宋 浩 ，丁 偉 ，沙 偉 ，周 燕 ，陳 薇 *

（1.湖南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司，長(zhǎng)沙 410014；2.上海中科新生命生物科技有限公司，上海 200233；3.中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞研究所蛋白質(zhì)組學(xué)中心，上海 200233）

煙草青枯病是由茄科勞爾氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的一種毀滅性災(zāi)害。其最顯著的癥狀是枯萎，一旦發(fā)病即可造成全株死亡，對(duì)煙草的產(chǎn)量和質(zhì)量影響極大。煙草青枯病廣泛分布于全球各地，以熱帶和亞熱帶地區(qū)的危害最為嚴(yán)重。世界各地每年都有青枯病的發(fā)生和流行，造成了巨大的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)損失[1]。因此，研究青枯菌致病機(jī)理和尋找有效的防治青枯病的方法是當(dāng)前植物病理學(xué)研究的重要課題之一[2]。目前對(duì)于煙草青枯病抗性機(jī)理的研究，主要集中在基因定位和分子標(biāo)記輔助育種[3]、基因組學(xué)[4-6]和抗性基因的轉(zhuǎn)化[7-9]等方面，而在蛋白質(zhì)組水平上的研究在國(guó)內(nèi)外還未見(jiàn)正式報(bào)道。

蛋白質(zhì)組學(xué)是“后基因組時(shí)代”迅速發(fā)展起來(lái)的技術(shù)體系，通過(guò)高通量和高分辨率的蛋白分離鑒定技術(shù)可以全景式地研究一種生物基因組編碼的全部蛋白質(zhì)[10-13]。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在生長(zhǎng)發(fā)育[14]和各種外界因素作用下的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能和豐度的變化[15-18]等熱點(diǎn)研究領(lǐng)域已成為一種十分有效且應(yīng)用廣泛的分析手段，該技術(shù)有助于在蛋白水平上全面系統(tǒng)認(rèn)識(shí)病原菌侵染后宿主的抗病特點(diǎn)和包括細(xì)胞代謝在內(nèi)的多個(gè)生物學(xué)過(guò)程。本研究以兩個(gè)不同青枯病抗性煙草品種的葉片為研究材料，采用雙向電泳結(jié)合質(zhì)譜分析技術(shù)，對(duì)不同的青枯病抗性品種的蛋白質(zhì)表達(dá)譜進(jìn)行比較研究，旨在探討不同青枯病抗性煙草品種在蛋白質(zhì)組學(xué)水平存在的差異及其對(duì)青枯病抗性的影響，為進(jìn)一步明確煙草的抗青枯病機(jī)制提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試煙草（Nicotiana tabacumL.）品種為抗青枯病品種DB101和易感品種紅花大金元。于2010年3月12日進(jìn)行播種，出苗65 d后取所有葉片，立即在清水中洗凈，吸水紙吸干水分，然后用鋁箔紙包裹，于-80 ℃冰箱備用。

1.2 試劑

載體兩性電解質(zhì)pH 3～10為GE公司產(chǎn)品；丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺、SDS、TEMED、溴酚藍(lán)、Tris-base、甘氨酸等為Bio-Rad公司產(chǎn)品；NP-40、碳酸氫銨、三氟乙酸（TFA）、乙腈（CAN）、α-氰基-4-羥肉桂酸（HCCA）等為Fluka公司產(chǎn)品；尿素（超純）、硫代硫酸鈉（Na2S2O3·5H2O）、過(guò)硫酸銨、鐵氰化鉀、碳酸鉀、β-巰基乙醇等為Amresco公司產(chǎn)品；碘乙酰胺、DTT、Triton X-100等為 Sigma公司產(chǎn)品；胰蛋白酶（Trypsin）為Promega公司產(chǎn)品。

1.3 蛋白質(zhì)提取

稱取1.2 g左右葉片，參照Yan等[19]的方法進(jìn)行葉片全蛋白提取和裂解，按Bradforf法[20]測(cè)定裂解后的樣品蛋白質(zhì)濃度，每根膠條的蛋白上樣量約為 100 μg。

1.4 雙向電泳（2-DE）

二維凝膠電泳參照Casado-Vela等[21]及Yan等[19]的方法進(jìn)行，參照Yan等[19]的方法進(jìn)行銀染色。

1.5 凝膠圖譜分析及差異點(diǎn)的確定

所有凝膠在染完色以后使用 Umax PowerlookⅢ掃描儀進(jìn)行掃描，用ImageMaster 5.0軟件對(duì)分析性圖譜進(jìn)行分析。當(dāng)兩者之間的 Ratio值大于 1.2時(shí)，認(rèn)為具有顯著性差異。確定差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)，并從制備膠上挖取差異點(diǎn)。

1.6 MALDI-TOF/TOF MS 分析及數(shù)據(jù)庫(kù)檢索

將凝膠上的蛋白質(zhì)差異點(diǎn)切下后，參照Fernandez等[22]和Gharahdaghi等[23]的方法進(jìn)行蛋白質(zhì)膠內(nèi)消化，萃取出肽段。用2 mL 20%乙腈溶解肽段，取1 μL樣品干燥后加人0.5 μL HCCA基質(zhì)飽和溶液，混合均勻，上樣1 μL至點(diǎn)樣靶上。室溫干燥后，使用美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司（ABI）ABI 4800 Proteomics Analyzer MALDI-TOF/TOF進(jìn)行分析。質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置如下：反射模式，正離子檢測(cè)，一級(jí)質(zhì)譜的質(zhì)量掃描范圍為800～4 000 Da。對(duì)于每一個(gè)樣品，選擇信噪比最強(qiáng)的8個(gè)峰分別作為母離子，然后進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析。獲得的一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)使用GPS Explore V3.6（ABI）軟件進(jìn)行分析，分析后的每一個(gè)樣品的一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)，使用 MAsc0T（v2.2）搜庫(kù)軟件對(duì)本地?cái)?shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，鑒定蛋白質(zhì)。檢索參數(shù)設(shè)置如下：數(shù)據(jù)庫(kù)為NCBInr；物種為綠色植物；切割的酶為 Trypsin；允許最大的未被酶切位點(diǎn)數(shù)為 1；可變修飾為甲硫氨酸氧化；固定修飾為脲甲基化，母離子質(zhì)量容差為1×10-4Da；片段離子質(zhì)量容差為0.4 Da。

2 結(jié) 果

2.1 DB101和紅花大金元煙葉全蛋白的雙向電泳圖譜

DB101和紅花大金元葉片中的雙向電泳圖譜見(jiàn)圖1。pH 3～10的范圍內(nèi)，2個(gè)樣品經(jīng)銀染后均可得到1 800～2 000個(gè)蛋白點(diǎn)，并且可以看出蛋白在等電點(diǎn)和分子量?jī)蓚€(gè)方向都得到了較好的分離。

圖1 煙草葉片總蛋白的雙向電泳圖Fig.1 Representative 2-DE gels of tobacco leaf proteins

2.2 差異表達(dá)蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜鑒定

定量分析發(fā)現(xiàn)共有 26個(gè)蛋白點(diǎn)的表達(dá)發(fā)生顯著變化（Ratio≥1.2），相對(duì)于易感品種紅花大金元，在抗病品種DB101中有12個(gè)上調(diào)蛋白和14個(gè)下調(diào)蛋白（圖1）。對(duì)這26個(gè)差異蛋白點(diǎn)用串聯(lián)質(zhì)譜的方法（MS/MS）成功鑒定出 22個(gè)（二級(jí)質(zhì)譜匹配肽段得分Score超過(guò)60并且匹配可信度大于95%）（表1）。根據(jù)這22個(gè)蛋白所參與的代謝途徑和生化功能將它們歸納成以下6個(gè)類群：表達(dá)調(diào)控、過(guò)氧化物平衡、光和作用、代謝和能量、防衛(wèi)相關(guān)蛋白和推測(cè)蛋白。其中表達(dá)調(diào)控類有5個(gè)蛋白：次黃嘌呤核苷酸環(huán)水解酶、核苷二磷酸激酶2、30 S核糖體蛋白、TCP-1型分子伴侶和酪蛋白裂解酶。過(guò)氧化物平衡類有3個(gè)蛋白：胞質(zhì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶、類囊體膜抗壞血酸過(guò)氧化物酶和基質(zhì)體膜抗壞血酸過(guò)氧化物酶。光合作用類有7個(gè)蛋白：谷氨酸-1-半醛2、1-氨基變位酶、光合系統(tǒng) I反應(yīng)中心亞基 II、羥基丙酮酸還原酶、磷酸酐酶、核酮糖-1.5-二磷酸羧化酶/加氧酶和2個(gè)ATP酶。代謝和能量類有2個(gè)蛋白：異檸檬酸脫氫酶和谷氨酸脫氫酶B。防衛(wèi)相關(guān)蛋白有二氨基庚二酸脫羧酶、24Kgermi-like蛋白、乙二醛酶和煙草凝集素。同時(shí)還有一個(gè)未知蛋白。

表1 差異表達(dá)蛋白的MS/MS鑒定結(jié)果Table 1 Different regulated expression proteins in DB101 identified by MS/MS

3 討 論

3.1 表達(dá)調(diào)控

植物對(duì)病原信號(hào)的識(shí)別是抗性應(yīng)答的原初反應(yīng)，一旦抗病信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)啟動(dòng)以后，就可以通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，可進(jìn)一步調(diào)節(jié)基因的表達(dá)水平，包括轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平、翻譯水平及翻譯后水平的調(diào)節(jié)。在轉(zhuǎn)錄水平上，核酸的加工是一個(gè)重要的調(diào)節(jié)機(jī)制。本鑒定結(jié)果中得到了一個(gè)促進(jìn)次黃嘌呤核苷酸（IMP）生物合成的關(guān)鍵酶次黃嘌呤核苷酸環(huán)水解酶（PurH，點(diǎn)443），其在DB101中上調(diào)了1.77倍。IMP做為核苷酸從頭合成途徑中的重要中間載體[24-25]，說(shuō)明了轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控過(guò)程可能在煙草抗青枯病中得到加強(qiáng)。本研究發(fā)現(xiàn)一個(gè)在DB101中下調(diào)表達(dá)的與轉(zhuǎn)錄調(diào)控相關(guān)的蛋白核苷二磷酸激酶 2（NDPK2）。該酶除了催化腺苷三磷酸（ATP）和核苷二磷酸（NDP）之間高能磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移外，還具有 NDP激酶活性和蛋白磷酸轉(zhuǎn)移酶活性，并參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[26]。翻譯活性的變化被認(rèn)為是最早脅迫反應(yīng)之一[27]，30 S核糖體蛋白（30 SRP，點(diǎn)1 977）參與到蛋白的翻譯和合成，其在抗病品種DB101中表達(dá)被抑制。翻譯后修飾主要是指蛋白質(zhì)折疊、加工和降解，完成這一調(diào)節(jié)功能的主要是分子伴侶類蛋白。TCP-1型分子伴侶（點(diǎn)392）也叫 CCT復(fù)合體，主要來(lái)自于真核生物的細(xì)胞溶質(zhì)。有研究表明TCP-1型分子伴侶具有重要的亞細(xì)胞功能，據(jù)估計(jì)細(xì)胞內(nèi) 10%蛋白質(zhì)的折疊與其有關(guān)[28]。酪蛋白裂解酶（點(diǎn)173，CIP）廣泛存在于生物系統(tǒng)中，其主要功能是促使ATP酶水解ATP提供能量來(lái)協(xié)助細(xì)胞維持胞內(nèi)蛋白的質(zhì)量，其在分子伴侶、能量依賴性蛋白酶、DNA復(fù)制、蛋白質(zhì)折疊、抗逆性和適應(yīng)性以及基因表達(dá)調(diào)控等多個(gè)方面起作用[29]。TCP-1型分子伴侶和CIP在DB101中的上調(diào)表達(dá)說(shuō)明翻譯后修飾得到加強(qiáng)。

3.2 過(guò)氧化物平衡

越來(lái)越多的證據(jù)表明氧化還原的平衡是連接外界環(huán)境脅迫感受和生理調(diào)節(jié)的一個(gè)橋梁[30]。在各種脅迫條件下，很容易產(chǎn)生活性氧（Reactive oxygen species，ROS），一方面它可以作為信號(hào)分析誘導(dǎo)植物的抗性反應(yīng)，但另一方面它能夠破化植物的細(xì)胞成分。植物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了一套精細(xì)的調(diào)控機(jī)制來(lái)控制活性氧的量。在本鑒定結(jié)果中發(fā)現(xiàn)了 3個(gè)可以調(diào)控 ROS的抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）：胞質(zhì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶（點(diǎn)1 528）、類囊體膜抗壞血酸過(guò)氧化物酶（點(diǎn) 1 340）和基質(zhì)體膜抗壞血酸過(guò)氧化物酶（點(diǎn)1 326）。APX是植物和藻類特有的清除過(guò)氧化氫（H2O2）的重要酶類[31]。抗壞血酸過(guò)氧化物酶主要存在2種同工酶：一種是光合器官型，包括位于基質(zhì)中的APX ( sAPX)和同類囊體膜結(jié)合的 APX（tAPX）；另一種是非光合器官型，主要分布于植物細(xì)胞的胞漿、線粒體和乙醛酸循環(huán)體中[32]。本研究中發(fā)現(xiàn)2個(gè)光合器官型APX在DB101中均上調(diào)表達(dá)，另外1個(gè)非光合器官型APX下調(diào)表達(dá)，表明抗病品種DB101可能存在一個(gè)獨(dú)特的通過(guò)加強(qiáng)光合器官型抗壞血酸過(guò)氧化物酶的活性來(lái)控制和協(xié)調(diào)煙草體內(nèi)活性氧平衡的機(jī)制。但是這些只是根據(jù)結(jié)果的一個(gè)假設(shè)，還需要更多的實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證。

3.3 光合作用

本研究共發(fā)現(xiàn)了7個(gè)與光合作用相關(guān)的蛋白：谷氨酸-1-半醛2,1-氨基變位酶（GAS）、光合系統(tǒng)I反應(yīng)中心亞基 II（PSI-D）、羥基丙酮酸還原酶（GRHPR）、磷酸酐酶（CA）、核酮糖-1.5-二磷酸羧化酶/加氧酶（RuBisCO）和2個(gè)ATP酶（點(diǎn)302和1 812）。

GAS在植物的葉綠素等色素物質(zhì)的合成過(guò)程中起著關(guān)鍵性作用[33]，葉綠素的主要功能是不斷提供其所吸收的光能來(lái)維持植物光和作用的持續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)[34]。PSI-D的主要功能是在光合系統(tǒng)I（PSI）中起到電子傳遞鏈的作用，將葉綠體等色素吸收到的光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能[35]。本試驗(yàn)中 GAS和 PSI-D在抗病品種DB101中分別上調(diào)了4.05倍和2.36倍，表明DB101有可能通過(guò)提高GAS和PSI-D的活性來(lái)加強(qiáng)對(duì)光能的吸收來(lái)滿足抵御青枯菌侵染的能量需求。由于光合機(jī)構(gòu)中的各個(gè)組分是緊密聯(lián)系在一起的，任一組分的破壞都將影響整個(gè)光合作用的效率，另外兩個(gè)與光合能量代謝相關(guān)的酶液泡H+-ATP酶A1亞基亞型和ATP合成酶D鏈，它們?cè)?DB101中的下調(diào)表達(dá)說(shuō)明光合磷酸化產(chǎn)生 ATP過(guò)程在抗病過(guò)程中可能受到抑制。在本鑒定結(jié)果中有2個(gè)與卡爾文循環(huán)相關(guān)的蛋白（RuBisCO和CA）在DB101中均下調(diào)表達(dá)。RuBisCO在光合作用卡爾文循環(huán)里催化第一個(gè)主要的碳固定反應(yīng)，將大氣中游離的二氧化碳轉(zhuǎn)化為生物體內(nèi)儲(chǔ)能分子[36]。CA 是另外一個(gè)重要的光合作用酶，它通過(guò)催化CO2和HCO-3之間的相互轉(zhuǎn)化反應(yīng)來(lái)降低CO2在葉肉細(xì)胞中的擴(kuò)散阻力，為羧化反應(yīng)提供底物[37]，同時(shí)CA能增加RuBisCO的活性[39]。RuBisCO和CA的下調(diào)表達(dá)表明在 DB101中卡爾文循環(huán)可能受到抑制。在卡爾文循環(huán)受到抑制的情況下，本鑒定結(jié)果中得到了一個(gè)與光呼吸緊密相關(guān)的蛋白 GRHPR在DB101中上調(diào)表達(dá)。GRHPR作為光呼吸途徑（相關(guān)酶）中活性最大的酶[40]，其上調(diào)表達(dá)將會(huì)極大地促進(jìn)光呼吸。目前光呼吸被普遍認(rèn)為有利于植物在脅迫條件下維持電子傳遞，能夠有效的阻止光抑制的產(chǎn)生[41]。這些都有可能是 DB101具有抗性的原因。

3.4 代謝和能量

在病菌脅迫條件下，植物細(xì)胞內(nèi)原有的體內(nèi)平衡被打破。為了建立新的平衡，植物需要啟動(dòng)各種防御措施，如清除氧自由基、加強(qiáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)等，這些過(guò)程均需消耗能量，所以植物會(huì)改變體內(nèi)的初級(jí)代謝如碳的能量代謝，使其達(dá)到一個(gè)新的平衡狀態(tài)[42]。我們發(fā)現(xiàn)在青枯菌侵染之后 DB101中上調(diào)了兩個(gè)與糖酵解途徑相關(guān)的蛋白：異檸檬酸脫氫酶（IDHs）和谷氨酸脫氫酶 B（GDH）。IDHs可以催化異檸檬酸氧化脫羧形成 α-酮戊二酸和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）。α-酮戊二酸一方面可進(jìn)入三羧酸循環(huán)途徑進(jìn)行有氧呼吸為植物細(xì)胞提供能量；同時(shí)可為植物細(xì)胞對(duì)氨的吸收同化提供碳骨架。NADPH則可以維系細(xì)胞內(nèi)的氧化還原平衡，幫助植物抵御氧化脅迫[43]。GDH普遍存在于植物中，有研究表明，GDH在植物的衰老過(guò)程及逆境如高溫和水分脅迫等狀況下行使其銨同化功能，在黑暗或者碳脅迫條件下又能氧化脫銨從而為三羧酸循環(huán)提供碳骨架[44]。這兩個(gè)酶在 DB101中的上調(diào)表達(dá)可能會(huì)促進(jìn)糖酵解過(guò)程，為各種抗病反應(yīng)提供更多的能量。

3.5 防衛(wèi)相關(guān)蛋白

本研究共鑒定出4個(gè)防衛(wèi)相關(guān)的蛋白，1個(gè)在DB101中上調(diào)的蛋白二氨基庚二酸脫羧酶（DAPDC），3個(gè)下調(diào)的蛋白24Kgermi-like蛋白、乙二醛酶（GLO）和煙草凝集素（Nictaba）。DAPDC作為 L-賴氨酸合成的關(guān)鍵酶在細(xì)菌的相關(guān)研究中被大量報(bào)道，但在植物中僅有玉米、小麥和煙草等幾個(gè)物種被提及[45]，本鑒定得到的DAPDC為植物的 L-賴氨酸合成研究提供了一部分?jǐn)?shù)據(jù)。同時(shí)DAPDC作用的產(chǎn)物L(fēng)-賴氨酸在植物蛋白質(zhì)合成代謝中必不可少，而且賴氨酸合成前體 DAP的跨壁結(jié)構(gòu)可以穩(wěn)定細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)并抵抗細(xì)胞內(nèi)的滲透壓力[46]。本試驗(yàn)表明，增強(qiáng)表達(dá)的DAPDC可能在煙草對(duì)青枯菌侵染的防衛(wèi)響應(yīng)中扮演著特殊角色。24Kgermi-like蛋白是在多種植物中存在的與Germin具有同源性的一類蛋白。Germin是一種同源五聚體糖蛋白，其可能通過(guò)控制細(xì)胞壁的伸展性而參與植物的早期發(fā)育，同時(shí)它們的表達(dá)還受病原菌、非生物脅迫及光周期等因素的調(diào)控[47]。GLO廣泛存在于原核和真核生物中，參與到細(xì)胞內(nèi)分解毒素甲基乙止醛的代謝過(guò)程中。因此 GLO催化的化學(xué)反應(yīng)可能參與細(xì)胞內(nèi)的一種解毒機(jī)制，同時(shí)發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)GLO可以提高煙草的抗鹽性[48]。Nictaba屬于植物凝集素的一種。Nictaba主要分布于煙草葉片薄壁組織細(xì)胞中，不僅對(duì)病原真菌、細(xì)菌和昆蟲(chóng)有一定的抑制作用，在逆境脅迫下還可以通過(guò)控制細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)參與到基因表達(dá)調(diào)控中[49]。24Kgermi-like蛋白、GLO和Nictaba是3個(gè)研究比較透徹的病原防衛(wèi)相關(guān)蛋白，但在本研究中抗病品種 DB101并沒(méi)有呈現(xiàn)出從無(wú)到有或從低到高的誘導(dǎo)表達(dá)，而在易感品種紅花大金元中的上調(diào)表達(dá)說(shuō)明它們可能會(huì)增強(qiáng)感病煙草對(duì)青枯病的易感性。

4 結(jié) 論

本研究表明，抗病煙草品種DB101對(duì)煙草青枯病病原菌的侵染存在一個(gè)復(fù)雜的抗病信號(hào)轉(zhuǎn)達(dá)和生理調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，其作用機(jī)制可通過(guò)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)反饋出來(lái)。在抗性品種DB101中上調(diào)表達(dá)的蛋白質(zhì)，尤其是脅迫相關(guān)的蛋白質(zhì)，如次黃嘌呤核苷酸環(huán)水解酶、二氨基庚二酸脫羧酶、光和器官型抗壞血酸過(guò)氧化物酶、異檸檬酸脫氫酶和谷氨酸脫氫酶B等，推測(cè)可能與煙草青枯病抗性有關(guān)，其中逆境脅迫蛋白及抗氧化脅迫蛋白質(zhì)可能是煙草抗青枯病病菌侵染的重要因子，在煙草耐受逆境脅迫反應(yīng)與抗病反應(yīng)的“交叉對(duì)話”中發(fā)揮重要作用。而在易感品種紅花大金元中，磷酸酐酶、核酮糖-1.5-二磷酸羧化酶/加氧酶以及 ATP酶等的上調(diào)表達(dá)則表明光合作用卡爾循環(huán)以及電子傳遞鏈在青枯菌侵染下的紊亂和降解；24Kgermi-like蛋白等則有可能會(huì)增強(qiáng)感病煙草對(duì)青枯病的易感性。此外，本研究中尚有 4個(gè)未能鑒定到的差異蛋白和一個(gè)未知蛋白，可能與煙草對(duì)青枯病的抗病性存在一定的相關(guān)性。總之，煙草對(duì)青枯病抗性機(jī)制復(fù)雜，其中涉及到眾多的信號(hào)物質(zhì)和抗性相關(guān)蛋白，隨著蛋白質(zhì)組學(xué)等技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，將會(huì)有更多的抗性相關(guān)基因和蛋白被挖掘，進(jìn)而大大提高人們對(duì)煙草與青枯菌互作機(jī)理的認(rèn)識(shí)。

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