鱉的孵化率，28～32℃為其最適孵化溫度，符合相關(guān)報(bào)道[9－12]。

目前認(rèn)為兩棲爬行動(dòng)物性別決定的方式有基因型性別決定和環(huán)境性別決定[13－16]。具有TSD機(jī)制動(dòng)物的特征表現(xiàn)為孵化溫度影響著子代性別比，而孵化溫度可以決定稚鱉的性別比、影響孵化周期的長(zhǎng)短和孵化率的高低[17－20]。

本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，中華鱉的雄性率隨溫度的升高而增大，雌雄率隨溫度的升高而降低，說(shuō)明孵化溫度影響中華鱉的子代性別比。但是，根據(jù)X2檢驗(yàn)結(jié)果又不能說(shuō)明孵化溫度是中華鱉的性別決定機(jī)制。因此，孵化溫度對(duì)中華鱉的性別決定是有顯著影響的，至于中華鱉的性別決定機(jī)制問(wèn)題，尚需進(jìn)一步研究。

有關(guān)中華鱉性別決定的研究不僅有助于豐富脊椎動(dòng)物性別決定的理論，而且有助于人類(lèi)能按照自己的意愿有效地控制爬行動(dòng)物的性別。通過(guò)人為控制中華鱉的孵化溫度來(lái)獲得較高比例的雄性個(gè)體或雌性個(gè)體，可以提高養(yǎng)殖中華鱉所帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)效益，具有重要的理論研究?jī)r(jià)值及實(shí)際應(yīng)用意義。

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