張 晶，徐樨巍，丁召路，于飛鴻，王國(guó)麗

（首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院消化內(nèi)科，北京 100045）

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）已被證實(shí)與兒童一些常見(jiàn)疾病均有密切關(guān)系，可引起消化系統(tǒng)疾病如消化性潰瘍、胃炎等［1，2］，甚至是成人的胃癌［3］;還與消化系統(tǒng)外疾病，如缺鐵性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩等密切相關(guān)［4］。有報(bào)道中國(guó)人群感染率為40%～90%，平均59%;而且目前中國(guó)兒童感染率為25%～50%，并以平均每年0.5%～1%的速度遞增［5］。因此，找到一種使用簡(jiǎn)便、價(jià)格適宜的檢測(cè)Hp感染的方法對(duì)防治Hp感染有很大的社會(huì)價(jià)值。本研究使用唾液幽門螺桿菌（Helicobacter pylori in Saliva，HpS）測(cè)試板技術(shù)［6］測(cè)定了150例有消化道癥狀的兒童，并同時(shí)與胃鏡活檢組織快速尿素酶試驗(yàn)（rapid urease test，RUT）檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年7月至2011年2月底我院消化科門診及病房因有消化道癥狀行胃鏡檢查的患兒150例為對(duì)象，其中男性82例，女性68例;年齡4～16歲，平均9.87歲。十二指腸潰瘍8例，胃潰瘍1例;十二指腸（球）炎56例，下端食道炎52例（其中食道-胃-十二指腸炎12例）;賁門失弛緩2例，慢性胃竇炎（顆粒樣改變）13例，慢性淺表性胃炎18例。所有患者同時(shí)進(jìn)行胃鏡下RUT和HpS檢測(cè)。

1.2 HpS檢測(cè)方法 使用美國(guó)美利泰格公司生產(chǎn)的HpS抗原測(cè)試板，嚴(yán)格按說(shuō)明書方法操作:告知患兒準(zhǔn)備唾液1～2 mL備檢;將唾液吐入塑料杯中;用吸管吸取4滴唾液，滴入取樣杯中;滴加2滴緩沖液于取樣杯中;更換吸管，充分混勻后，吸取3～4滴混合液滴入唾液板的吸樣窗口，5～15 min觀察結(jié)果。結(jié)果判定:指示窗口顯示T和C線，說(shuō)明Hp陽(yáng)性;只顯示C線，說(shuō)明Hp陰性。（注意:測(cè)定前1 h內(nèi)患兒不能進(jìn)食水）。

1.3 胃鏡下胃竇黏膜活檢RUT檢測(cè)方法 使用福建三強(qiáng)生物化工有限公司生產(chǎn)的胃幽門螺桿菌快速尿素酶診斷試劑盒（pH指示劑法）進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書進(jìn)行常規(guī)操作及結(jié)果判定。觀察5 min顏色變粉色視為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 13.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，胃與口腔Hp感染檢測(cè)結(jié)果的一致性采用Kappa分析。

2 結(jié)果

150 例患消化道癥狀的患兒，HpS檢出的陽(yáng)性率為43.33%（65/150），RUT 檢測(cè)的陽(yáng)性率為 27.33%（41/150），而且RUT檢測(cè)陽(yáng)性的患兒，85%HpS檢測(cè)也為陽(yáng)性，提示胃Hp感染者口腔存在高Hp檢出現(xiàn)象。150例患兒中HpS檢出陽(yáng)性65例，胃鏡RUT檢出陽(yáng)性41例，陽(yáng)性符合率（敏感度）為85.37%，陰性符合率（特異度）為72.48%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為53.85%，陰性預(yù)測(cè)值為92.94%（表1）。對(duì)兩種檢測(cè)方法所得出的結(jié)果進(jìn)行Kappa分析（Kappa=0.489，P＜0.01），提示兩種方法有很好的一致性。

表1 HpS檢測(cè)與胃鏡RUT檢測(cè)結(jié)果比較

3 討論

目前診斷Hp感染的方法很多，主要分為侵入性檢查和非侵入性檢查兩大類。前者包括細(xì)菌培養(yǎng)、組織學(xué)檢查、RUT等均需在電子胃鏡進(jìn)行侵入性胃黏膜活檢基礎(chǔ)上進(jìn)行;后者主要包括血清學(xué)方法、同位素標(biāo)記的13C或14C呼氣試驗(yàn)、糞便抗原及分子生物學(xué)（如PCR）檢測(cè)等。由于侵入性檢查存在實(shí)驗(yàn)技術(shù)要求高、儀器價(jià)格昂貴、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、結(jié)果易受取材部位影響及受試者耐受性查等限制，同時(shí)還可能存在交叉感染問(wèn)題，近年來(lái)，非侵入性檢查成為人們研究的熱點(diǎn)。近年研究發(fā)現(xiàn)［7］，胃Hp陽(yáng)性兒童，其中68%可在牙斑檢測(cè)到Hp，且經(jīng)PCR測(cè)定兩者為同一菌株;而胃Hp陰性兒童，24%牙斑有Hp存在，因此作者認(rèn)為口腔有Hp寄生者，大多數(shù)同時(shí)患有胃Hp感染。少數(shù)人，口腔有Hp，但胃里沒(méi)有Hp寄生，患者處于疾病的早期，感染僅停留在口腔之中，隨著唾液，Hp遲早會(huì)流到胃里;另有研究者用PCR技術(shù)及ELISA也證實(shí)唾液中存在高 Hp 檢出率（46.1%～87.5%）［8，9］，提示口腔是Hp除胃以外的另一重要的集聚點(diǎn)。有學(xué)者進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在我國(guó)Hp有明顯的家庭聚集現(xiàn)象［10］:對(duì)結(jié)婚平均6.5年的150對(duì)夫妻研究發(fā)現(xiàn)一方Hp（+）者，配偶另一方Hp（+）為78.94%;而一方Hp（－）者其配偶Hp陽(yáng)性率為20%。另一學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)［11］父母雙方都感染Hp，兒童感染的機(jī)會(huì)是44%;父母一方感染Hp，兒童感染的機(jī)會(huì)是30%;父母都未感染Hp，兒童感染的機(jī)會(huì)是21%，提示Hp傳染的重要途徑可能為口-口方式。因此，口腔唾液中Hp快速、簡(jiǎn)便的檢測(cè)對(duì)人群中Hp感染的防治均有很重要的意義。2006年美國(guó)學(xué)者葉國(guó)欽研制出HpS檢測(cè)板并獲得專利［6］。其工作原理是利用膠體金標(biāo)記Hp釋放的尿素酶，當(dāng)結(jié)合物移動(dòng)至固定的抗體區(qū)域時(shí)，與該處的抗體發(fā)生特異性結(jié)合而被截留，聚集在檢測(cè)帶上，通過(guò)可目測(cè)的膠體金標(biāo)志物得到直觀的顯示結(jié)果，游離標(biāo)志物則越過(guò)檢測(cè)帶，移動(dòng)至對(duì)照帶結(jié)合，顯示對(duì)照線。該方法特異、敏感、簡(jiǎn)便、快速，一般可在5～15 min內(nèi)出結(jié)果，且不需要特殊設(shè)備。本研究用HpS測(cè)試板檢測(cè)150例患消化道癥狀的患兒，陽(yáng)性檢出率為43.33%（65/150），與上述有關(guān)報(bào)道一致。與RUT方法比較，陽(yáng)性符合率（敏感度）為85.37%，Kappa分析提示兩者有很好的一致性;陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為 53.85%，陰性預(yù)測(cè)值為92.94%，提示HpS測(cè)試板是一種很好的臨床篩查工具。此外，本組有消化系統(tǒng)癥狀的患兒HpS陽(yáng)性率（43.33%）較 RUT 陽(yáng)性率（27.33%）高，其中原因有待進(jìn)一步探討。但RUT陽(yáng)性患兒大部分HpS檢測(cè)均呈陽(yáng)性，支持胃Hp感染者唾液中存在高Hp檢出現(xiàn)象。根據(jù)本研究唾液Hp檢出率高于胃Hp檢出率現(xiàn)象，推測(cè)可能一部分患兒Hp感染尚停留在口中，而未達(dá)到胃內(nèi)定植;以后，隨著時(shí)間的推移，口腔內(nèi)Hp隨唾液下行至胃并定植引起胃炎或消化性潰瘍。此觀念有待進(jìn)一步將本試驗(yàn)組僅HpS陽(yáng)性而RUT目前陰性的患兒動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)其胃Hp是否隨著時(shí)間的推移越來(lái)越多轉(zhuǎn)為陽(yáng)性來(lái)進(jìn)一步得以證實(shí)。將口腔Hp菌在胃定植之前即清除將會(huì)在很大程度上降低胃病的發(fā)生概率，這對(duì)降低我國(guó)兒童Hp高感染率有重要意義。目前研究還發(fā)現(xiàn)口腔Hp感染與復(fù)發(fā)性口腔潰瘍、牙周炎等疾病有關(guān)，與齲病、口臭、口腔癌等疾病關(guān)系尚在研究中［12］。而且隨著胃Hp感染治療失敗研究的深入，發(fā)現(xiàn)口腔Hp存在可能是Hp根除失敗的原因之一，口腔Hp感染還可能是Hp復(fù)發(fā)和再感染的重要原因［13］，提醒醫(yī)生要提高Hp根治率、減少?gòu)?fù)發(fā)率，在進(jìn)行胃Hp感染治療的同時(shí)還要診治口腔Hp感染。在此方面還有待臨床工作者進(jìn)行大量相關(guān)研究來(lái)驗(yàn)證。

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