郭阿君 王志英 鄒 麗
(北華大學(xué),吉林,132013) (東北林業(yè)大學(xué))
銀中楊(Populus alba×berolinensis)是黑龍江省森林與環(huán)境科學(xué)研究院于1961年以采自熊岳的銀白楊(Populus alba)為母本,以當(dāng)?shù)刂袞|楊(Populus×berolinensis)為父本,經(jīng)人工雜交選育而成的雄性無(wú)性系[1]。銀中楊樹(shù)干通直,樹(shù)皮灰綠,披白粉,樹(shù)冠圓錐形,樹(shù)姿優(yōu)美,葉片兩色,葉面深綠色,葉背銀白色,具有極高的觀賞價(jià)值,是北方地區(qū)城市綠化及防護(hù)林、用材林的首選楊樹(shù)優(yōu)良品種。目前,我國(guó)對(duì)銀中楊的研究主要集中在繁育、撫育管理及生理生態(tài)等方面,關(guān)于銀中楊枝葉揮發(fā)性成分及抑菌作用的研究少有報(bào)道。筆者針對(duì)銀中楊揮發(fā)性有機(jī)物成分及其對(duì)空氣微生物的抑制作用進(jìn)行研究,為合理地配置、開(kāi)發(fā)、利用銀中楊資源提供理論依據(jù)。
供試植物銀中楊采自東北林業(yè)大學(xué)哈爾濱實(shí)驗(yàn)林場(chǎng)銀中楊純林。所用儀器包括島津 GC—17G氣譜儀、島津 GC—MSQP5050質(zhì)譜儀、美國(guó)ENTECH7100預(yù)濃縮儀、QC—1B型便攜式氣泵。
利用SUMMA采樣罐采集銀中楊VOCs。在植物VOCs采集過(guò)程中,利用硅膠管將氣泵、過(guò)濾介質(zhì)、取樣袋、收集管等連接成閉路系統(tǒng)[2](圖1),將銀中楊枝葉套入取樣袋中,充入過(guò)濾后的空氣,富集植物VOCs 10 min后,利用經(jīng)高純氮?dú)馇逑春蟮腟UMMA罐內(nèi)產(chǎn)生的負(fù)壓(罐內(nèi)氣壓約200 kPa),收集植物VOCs。袋內(nèi)不套入植物者作為空白。
圖1 植物揮發(fā)性物質(zhì)采集裝置
GC 條件:HP—5 石英毛細(xì)管柱(30.00 m×0.25 mm×0.25 μm),進(jìn)樣口溫度250℃,程序升溫:初始溫度40℃且保持2 min,以5℃/min的速度升至100℃并保持0.5 min,再以2℃/min的速度升至250℃并保持8 min。載入氣體為氦氣,載氣壓力 6 kPa;進(jìn)樣量 0.1 μL。
MS條件:電離方式為EI,EI源70eV,源溫200℃,掃描范圍 m/z=10 ~400,掃描時(shí)間0.14 s。
聯(lián)機(jī)檢索:采用氣質(zhì)聯(lián)用儀計(jì)算機(jī)的NIST2008譜庫(kù),自動(dòng)檢索分析組分的質(zhì)譜數(shù)據(jù),結(jié)合色譜保留時(shí)間及匹配度,鑒定揮發(fā)物成分,利用色譜峰面積歸一化法求出各組分占揮發(fā)物總量的比值。
采樣方法:應(yīng)用平皿沉降法[3],將盛培養(yǎng)基的平皿持平暴露在空氣中5 min,針對(duì)空氣中常見(jiàn)的細(xì)菌、霉菌和放線菌,分別使用牛肉蛋白胨培養(yǎng)基、馬丁培養(yǎng)基、高氏1號(hào)培養(yǎng)基[4]。為了降低環(huán)境條件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,于春、夏、秋三季分別取樣,采樣點(diǎn)選擇銀中楊純林林下距地面1.5 m處,每個(gè)采樣點(diǎn)連續(xù)監(jiān)測(cè)3 d,選擇同地形上風(fēng)源裸露地帶(對(duì)測(cè)點(diǎn)影響最大)作為對(duì)照。
微生物的培養(yǎng)及數(shù)據(jù)處理:將取樣后的培養(yǎng)皿置于溫箱中適宜溫度下培養(yǎng),36~72 h后檢查菌落數(shù)。
抑菌率=((對(duì)照菌落數(shù)-處理菌落數(shù))/對(duì)照菌落數(shù))×100%。
按上述試驗(yàn)條件對(duì)銀中楊VOCs進(jìn)行分析,獲得銀中楊VOCs的總離子色譜圖(圖1)??鄢镜卓諝怆s質(zhì),經(jīng)分析確定化合物種類(lèi)及占揮發(fā)物總量的比值(表1)。
分析結(jié)果表明,銀中楊VOCs成分以烷烴、烯烴化合物為主,但在不同季節(jié),銀中楊VOCs成分及占揮發(fā)物總量的比值存在差異。春季銀中楊VOCs以烷烴、烯烴類(lèi)化合物為主,其主要成分為1-戊炔(46.82%),遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出萜類(lèi)物質(zhì)所占揮發(fā)物總量的值。夏季萜類(lèi)、烷烴、烯烴及炔烴類(lèi)化合物所占比例有所下降,酮類(lèi)物質(zhì)比例增大。萜類(lèi)物質(zhì)中石竹烯占揮發(fā)物總量最高(8.53%),其次為龍腦(3.54%)、α-石竹烯(2.29%),還有少量的乙酸龍腦酯(1.41%)、D-檸檬烯(1.37)等物質(zhì)釋放;烷烴、烯烴及炔烴類(lèi)物質(zhì)中2-氯-1-丙烯質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高(40.52%),此外還有大量的 1,1,3,3-四氯-2-丙酮釋放(19.01%)。秋季銀中楊VOCs中以烷烴、烯烴及炔烴類(lèi)物質(zhì)為主,占VOCs總量的82.53%,萜類(lèi)物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著降低,以 α-蒎烯(2.8%)及D-檸檬烯(2.71%)為主,還存在少量酯類(lèi)物質(zhì)(5.48%)及微量醇類(lèi)(0.14%)、呋喃類(lèi)(0.78%)、酮類(lèi)(0.43%)、含氮化合物(1.70%);烷烴、烯烴及炔烴類(lèi)物質(zhì)中1-戊炔質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高(76.25%),酯類(lèi)物質(zhì)以3-己烯-1-醇-乙酸酯為主(4.94%)。
圖2 銀中楊春、夏、秋揮發(fā)性成分的總離子色譜圖
表1 銀中楊揮發(fā)性物質(zhì)GC/MS分析結(jié)果
續(xù)表1
經(jīng)過(guò)在不同季節(jié)、不同采樣點(diǎn)的實(shí)地監(jiān)測(cè),銀中楊VOCs抑菌效果的數(shù)據(jù)如表2。
表2 不同季節(jié)銀中楊VOCs對(duì)空氣微生物的抑制
通過(guò)對(duì)供試植物林地中空氣微生物含量的監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn),銀中楊對(duì)空氣中的細(xì)菌抑制能力較強(qiáng)[5],抑菌率在51% ~56%,其中夏季抑制作用最強(qiáng),秋季稍有回落,但均明顯高于春季。
銀中楊葉背密生絨毛,具有極強(qiáng)的滯塵能力,可以有效降低隨浮塵進(jìn)入林內(nèi)的細(xì)菌。北方夏、秋兩季的氣溫及日照特點(diǎn)使植物能揮發(fā)出大量的VOCs[6],其中含有較多對(duì)微生物具有抑制作用的萜烯類(lèi)、有機(jī)酸、醚等化合物,能有效降低空氣中微生物含量。此外,林中較高的負(fù)離子濃度對(duì)抑制微生物亦有較好作用。
由于供試植物所在純林郁閉度較高,林內(nèi)空氣濕度較大,適于霉菌滋長(zhǎng)[7],因此林分內(nèi)霉菌數(shù)量較對(duì)照地高。林內(nèi)空氣中放線菌含量很小,從監(jiān)測(cè)結(jié)果中未發(fā)現(xiàn)明顯變化規(guī)律。
在生態(tài)系統(tǒng)中,植物VOCs具有重要的化學(xué)信息傳遞作用;在人體生理健康方面,植物VOCs能有效緩解疲勞、放松心情,具有良好的保健作用;在凈化空氣方面,植物釋放的萜烯類(lèi)化合物能有效抑制空氣中微生物的生長(zhǎng),從而具有清新空氣的作用。因此,明確植物VOCs成分及釋放規(guī)律,對(duì)于城市綠化中植物的選擇和配置具有重要的意義。
本研究中銀中楊在生長(zhǎng)過(guò)程中釋放的揮發(fā)性物質(zhì)成分復(fù)雜且存在季節(jié)性差異。其中大量的萜烯類(lèi)物質(zhì)如α-蒎烯、檸檬烯、龍腦、乙酸龍腦酯等具有較好的殺菌、鎮(zhèn)靜、降血壓等功效,結(jié)合這一特性,在今后的綠地建設(shè)中,可以更加科學(xué)、合理的利用銀中楊營(yíng)造健康、綠色的生態(tài)環(huán)境。
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