楊瑩瑩，王鎮(zhèn)山，薛 欣，聶大平，李玉中

(1.大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第二醫(yī)院 呼吸科，遼寧 大連 116027；2.鳳城市中心醫(yī)院 內(nèi)科，遼寧 丹東 118100；3.大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第二醫(yī)院 檢驗科，遼寧 大連 116027)

近年來，隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用或濫用，出現(xiàn)了多重耐藥甚至是泛耐藥菌株，多重耐藥性不動桿菌感染的治療問題迫在眉睫。磷霉素化學(xué)結(jié)構(gòu)特異，除了具有廣譜抗菌作用外，還具備良好的酶穩(wěn)定性、無交叉耐藥性。國外有學(xué)者報道，磷霉素與其它抗菌藥物在體外聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同抗菌效應(yīng)[1,2]。本文研究磷霉素與9種抗菌藥物體外聯(lián)合藥敏，為臨床聯(lián)合用藥提供實驗室依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材 料

1.1.1 菌株：收集自2008年2月～2009年10月大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院臨床患者的痰標(biāo)本，經(jīng)API 鑒定系統(tǒng)鑒定為不動桿菌47株。標(biāo)準(zhǔn)參考菌株為ATCC25922，由中國藥品生物制品檢定所提供。

1.1.2 培養(yǎng)基：MH(A)培養(yǎng)基及胰蛋白胨大豆肉湯均為北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品，批號分別為20061125和20070202。

1.1.3 抗菌藥物：磷霉素(fosfomycin,FOM)為東北制藥總廠產(chǎn)品，每支2.0 g，批號為0907119；阿米卡星(amikacin,AMK)為上海禾豐制藥有限公司產(chǎn)品，每支0.2 g，批號為090702；頭孢他啶(ceftazidime,CAZ)為韓美藥品株式會社產(chǎn)品，批號為10G081209；頭孢哌酮/舒巴坦(cefoperazone/sulbactam)為輝瑞制藥有限公司產(chǎn)品，批號為95839074；頭孢吡肟(cefepime,FEP)為深圳信立泰藥股份有限公司產(chǎn)品，批號為20090508；亞胺培南/西司他丁(imipenem and cilastatin)為杭州默沙東制藥產(chǎn)品，批號為09277；左氧氟沙星(levofloxacin,LVLX,效價99.7%)、環(huán)丙沙星(ciprofloxacin,CPLX,效價84.2%)、美羅培南(meropenem,MEM,效價87.76%)、頭孢呋辛(cefuroxime,CXM,效價92%)為中國藥品生物制品檢定所產(chǎn)品。

1.2 方 法

1.2.1 測定單獨應(yīng)用時的最低抑菌濃度(MIC)：瓊脂二倍稀釋法測定磷霉素與其它9種抗菌藥物的MIC。

1.2.2 測定聯(lián)合應(yīng)用時的MIC：按1∶1的濃度比例，瓊脂二倍稀釋法測定磷霉素與9種抗菌藥物分別聯(lián)用的MIC。

1.2.3 計算部分抑菌濃度(FIC)指數(shù)：FIC指數(shù)=A藥聯(lián)合時的MIC/A藥單用時的MIC+B藥聯(lián)合時的MIC/B藥單用時的MIC。

1.2.4 判定標(biāo)準(zhǔn)：FIC指數(shù)≤0.5為協(xié)同作用；0.52為拮抗作用。

2 結(jié) 果

2.1 磷霉素和其它9種抗菌藥物單獨應(yīng)用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

如表1所示，根據(jù)CLSI制定的耐藥標(biāo)準(zhǔn)[3]，磷霉素、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢吡肟、阿米卡星對不動桿菌的MIC50、MIC90均顯示耐藥，美羅培南、亞胺培南/西司他丁對不動桿菌的MIC50均顯示中介。

表1 磷霉素與其它9種抗菌藥物單獨應(yīng)用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

2.2 磷霉素與其它9種抗菌藥物分別聯(lián)用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

如表2所示，磷霉素與這9種抗菌藥物分別按1∶1聯(lián)用對47株不動桿菌的MIC50值均有所下降，其中除左氧氟沙星及頭孢哌酮/舒巴坦MIC50值下降至原值1/2外，其余均降至原值的1/4或1/4以下。

表2 磷霉素與其它9種抗菌藥物分別聯(lián)合應(yīng)用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

藥物聯(lián)合比例為1∶1

2.3 磷霉素與其它9種抗菌藥物分別聯(lián)用的體外相互作用所占比例

如表3所示，磷霉素與9種抗菌藥物分別按1∶1聯(lián)用后協(xié)同/相加作用的比例大于無關(guān)作用的比例，未見拮抗作用，尤其是磷霉素與阿米卡星聯(lián)用后，使后者由耐藥變成敏感。

表3 磷霉素與9種抗菌藥物分別聯(lián)用的體外相互作用所占比例

3 討 論

近年來隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用或濫用，細菌耐藥率呈逐漸上升趨勢，常呈現(xiàn)多重耐藥性甚至泛耐藥性[4]。有報道磷霉素與其它抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用可增加后者的抗菌活性。

本研究結(jié)果顯示，磷霉素與其它9種抗菌藥物雖然對不動桿菌的MIC值較高，僅美羅培南、亞胺培南/西司他丁顯示中介，其余均顯示耐藥；但磷霉素與這9種抗菌藥物分別聯(lián)合應(yīng)用后，各自的MIC值均有所降低，以協(xié)同或相加作用為主，增強了后者的抗菌活性。尤其是磷霉素與阿米卡星聯(lián)用后，使后者由耐藥變成敏感，可能與近年來阿米卡星使用較少有關(guān)。

磷霉素屬于細菌繁殖期快速殺菌劑，抗菌譜廣，對革蘭陽性球菌及革蘭陰性桿菌均有殺滅作用；其化學(xué)結(jié)構(gòu)簡單而獨特，不易被細菌轉(zhuǎn)化為菌體內(nèi)有用的物質(zhì)，與其它抗菌藥物無交叉耐藥性；分子小，滲透性強，細菌改變膜通透性對其作用影響不大；磷霉素作用于細菌細胞壁合成的第一步，因其化學(xué)結(jié)構(gòu)與細菌細胞壁粘肽合成初期的烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)移酶(EP轉(zhuǎn)移酶)的底物磷酸烯醇丙酮酸(PEP)相似，競爭性抑制使該轉(zhuǎn)移酶失活，阻抑了粘肽合成的第一步，從而抑制細菌細胞壁的早期合成，破壞其完整性，有利于其它抗菌藥物進入細菌體內(nèi)，通過不同的作用機制而殺滅細菌；能夠破壞細菌生物被膜或抑制其形成[5,6]。本研究為磷霉素與其它抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

參考文獻:

[1] Grif K，Dierich MP，Pfaller K，et al.In vitro activity of fosfomycin in combination with various antistaphyloccal substances[J].J Antimicrob Chemother,2001,48(2):209-217.

[2] Kastoris AC，Rafailidis PI,Vouloumanou EK，et al.Synergy of fosfomycin with other antibiotics for Gram-positive and Gram-negative bacteria[J].Eur J Clin Pharmacol,2010,66(4):359-368.

[3] Clinical and Laboratory Standards Instiute (CLSI)/NCCLS[S].Performence stcmdards for antimicrobial susceptibility testing stamdards:nighteenth informational supplement,2009.M100-S19.

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[6] 連家建,唐青云.磷霉素鈉與其他抗菌藥聯(lián)用的協(xié)同作用及其臨床應(yīng)用[J].國外醫(yī)藥(抗生素分冊)，2003,24(1):44-46.