楊明會 張海燕 王文明 劉毅 李紹旦

急性肺損傷(acute lung injury，ALI)是臨床較為常見的急危重癥，死亡率高，由于發(fā)病機制尚未完全闡明，目前尚無特效的治療手段[1]。有研究表明，中藥對ALI具有良好的防治作用[2]。ALI病理過程中，肺血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，各種炎性細(xì)胞聚集，血管通透性增加，引起肺小血管的充血和肺間質(zhì)水腫[3]，導(dǎo)致肺部血管舒縮功能障礙，進一步加重肺組織損傷，而血栓素B2(thromboxane B2，TXB2)、6-酮前列腺素F1α(6-keto-prostaglandinF1α，6-Keto-PGF1α)是反映血管舒縮情況的重要指標(biāo)[4]。本研究予以益氣活血中藥黃芪與丹參對脂多糖(lipopolysacchride，LPS)急性肺損傷模型大鼠進行干預(yù)，通過觀察血漿TXB2、6-Keto-PGF1α含量的變化，來探討益氣活血中藥防治急性肺損傷可能的作用機理。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

兩月齡健康清潔級SD雄性大鼠30只，體重(200±20)g，由解放軍總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供。實驗動物許可證號[HCXX(京)2006-0094]。

1.2 供試藥品

益氣活血中藥由生黃芪和丹參組成，生黃芪和丹參用量為1∶1，生藥材由解放軍總醫(yī)院中藥房采購及鑒定。由解放軍總后衛(wèi)生部藥品檢定所制備水煎劑，每毫升藥液相當(dāng)于生藥0.25 g。

1.3 主要試劑

脂多糖(lipopolysacchride，LPS)為Sigma公司產(chǎn)品。TXB2放免試劑盒、6-Keto-PGF1α放免試劑盒均購自北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司。速眠新Ⅱ注射液由解放軍軍需大學(xué)獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，吉獸藥試字(2004005013)。

1.4 動物分組與處理方法

用隨機數(shù)字法將30只大鼠隨機分為3組，即正常對照組、模型對照組、中藥組各10只。

所有大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后，模型對照組和正常對照組每日予以生理鹽水2 ml灌胃，連續(xù)7天。中藥組，每日予以中藥2 ml(相當(dāng)于生藥0.5 g)灌胃，連續(xù)7天。所有大鼠用速眠新Ⅱ肌肉注射麻醉后，模型對照組、中藥組動物造模采用LPS氣管滴入法[5]。每只大鼠LPS用量按1 mg/kg體重計算，溶于0.2 ml生理鹽水。正常對照組大鼠每只氣管滴入0.2 ml生理鹽水。上述所有大鼠在經(jīng)氣管滴入LPS或生理鹽水處理后3小時，靜脈取血，檢測血漿TXB2和6-Keto-PGF1α。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

正常對照組大鼠的血漿TXB2含量最低，為(882.81±44.95)pg/ml，模型對照組大鼠的血漿TXB2含量最高，為(1259.09±32.72)pg/ml，模型對照組與正常對照組、中藥組兩組比較具有顯著性差異(P<0.01)。正常對照組與中藥組比較無顯著性差異(P>0.05)。

模型對照組大鼠的血漿6-Keto-PGF1α含量最低，為(121.64±17.72)pg/ml，正常對照組大鼠的血漿6-Keto-PGF1α含量最高，為(236.05±35.18)pg/ml，模型對照組與正常對照組、中藥組兩組比較具有顯著性差異(P<0.01)。正常對照組與中藥組比較無顯著性差異(P>0.05)。見表1。

表1 實驗大鼠血漿TXB2與6-Keto-PGF1α含量比較

3 討論

ALI/ARDS的發(fā)病機制尚未完全闡明，對其發(fā)病機制的深入探討與中西醫(yī)治療有效藥物的篩選，在很大程度上依賴于和人類ALI/ARDS病理改變相似的實驗動物模型的建立與應(yīng)用。LPS氣管滴入法制備ALI的動物模型，是當(dāng)前公認(rèn)的成熟模型[6]，已廣泛地應(yīng)用于ALI發(fā)病機制和預(yù)防治療的研究中。本研究采用此模型來探討益氣活血中藥黃芪與丹參防治ALI的作用機理。

黃芪，味甘，性溫，歸肺、脾經(jīng)，有益氣固表、補益脾肺、斂瘡生肌之功效，現(xiàn)代藥理研究表明，黃芪具有增強心肌收縮力，清除自由基，減少過氧化脂質(zhì)，增加超氧化歧化酶活性，抑制血小板凝聚，降低血液黏稠度，改善微循環(huán)等作用[7]。丹參，味苦，性微寒，歸心、肝經(jīng)，具有祛瘀止痛、涼血消癰等功效，現(xiàn)代藥理研究顯示，丹參具有改善微循環(huán)、促進組織修復(fù)與再生、抗炎、抗缺氧等作用[8]。丹參得黃芪之助，活血之力倍增，黃芪得丹參相佐，生新而不留瘀，兩藥配伍，相得益彰。

血栓素A2(thromboxane A2，TXA2)、前列環(huán)素(prostacyclin，PGI2)是機體調(diào)節(jié)血小板功能、保護血管的一對重要因子。TXA2主要由血小板、白細(xì)胞分泌合成，是目前已知最強的收縮血管物質(zhì)，也是體內(nèi)較強的血小板聚集劑，能夠促進血小板聚集及血栓形成；PGI2主要來源于內(nèi)皮細(xì)胞，有較強的擴張血管和抗血小板聚集作用，可拮抗TXA2作用，抑制血小板聚集，擴張血管，穩(wěn)定細(xì)胞膜[9]。正常生理狀態(tài)下循環(huán)血漿中TXA2和PGI2濃度處于相對平衡狀態(tài)，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定[10]。當(dāng)TXA2升高、PGI2降低，打破兩者濃度平衡時，可引發(fā)血管收縮、血小板聚集及血栓形成等。由于體內(nèi)TXA2和PGI2很不穩(wěn)定，迅速代謝為穩(wěn)定而又無活性的TXB2和6-K-PGF1α，因而可通過測定TXB2、6-K-PGF1α作為判斷其濃度的指標(biāo)[11]。本研究結(jié)果顯示，中藥組大鼠的血漿TXB2含量低于模型對照組(P<0.01)，6-Keto-PGF1α含量高于模型對照組(P<0.01)，且與正常對照組差異不大，提示益氣活血中藥黃芪與丹參可通過調(diào)節(jié)TXA2和PGI2的濃度，維持TXA2/PGI2的相對平衡，抑制血小板聚集，擴張血管，從而達(dá)到對模型大鼠ALI的防治作用。

通過本研究結(jié)果推斷，益氣活血中藥黃芪與丹參可能通過調(diào)節(jié)TXA2和PGI2的濃度，維持TXA2/PGI2的相對平衡，發(fā)揮防治模型大鼠ALI的作用。但中藥防治疾病是多途徑、多靶點、多環(huán)節(jié)的，可能存在其他防治ALI的作用途徑，需進一步深入研究。

[1] 段立彬，何先弟. 細(xì)胞因子與急性肺損傷的關(guān)系[J]. 蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2010，35(2)：208-210.

[2] 劉建新，余林中. 中藥保護急性肺損傷作用機理研究進展[J]. 陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，32(6)：83-85.

[3] 孫海鵬，呼彩蓮. 急性肺損傷發(fā)病機制的研究進展[J]. 醫(yī)學(xué)信息，2010，23(2)：532-533.

[4] 張勁松，黃培培，陳旭鋒，等. 兔急性肺血栓栓塞及溶栓后TXA2、PGI2及ET-1水平的變化與血流動力學(xué)相關(guān)性研究[J]. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2010，30(3)：375-379.

[5] 周曉紅，韋鵬，凌毅群，等. 內(nèi)源性H2S對LPS所致大鼠急性肺損傷時肺動脈高壓的影響及其與一氧化氮的相互作用[J].中國病理生理雜志，2006，22(4)：715-721.

[6] 方青，高榮，高英杰，等. 急性肺損傷動物模型的研究現(xiàn)狀[J]. 中國畜牧獸醫(yī)，2010，37(5)：51-54.

[7] 楊金泉，何海波. 黃芪的藥理作用研究進展[J]. 醫(yī)學(xué)理論與實踐，2010，23(2)：148-150.

[8] 何根云. 丹參的藥理作用與臨床應(yīng)用[J]. 浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，21(2)：124-125.

[9] 吳蘇寧. 阿魏酸鈉對急性腦梗死患者血栓素B2、6-酮-前列環(huán)素F1α的影響[J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，49 (37)：44-45.

[10] 李澤庚，張念志，韓明向，等. 96例肺氣虛患者血漿血栓素及前列環(huán)素水平觀察[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志，2004，11(9)：792-794.

[11] 成涌，李志奎. 慢性肺心病患者血漿神經(jīng)遞質(zhì)內(nèi)皮素、血栓素B2和6-酮-前列腺素F1α的變化及臨床意義[J]. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，30(6)：1244-1246.