高 健 李相良 .吉林省永吉縣計(jì)劃生育服務(wù)站綜合門(mén)診，吉林永吉300；. 解放軍第四六五醫(yī)院普外科，吉林吉林300

目前大腸癌的預(yù)后仍不理想，約有50%的患者死于治療后的復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，患者預(yù)后差與其不能早期診斷密切相關(guān)[1]。多梳基因-1（Bmi-1）為多梳基因家族(PcG)成員之一，研究顯示其在腫瘤的診斷和預(yù)后判斷中具有廣闊的前景[2-3]。因此，筆者采用免疫組化技術(shù)，檢測(cè)了大腸癌患者組織中Bmi-1蛋白的表達(dá)情況，以探討其與大腸癌的關(guān)系及相關(guān)的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集2007年1月～2009年1月來(lái)筆者所在醫(yī)院進(jìn)行治療的大腸癌癌患者32例，所有病例均經(jīng)活檢病理診斷證實(shí)為大腸癌。其中，男19例，女13例。年齡25～79歲，平均（60.2±11.8）歲。按照大腸癌的Dukes分期分為A、B、C、D四期。其中，A期6例，B期8例，C期11例，D期7例。另取活檢的20例正常組織作為對(duì)照組。

1.2 主要試劑

Bmi-1蛋白抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司，濃縮型SP免疫組化超敏試劑盒及DAB顯色試劑盒購(gòu)自福州邁新生物公司。

1.3 Bmi-1蛋白的免疫組化染色

實(shí)驗(yàn)所取標(biāo)本置于4%多聚甲醛固定，4～6 μm石蠟切片常規(guī)脫蠟后，分別用于常規(guī)HE染色和免疫組化染色。免疫組化染色按照試劑盒的說(shuō)明操作。

結(jié)果判斷：Bmi-1陽(yáng)性表達(dá)定位于細(xì)胞核，呈黃色或棕黃色。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：高倍鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜10%為陰性表達(dá)，＞10%為陽(yáng)性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料使用x2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Bmi-1蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)

Bmi-1蛋白陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞核，Bmi-1蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)率為56.3%（18/32），而在正常對(duì)照組織中僅有15.0%（3/20）的表達(dá)，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見(jiàn)圖1。

圖1 Bmi-1蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)

2.2 Bmi-1蛋白的表達(dá)與大腸癌臨床特征的關(guān)系 （表1）

表1 Bmi-1蛋白的表達(dá)與大腸癌臨床特征的關(guān)系

3 討論

近半個(gè)世紀(jì)以來(lái)世界各國(guó)腫瘤的發(fā)病率和死亡率逐漸上升，已超過(guò)心血管疾病成為新世紀(jì)人類的頭號(hào)殺手，其中由大腸癌所導(dǎo)致的死亡占整個(gè)腫瘤死亡的9%[1]。大腸癌的發(fā)生、發(fā)展伴有多種癌基因的激活和抑癌基因的失活，近年來(lái)的統(tǒng)計(jì)顯示大腸癌的發(fā)病率逐年增高，且有年輕化的趨勢(shì)，大多數(shù)患者死亡率高的原因主要是大部分患者明確診斷時(shí)已處于中晚期，錯(cuò)過(guò)了治療的時(shí)機(jī)。有統(tǒng)計(jì)顯示處于Dukes A期的患者5年生存率可以高達(dá)90%以上，說(shuō)明早期診斷在大腸癌預(yù)后中的重要作用[4]。因此，尋找一種能早診斷并監(jiān)測(cè)其復(fù)發(fā)和預(yù)后判斷的生物學(xué)指標(biāo)是目前研究的熱點(diǎn)。Bmi-1基因是已被實(shí)驗(yàn)證實(shí)的癌基因，主要是負(fù)性下調(diào)抑癌基因p16和p14，使p16和p14喪失抑制細(xì)胞G1-S期過(guò)度的功能，從而導(dǎo)致細(xì)胞惡性克隆性增生[5]，大量研究顯示Bmi-1蛋白在肺癌、卵巢癌、鼻咽癌、乳腺癌等人類多種惡性腫瘤中表達(dá)升高，筆者的研究也顯示Bmi-1蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)率為56.3%，顯著高于正常對(duì)照組織中的15.0%，說(shuō)明Bmi-1蛋白可以作為大腸癌鑒別診斷的1個(gè)標(biāo)志蛋白。

Dukes分期中A、B期無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，C、D期有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，筆者的結(jié)果顯示分期之間Bmi-1蛋白的表達(dá)也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示其與腫瘤的轉(zhuǎn)移有一定的相關(guān)性，可成為大腸癌患者預(yù)后不良的一個(gè)參考指標(biāo)。

綜上所述，Bmi-1蛋白在大腸癌的發(fā)生發(fā)展中起到一定的作用，可以用于腫瘤的良惡性鑒別診斷、臨床分級(jí)以及判斷預(yù)后等方面，具有顯著的臨床意義。

[1] Jemal A,Siegel R,Xu J,et al.Cancer statistics,2010[J].CA Cancer J Clin, 2011, 60(5): 277-300.

[2] Haupt Y,Alexander WS，Barri G，et a1.Novel zinc finger gene implicated as myc collaborator by retrovirally accelerated lymphomagenesis in Emu-myc transgenic mice[J].Cell，1991，65(5):753-763.

[3] 闞方功，彭開(kāi)桂.Bmi-1與實(shí)體瘤的關(guān)系研究進(jìn)展[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，35（11）：1193-1196.

[4] 呂洋，劉博，吳靖芳.大腸癌相關(guān)生物標(biāo)志物的病理學(xué)進(jìn)展[J].河北北方學(xué)院學(xué)報(bào) (醫(yī)學(xué)版 )，2007，24（1）：80-82.

[5] 胡中華，胡義德.BMI-1基因與腫瘤關(guān)系研究進(jìn)展[J].中華腫瘤防止雜志，2006，13（23）：1824-1827.